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熒光免疫技術(shù)的原理

閱讀:504      發(fā)布時間:2025-2-25
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  免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術(shù),是標記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項技術(shù)。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合,利用抗原抗體反應(yīng)進行組織或細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。那么你知道免疫熒光技術(shù)的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!
 
  免疫學的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性,所以當抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。
 
  直接法:將標記的特異性熒光抗體,直接加在抗原標本上,經(jīng)一定的溫度和時間的染色,用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體,室溫下干燥后封片、鏡檢。
 
  間接法:如檢查未知抗原,先用已知未標記的特異抗體(第一抗體)與抗原標本進行反應(yīng),用水洗去未反應(yīng)的抗體,再用標記的抗抗體(第二抗體)與抗原標本反應(yīng),使之形成抗原—抗體—抗體復合物,再用水洗去未反應(yīng)的標記抗體,干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體,則表明抗原標本是已知的,待檢血清為第一抗體,其它步驟的抗原檢查相同。
 
  標記的抗抗體是抗球蛋白抗體,同于血清球蛋白有種的特異性,如免疫抗雞血清球蛋白只對雞的球蛋白發(fā)生反應(yīng),因此,制備標記抗體適用于雞任何抗原的診斷。
 
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