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上海聯碩生物科技有限公司
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細胞免疫熒光的詳細操作步驟

時間:2023/6/20閱讀:766
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免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。

1、取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿里,PBS洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。
2、4%多聚甲Q固定20分鐘,PBS洗三遍。
3、0.2%Triton X 100通透10分鐘,PBS洗三遍。
4、與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,PBS洗三遍。
5、一抗4度濕盒內過夜,也可37度2小時,感覺前者效果好,PBS洗三遍。
6、二抗室溫2小時,或者37度1半小時,PBS洗三遍。
7、最好用DAPI染核,然后直接照熒光片。
8、蒸餾水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周。

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