在一步法測(cè)定中，當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí)，過(guò)量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成"夾心復(fù)合物"。類(lèi)同于沉淀反應(yīng)中抗原過(guò)剩的后帶現(xiàn)象，免疫組化試劑盒此時(shí)反應(yīng)后顯色的吸光值與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測(cè)讀，所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量，因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)時(shí)，應(yīng)注意可測(cè)范圍的zui高值。

    用高親和力的單克隆抗體制備此類(lèi)試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。我們要求檢驗(yàn)結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格 時(shí)，將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。 酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱(chēng)酶標(biāo)儀，通常指于測(cè)讀ELISA試劑盒研發(fā)結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對(duì)固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多免疫組化試劑盒研發(fā)公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。

    酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有：測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、線(xiàn)性等等。這種現(xiàn)象被稱(chēng)為鉤狀效應(yīng)，因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)，免疫組化試劑盒供應(yīng)商反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。