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豬ELISA試劑盒實驗注意事項有哪些?

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2019年02月18日 20:03  

一年有四個時節,每個時節都有不同的風光,而我喜歡冬季下雪時的艷麗風光。冬季,大雪紛飛人們好象來到了一個幽雅安靜的jing界,來到了一個晶亮透剔的童話般的。松的那清香,白雪的那冰香,給人一種涼瑩瑩的勸慰。一切都在過濾,一切都在升華,連我的心靈也在凈化,變得純真而又美好。

 ELISA試劑盒試驗前的注意事項

 1、仔細閱讀說明書
 2、判定試劑盒在有效期內
 3、按說明書判定一切試劑齊全(數量、體積)
 4、標本制備要標準,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(儲存),盡量分裝做備份。短期內無法試驗者,注意低溫保存
 5、準備好一切試驗額定所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等
 6、依據檢測標本數量判定所需試劑的量
 7、按說明書將所用試劑平衡至室溫,制造所需試劑
 ELISA試劑盒注意事項如下:
 1.正式試驗時,應別離以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以確保試驗成果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可選用羊血清、兔血清或BSA等關閉。
 2.在ELISA中,進行各項試驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
 (1)固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。現在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在運用前均可進行選擇:用等量抗原包被,在同一試驗條件下進行反應,查詢其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附功用是否杰出。
 (2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相一同,查詢陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。關于大都蛋白質來說通常為1~10μg/ml。

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