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ELISA實驗樣本的保存與處理
閱讀：338 發布時間：2022-11-1ELISA實驗過程中除了選擇靈敏度高的ELISA試劑盒之外，處理樣本的方法也是不一樣的。ELISA實驗中常見液體類樣本有血清、血漿、尿液、細胞上清、腦脊液等幾種。
一、ELISA樣本的保存
正常情況下，再5天內測定的血清標本可放置于4°C，標本再冰箱中保存時間過長會導致血清IgG聚合，是間接法的試劑本底加深，超過一周測定的需-20°C保存，凍結血清溶解后，蛋白質局部濃縮，分不均，應充分混勻并避免產生氣泡，
渾濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。
測抗體的血清的標本如需保存作多次檢測，以少量分裝冰存，
保存血清只采集是就應注意無菌操作，也可加入適當的防腐劑，抗凝不wan全的標本因纖維蛋白元的干擾而造成假陽性，建議勁量不使用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。
二、ELISA樣本處理
1、血清：室溫血液凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，如有沉淀形成，應再次離心
3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養上清：檢測分泌性的成分時，用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）仔細收集上清，檢測細胞內的成分時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右，通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成分。
5.組織標本：切割標本后，稱取重量，加入一定量的PBS，PH7.4，用液氮迅速冷凍保存備用，標本融化后任然保持2-8°C的溫度，加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，分裝后一份待檢測，其余冷凍備用，
6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行試驗，若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20°C保存，單應避免反復凍融。