脂質(zhì)過氧化傳感器 （Lipid Peroxidation Sensor）

產(chǎn)品描述
脂質(zhì)過氧化 傳感器 （Lipid Peroxidation Sensor）是一種新型的對Lipid ROS 高選擇性、高靈敏的脂質(zhì)過氧化 傳感器，與其他ROS捕獲探針不同之處在于，C11-BODIPY 581/591 具有好的親脂性可以快速入膜，隨后可以選擇性的對細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞膜中的脂質(zhì)過氧化(Lipid ROS)進(jìn)行捕獲，并在氧化后仍保持親脂性，不會離開脂質(zhì)膜，該過程同時伴隨熒光信號變化。多用于熒光顯微鏡、流式細(xì)胞分析等對Lipid ROS 的可視化監(jiān)測。
脂質(zhì)過氧化 傳感器結(jié)構(gòu)中多不飽和丁間二烯基在Lipid ROS 催化氧化后，其熒光發(fā)射峰從590 nm偏移至510 nm。
訂購信息

運輸與保存
藍(lán)冰運輸。-20℃保存，有效期36個月。
使用方法
一、樣品溶解
商品開封后，離心機輕甩；隨后加入適量DMSO 進(jìn)行溶解，溶解度至少可達(dá)25mg/mL。溶解后建議分裝 -20℃ 避光保存，盡量避免反復(fù)凍融，防止吸潮。【注】：樣品輕甩目的是為了避免痕量的探針吸附管壁損失樣本。
二、樣品使用
1.  流式細(xì)胞分析：

1. 懸浮細(xì)胞：800 g 離心5 min 收集細(xì)胞沉淀；隨后PBS 洗滌細(xì)胞兩遍。

2. 貼壁細(xì)胞：棄培養(yǎng)液，用常溫PBS 或培養(yǎng)液輕洗細(xì)胞2 次，隨后胰*消化，800g 離心5 min 收集細(xì)胞沉淀，隨后PBS 洗滌細(xì)胞兩遍，每個樣本收集1~5 ×10⁵ 個細(xì)胞。【注】：操作過程中輕柔吹打細(xì)胞，消化時間不宜過長，劇烈吹打或胰*消化過度會影響實驗結(jié)果。

3. 脂質(zhì)過氧化 傳感器用于脂質(zhì)過氧化檢測的推薦濃度為終濃度5μM；配制方法：用新鮮空白培養(yǎng)液配制終濃度為5μM 的脂質(zhì)過氧化傳感器染色液待用，DMSO 含量≤5‰。【注】：該步操作建議在消化細(xì)胞前準(zhǔn)備好，以免細(xì)胞消化后久置影響實驗結(jié)果。

4. 將事先配置好的脂質(zhì)過氧化染色液加入收集的細(xì)胞沉淀中，推薦體積為500μL，隨后置于37℃孵箱，染色30min，期間5-10min 間隔輕彈細(xì)胞使其懸浮保證染色更充分。

5. 染色結(jié)束后，800 g 離心5 min，棄上清，隨后用PBS 清洗細(xì)胞2 次，加入200μLPBS 重懸細(xì)胞用于流式分析。

2.  原位成像：

1. 接種適當(dāng)密度的細(xì)胞于20mm 規(guī)格的蓋玻片上（也可用共聚焦小皿替代），給予實驗藥物處理適當(dāng)時

2. 間后，吸去培養(yǎng)液，用PBS 洗滌細(xì)胞一遍；加入500 μL 配制好的脂質(zhì)過氧化染色液，于37℃染色30min；配制方法參考流式分析中的染色液配制。

3. 棄培養(yǎng)液，PBS 洗滌細(xì)胞兩遍后于熒光顯微鏡或激光共聚焦下進(jìn)行成像檢測。細(xì)胞在染色后應(yīng)在1 h之內(nèi)完成檢測。

3.  檢測條件：
該分子探針在還原狀態(tài)下最佳激發(fā)波長為581 nm, 發(fā)射為591nm；被Lipid ROS 氧化后最佳激發(fā)波長
為500 nm，發(fā)射在510nm。因此，在流式分析中檢測通道為FL1-A；激光共聚焦檢測：氧化態(tài)激發(fā)波長可
選488nm（FITC）通道；還原態(tài)激發(fā)波長可選561 nm（TRITC）通道。
注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2. 使用前小心離心數(shù)秒取用，需佩戴手套操作，注意避免與皮膚、眼睛和黏膜接觸。

3. 本試劑盒可用檢測活細(xì)胞中Lipid ROS 水平，用于評價細(xì)胞鐵死亡狀態(tài)。

4. 流式分析效果圖、原位成像圖詳見官。

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