概述

3D石墨烯（3DG）是一種生物相容性導電材料，用于打印電刺激組織，如心臟、骨骼肌和神經，以及生物相容性電路。3DG在室溫下打印，打印后可以接種細胞。按照以下分步過程進行導電組織生物打印。

下面用戶說明中提供的推薦制劑可產生一種簡化的可打印生物材料，可創建可重復的 3D 打印結構。但是，用戶可以根據自己的需要修改準備工作。

材料

1. 3 mL Dimension Inx 3D-石墨烯

2. 生物墨水混合器

3.  5 mL 注射器

4. 14G金屬拉絲針

5. 27G打印針

6. 砂紙印刷面

7. 培養皿

8. 間充質干細胞或其他選擇的細胞系

9. 間充質干細胞生長培養基

方法

印刷：

1. 將小瓶從 4°C 中取出，使其達到室溫;

2. 當材料從冰箱中取出時，它看起來會變硬，所以在處理之前等待它看起來很流暢;

3. 用生物墨水混合器劇烈渦旋材料，直至均勻;

• 注意：如果材料溶劑似乎大部分與粉末分離，您可以用膠帶將小瓶固定在渦旋混合器上，并保持至少一小時。長時間混合小瓶將獲得更好的打印體驗。

4. 使用 14G 針頭刺穿樣品瓶蓋并繪制打印量 （3 mL），不要將樣品瓶倒置以防止材料損失。3D-石墨烯具有高粘性，因此加載可能需要幾分鐘。我們建議您僅將此樣品瓶用于一次打印會話。如果您將其用于更多會話，請確保將其適當密封。建議將刺破的蓋子換成實心蓋子，以便更好地進一步存放;

5. 拉拔材料后，取下注射器柱塞和拉絲針;

6. 從柱塞上取下塞子并將其放入注射器中;

7. 將塞子放回注射器中，用柱塞推動它，直到它接觸并均勻分布在注射器中的拉出材料。確保在用柱塞推動塞子時，它們不會重新連接;

8. 放置 27G 打印針并裝入您的 Allevi！

9. 將粘合劑打印表面放在培養皿上。

印后：

1. 在處理之前，讓您的打印結構在通風櫥中靜置至少 2 小時。請注意，打印件在洗滌前可以無限期地存放在密封的玻璃容器中;

2. 將打印的結構浸入 70% 乙醇中至少 1 小時。建議輕柔攪拌。更換乙醇，讓您的物體再浸入水中一個小時;

3. 用PBS（用于生物應用的無菌PBS）代替乙醇，并立即使用。如果您想存儲此對象，請將其冷凍在 -20 ?C、– 40 ?C 或 -80 ?C;

4. 如果您沒有使用我們的盤子并且您的結構與您的表面融合，請小心地使用剃須刀片將其取下。如果您確實使用過我們的盤子，只需戴上手套取下您的結構即可;

5. 如果您愿意，您可以用剪刀、手術刀、活檢打孔機等切割您的指紋。

細胞接種：

1. 從打印的結構中吸出多余的液體，但不要讓它干燥。細胞接種時應略微濕潤;

2. 10-15 μL 應接種在直徑 5 mm、厚 1 mm 的印刷構建體中;

• 對于此應用，建議以 5 x 10 的密度接種間充質干細胞6細胞/mL。

3. 凝膠也可以注射到生物打印和洗滌的物體中。

打印設置

應用

骨組織：天然骨骼封裝在神經和肌肉組織中，因此將 3DG 與 HB 一起打印可能會產生多組織單元。

心臟、神經和骨骼肌組織：3DG 非常適合需要導電的組織。由于其導電性，3DG可以傳輸對心臟、神經和骨骼肌功能至關重要的電信號。

生物相容性和柔性電路：隨心所欲地打印電路，用細胞接種它們并運行電流進行刺激。

警告

• 請勿將液體形式的 3DG 存放在塑料容器中數小時，否則會變干。打印前盡量限制所有空氣暴露，以確保佳打印體驗;

• 使用比提供的針頭規格更高（噴嘴直徑更小）的針頭進行打印可能會導致間歇性堵塞;

• 不要讓液態3DG與黑色金屬長時間接觸，它會腐蝕它們。也不要讓它與聚酯或聚苯乙烯接觸，它會與它們融合。

• 不要讓 3DG 達到 70 ?C 以上的溫度，否則會熔化。

• 不要試圖用熱、蒸汽、環氧乙烷或過氧化氫對打印結構進行滅菌。該材料含有二氯甲烷、2-丁氧基乙醇和鄰苯二甲酸二丁酯。

• 僅用于研究目的。不供人類或臨床使用。