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杭州瑞析科技有限公司
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waters液相色譜儀測定大豆胚軸中單糖鏈大豆皂甙的含量

時間:2011-3-10閱讀:4778
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1儀器和試劑

檢測單元為Waters液相色譜儀是非常靈活的HPLC系統,包WatersTM 717 plus自動進樣器;Waters 600E 制單元;WatersTM 805數據 處理機和 Waters 2410差示折光儀。液相色譜用試劑為色譜純。

2色譜條件

色譜 柱為 ODS-AM303 (YMC46 mm×250 mm5m),柱溫 40℃,流動相為含 01  三氟乙酸的乙腈 一水 (4060vv),流速 1 mL rain~,高純氦氣脫氣 ,進樣量 10 L,分析時間為 45 rain

3標樣配制

大豆皂甙標 準品,實驗室 自行制備,通過 IRFAS-MS HNMR和”C_NMR鑒定 ,液相色譜分析為單一峰。稱取 BaBbBdBeagDg標準品 ,加 甲醇溶解定容至 10 mL,分別配成濃度為0561 05880396 05030344 0406 mg

mL叫的溶液,作為對照品溶液。分別吸取標準品液10 L,供 HPLC分析。

4試樣制備

大豆冷凍干燥后 剝離胚軸 。將 3 kg大豆胚軸研磨粉碎 ,用 15 L 50  甲醇常溫提取 ,提取液經噴霧干燥得粗粉 562 g。將粗粉用等體積正丁醇一水溶液萃取,取正丁醇層,經減壓蒸餾、冷凍干燥,得總糖甙 223 g

5測定

稱取總糖 01 g,用 甲醇定容 50 mL,以Milipore FH  05m過濾膜過濾后作為樣品供試液。分別吸取供試液 1O L,供 HPLC分析。

6結論

建立了大豆胚軸 中單糖鏈大豆皂甙的液相色譜測定方法。采用差示折光檢測法,結果峰面積值和進樣量之間呈 良好 的線性關系 ,用于單糖鏈大豆皂甙的分析中優于紫外檢測法。所建立的檢測方法靈敏度 、重現性均能滿足一般分析要求 ,可用于大豆皂甙樣品中其它大豆皂甙的分析中。

 

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