Molecular Devices 使用CloneSelect Imager系統在半固體培養基中進行單克隆驗證
生物藥品審批的監管標準一直都在不斷變化。其中用于細胞系單克隆來源的監管條例驅使我們要在生物藥物開發過程中使用更有效的技術或方法。許多研究人員通常使用成像系統(如CloneSelect Imager)在液體培養基中驗證單克隆和監控細胞的生長。其實,CloneSelect Imager系統也可以在半固體培養基中對細胞進行成像。細胞在半固體培養基中的位置比較固定,使研究人員可以更加準確地在不同時間點對同一個細胞進行成像。實驗室常規方法通常使用有限稀釋進行細胞克隆。但是,這種方法使用液體培養基培養細胞,使追蹤細胞變得比較困難或不夠準確。因為在處理微孔板的過程中,懸浮細胞容易在孔內發生位置移動(Figure1)。不能確保不同時間點成像的 是同一個細胞,從而大大降低單克隆驗證的準確性。此外,有限稀釋有可能在一個孔內加入多個細胞,需要進行額外多次亞克隆來提高單克隆的概率。使用半固體培養基培養細胞給科研人員提供了一個更快更簡單的克隆方法,而且有利于追蹤細胞的生長。細胞在半固體培養基中的位置相對定,在常規實驗操作過程中細胞位置不會移動,可以生長成獨立單個的細胞克隆。所以,可以在同一個孔內種植多個細胞,而且通過不同時間點成像,能夠清晰追蹤單個細胞的生長情況,提供單克隆的數字驗證數據。CloneSelect Imager為研究人員提供了一個在半固體培養基中對細胞進行成像的方法。這個系統使用非侵入性檢測方法,無需標記細胞直接進行成像,可以對細胞生長情況進行準確定量;進行單細胞來源克隆驗證,確保只選擇穩定的單克隆用于下游研究。本文通過實際實驗驗證CloneSelect Imager在CloneMedia™CHO Growth A半固體培養基中對懸浮CHO-s細胞的成能。這種半固體培養基成份經過專門優化,適合各種CHO細胞系的生長。
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