【產品簡介】

多標記免疫熒光染色是基于抗原、抗體特異性結合的原理，選用辣根過氧化物酶（HRP）標記的二抗抗體，對試劑盒中的熒光染料進行活化，將信號共價結合到抗原上。借助于不同的熒光染料標記，通過多輪染色循環實現組織或細胞的原位多靶點染色。

【用途】

主要用于人源或小鼠組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫熒光染色。

【背景介紹】

免疫組織化學染色及成像分析是研究組織形態和組織原位抗原表達*的檢測技術，廣泛應用于臨床病理診斷和醫學及生物學研究的各個領域。組織切片樣本中蘊含著豐富的信息，但是受制于傳統單標記免疫組織化學染色方法的限制，通常只能對組織中的一到兩種抗原進行染色分析，而且定量結果的判讀往往依賴于肉眼觀測，缺乏客觀標準。

愛必信的多標記免疫熒光染色試劑盒是基于酪胺信號放大（TSA）技術開發得到，能夠在同一組織切片樣本上復染4-7種抗原并進行區別標記，擺脫了常規免疫組織化學染色和成像 技術的限制，這種新型免疫組織化學分析方案可以滿足組織微環境中復雜表型分析的需求。

【原理說明】

酪胺信號放大（tyramine signal amplification，TSA）技術已有20多年的歷史，其利用辣根過氧化酶（HRP）對靶抗原進行高密度原位標記，可大幅提高被檢測信號的靈敏度（圖1A,B）。

圖1. 酪胺信號放大（TSA）染色與傳統組織化學染色比較。A，Hela 細胞細胞色素 C 經常規二抗標記的免疫熒光染色的結果；B，相同濃度 下經 TSA 信號放大的結果；

錢幫國. 焦磊. 多標記免疫熒光染色及多普成像技術在組織學研究中的應用. 中國組織化學與細胞化學雜志, 2017 (4): 373-382 

帶有染料標記的底物酪胺（T）分子在過氧化氫氧化環境下，被抗體或探針固定的HRP轉化 為具有短暫活性的中間狀態（T*），然后被激活的中間態分子（T*）迅速與相接蛋白分子的富含電子區域（酪氨酸殘基）進行穩定的共價結合，未被標記的酪胺分子將被洗脫，借此實現對抗原的特異性染色。由于相接的蛋白（包括HRP，抗體，目標抗原）都含有大量的酪氨酸結合位點，所以目標抗原處會富集大量標記分子，使信號被有效放大（圖1C）。

【實驗操作流程】

【產品推薦】

愛必信特色產品線(全部現貨)：

二抗、標簽抗體、對照抗體；WB相關：ECL發光液、預染marker、預制膠；IHC相關：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；細胞因子、信號通路調節劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒、呼吸爆發試劑盒；動植物提取物，定制服務(抗體/多肽/蛋白)...

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