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技術文章

無血清細胞培養基中添加哪些組分起作用探討

閱讀:184          發布時間:2024-1-2

      無血清細胞培養基(serum free medium,SFM)是一種特殊的細胞培養基,其中不含胎牛血清或其他血清成分。相對于傳統的含有血清的培養基,無血清培養基具有更高的質量控制、更穩定的性能、更好的可重復性以及更好的細胞增殖和生長能力。因此,無血清培養基已經成為細胞培養和生物技術領域中的一種重要工具和技術,但并不是所有細胞都適合在無血清培養基中生長(例如原代細胞和一些非癌細胞系,通常需要更加特殊的培養條件才能在無血清培養基中生長和繁殖。這些條件可以包括添加特殊的生長因子、細胞外基質和其他補充物,以幫助維持細胞的生長和代謝)。因此,可以說無血清培養基是細胞培養基的一種類型,但并不等同于所有的細胞培養基。

       經歷了天然培養基、合成培養基后,無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養基,一般是在合成培養基的基礎上,加入成份全明確的或部分明確的血清替代成份,達到既能滿足動物細胞培養的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。無血清細胞培養基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:

1、促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。

2、促生長因子及激素:針對不同細胞添加不同的生長因子。激素也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些激素是許多細胞bi不可少的,如胰島素。

3、酶抑制劑:培養貼壁生長的細胞,需要用yi 酶消化傳代,在無血清培養基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。zui常用的是大豆yi 酶抑制劑。

4、結合蛋白和轉運蛋白:常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。

5、微量元素:硒是最常見的。



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