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山羊CD14分子ELISA檢測試劑盒操作步驟

閱讀:932      發(fā)布時(shí)間:2022-11-2
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山羊CD14分子ELISA檢測試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為15 ng/ml ,10 ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml)。


2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。


3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。


4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。


5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。


7. 溫育:操作同3。


8. 洗滌:操作同5。


9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 


10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。


11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

Androgen receptor雄激素受體抗體

AVEN細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)

Axin1軸蛋白1抗體

ATG9B自噬相關(guān)蛋白9B抗體

Apg12自噬相關(guān)蛋白12抗體

ATG13自噬相關(guān)蛋白13抗體

ATG3自噬相關(guān)蛋白3抗體

ADAMTS4整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體

phospho-ATF2 (Ser490/498)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757)磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體

ACTR絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATR抗體

ADAM18去整合素樣金屬蛋白酶18抗體

ATF6活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體

AP2 beta銜接蛋白β抗體

Gamma-Adaptin銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體

AQP9水通道蛋白-9抗體

Annexin A3膜粘連蛋白A3抗體

Annexin IV膜粘連蛋白 A4抗體

APG8A自噬相關(guān)蛋白8A抗體

phospho-Akt (Thr450)磷酸化蛋白激酶B抗體


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