PriCells: 動物胃黏膜上皮細胞的培養

實驗材料：

1. 動物胎體胃黏膜，胃潰瘍或胃癌手術切除的正常胃黏膜組織

2. 1%Ⅳ膠原蛋白或1%明膠鋪培養瓶，4℃冰箱內過夜，使用前在37℃培養箱內放置2h，然后用培養液浸洗1次。

3. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素，pH7.4

4. 250000U/LⅠ型膠原酶或125000U/LⅠ型膠原酶和0.5%透明質酸酶，DMEM配置

5. 解剖剪、解剖鑷、眼科剪，眼科鑷

6. 離心管（15ml、50ml）

實驗方法：

1. 取妊娠19-21d胚胎大鼠，切開腹壁，取胃底部黏膜組織，放入預冷的PBS中，然后沖洗3次。

2. 在解剖顯微鏡下，用眼科鑷仔細剝除黏膜固有層。將黏膜上皮組織剪成1mm3左右的小塊。

3. 將組織塊放入消化液中，在37℃條件下消化1-3h。然后，加入含血清培養液，終止消化。

4. 用200目不銹鋼篩網濾出組織塊，收集濾液，離心（1500r/min，5min）。用PBS洗滌2次。

5. 離心后，吸去上清液，加入培養液，混懸沉淀細胞。將細胞懸液加入培養皿或培養瓶中，放入37℃，含5%CO2的孵箱中培養24h。

6. 吸去培養液，用PBS浸洗。然后，加入培養液，繼續培養。以后每隔2-3d換液1次。

PriCells-原代上皮細胞特制基礎培養基

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      PriCells-原代細胞分離試劑盒

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