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上海乾思生物科技有限公司
中級會員 | 第17年

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原代細胞凍存技術

時間:2011/11/11閱讀:1171
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細胞1、選用生長情況好,數量較多的原代細胞,凍存前一天換液一次。
細胞2、貼壁細胞需用0.25%胰酶常規消化將細胞消化下來,將細胞懸液收集至離心管中。
細胞3、1000rpm離心5分鐘,棄上清液。
細胞4、沉淀加含DMSO的培養液,計數,調整至(1-10)×106/ml。
細胞5、將懸液分至凍存管中,每管1 ml。
細胞6、密封凍存管,封口一定要嚴,否則復蘇時易出現爆裂。
細胞7、用記號筆標明細胞種類,凍存日期。
細胞8、按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→超低溫冰箱(-80℃過夜)→液氮。

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