液氮冷凍培養菌種的過程
液態氮氣,氣化為氮氣,的冷凍效果,在醫療科研上有廣泛的應用。液氮冷凍培養菌種有很好的效果。其主要方法如下:
液氮冷凍培養菌種的過程:欲用液態氮保存的繭種將其在適宜培養基適溫培養至靜IL期前期,生芽孢的菌應培養個形成成熟的芽孢為止:取試管或flnl生長好的培養物剛無菌生理鹽水洗下細胞制成懸液.寸入·九閑鳳竹叫’使之細胞分散均勻。再加等量的保護劑(甘油20%或10%DMSO),再允分混㈠。懸液制得后無菌地分裝入巳滅菌容量為2ml的安瓿,每安瓿瓶分裝0.5ml。然后進行凍結和保存‘使菌種經超低溫保存后需使用時從液態氮氣冰箱取出使用前需經解凍及復蘇培養-解凍需采取快速加溫,將盛有凍結樣品的安瓿取出后立即放置38。C恒溫水浴真-I,在具:1’搖動3~5min便可融化、復蘇培養即將解凍后的細胞接種于該細菌適宜的斜面培養基上適溫培養即可。
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