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上海源葉生物科技有限公司
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間接熒光抗體試驗(1FA)檢測豬繁殖與呼吸綜合征2011/06/16
Yoon等(1992)報道用IFA檢測PRRSV抗體的方法,目前在北美應用較為廣泛,該方法與IPMA具有相同的特異性和敏感性。用IFA方法能從感染后6天的動物體內檢測出PRRS抗體,可用PAM、CL2621及MARC-145培養物進行IFA,并以血清抗體效價≥1:20作為陽性判斷的依據。應用IFA檢測東北、華北、華中、華南等10個地區的10個豬場,豬場陽性率為40%(4/10),而4個陽性豬場的平均陽性率為58.5%(郭寶清等,1996);張鶴曉等(1996)應用IFA檢測北京地區3個豬場的血清
化學發光技術2011/06/15
放射免疫分析法有很高的靈敏度,但存在著放射性防護和同位素污染等問題。近年來,許多非放射性同位素標記的免疫分析方法相繼出現。其中,在化學發光反應及抗原-抗體特異性識別基礎上建立起來的一種新的非放射免疫分析技術--化學發光免疫分析法,由于這種方法具有靈敏度高,特異性強,精密度好,線性范圍寬,儀器設備簡單,試劑價格低廉,方法穩定、快速等優點,已成為一種重要的非同位素標記免疫學檢測方法。把化學發光物質與免疫學反應結合起來,用光反應表現被測的免疫成分濃度,即把高靈敏的光反應與特異性的免疫學反應相結合的方法
免疫印跡技術和免疫斑點技術2011/06/15
免疫印跡技術和免疫斑點技術點擊次數:264發布時間:2009-9-30免疫印跡技術又稱Western印跡法,它將凝膠電泳與固相免疫結合,首先通過蛋白質電泳技術將需要區分的蛋白質轉移至固相載體如NC膜等上,再借助酶免疫、放射免疫等技術進行測定。該法能分離分子大小不同的蛋白質并確定其分子質量,常用于檢測多種病毒抗體或抗原。免疫斑點試驗(dotimmunobindingassay,DIBA)是利用硝酸纖維素膜(NC膜)或乙酸纖維素膜作為固相支持物,進行抗原—抗體反應的免疫學檢測方法。該法具有微量、快速
染色質免疫沉淀分析(ChIP)2011/06/15
染色質免疫沉淀分析(ChIP)點擊次數:359發布時間:2009-9-22ChIP是目前確定與特定蛋白結合的基因組區域或確定與特定基因組區域結合的蛋白質的方法(圖2—8),也可用于分析與轉錄、有絲分裂或DNA損傷相關的發生改變的組蛋白修飾。ChIP技術和芯片技術的結合有利于確定全基因組范圍內染色體蛋白的分布模式以及組蛋白修飾情況。該技術主要應用于:①組蛋白修飾研究;②轉錄調控分析;③藥物開發研究;④有絲分裂研究;⑤DNA損失與凋亡分析。ChIP是深入分析癌癥、心血管疾病以及中央神經系統紊亂等疾病
遺傳統計分析2011/06/15
以等位基因方式表述與疾病易感性相關的多態,很少由單個SNP導致,大多是基因內幾個SNP的組合即單倍型所引起。如ALOXP的單個SNP與心肌梗死均無相關性,但這些SNP組合形成的其中一個單倍型與冰島人心肌梗死的高危存在相關,另一單倍型與英國人心肌梗死相關。多巴胺D3受體基因3個SNP單獨與精神分裂癥并不存在顯著的相關性,但它們所形成的單倍型卻與精神分裂癥顯著性相關,提示這些SNP存在交互或協同作用。另一方面,一些單倍型的功能研究也顯示,不同的單倍型對基因的表達或功能有不同的影響。HCAPl編碼區5
皮張炭疽沉淀反應操作技術2011/06/14
皮張炭疽沉淀反應操作技術點擊次數:13發布時間:2011-5-23①器械與藥品準備a.設備器材。大型高壓滅菌器,自動揀皮器、半自動揀皮器或手工揀皮器,反應管木架與盤,20ml容量瓶與盤,過濾漏斗,各種量杯,各種容瓶,抗原與血清加注器,帶乳頭的毛細管,中性濾紙(中性石棉),大恒溫箱等。b.藥品與反應成分。0.85%生理鹽水。浸皮液:氯化銨0.85g(鹽皮不加氯化鈉)6。0—8.0。苯酚0.3—0.5g,蒸餾水100ml,pH6.0-8.0炭疽菌粉標準抗原、炭疽沉淀素血清、陰性血清,均由獸醫生物藥品
單克隆抗體在醫學中的應用2011/05/30
單克隆抗體在醫學中的應用點擊次數:18發布時間:2010-12-259:47:50單克隆抗體是由一個產生抗體的細胞與一個骨髓瘤細胞融合而形成的雜交瘤細胞經無性繁殖而來的細胞群所產生的,所以它的免疫球蛋白屬同一類型,質地純一,而且它是針對某一抗原決定簇的,因此特異性強,親和性也一致。單克隆抗體在生物學和醫學研究領域中顯示了極大的應用價值,是親和層析中重要的配體,是免疫組織化學中主要的抗體,是免疫檢驗中的新型試劑。作為醫學檢驗試劑,單克隆抗體也充分發揮其優勢。由于其特異性強,可將抗原抗體反應的特異性
雜交瘤技術的基本原理2011/05/30
雜交瘤技術的基本原理點擊次數:7發布時間:2010-12-2910:04:28雜交瘤抗體技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的小鼠B細胞和小鼠骨髓瘤細胞。脾淋巴細胞的主要特征是它的抗體分泌功能和能夠在選擇培養基中生長(選擇原理見后),小鼠骨髓瘤細胞則可在培養條件下無限分裂、增殖,即所謂永生性。在選擇培養基的作用下,只有B細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交才具有持續增殖的能力,形成同時具備抗體分泌功能和保持細胞永生性兩種特征的細胞克隆。其原理從下列3個主要步
聚合酶鏈式反應(PCR) 檢測肉毒梭菌技術02011/05/30
是運用PCR方法檢測肉毒神經毒素基因以鑒定肉毒梭菌,只需2~3天。特別是基層CDC在購買不到試驗動物的情況下,PCR所具有快速、簡便、特異型強的優點無疑可作為肉毒中毒的輔助檢測手段和一項有價值的指標。P.Fach(1993)報道,應用PCR可檢出食品樣品的肉毒梭菌A型菌株。趙晉、郭宗琪、楊小蓉等(2006)報道,應用PCR可檢出肉毒食物中毒的病原菌。用1對人工合成的寡核苷酸引物擴增A型、B型、C型、D型、E型、F型和G型肉毒神經毒素基因的一段264bp的DNA片段,并對兩個食物中毒樣品的增菌產毒
聚合酶鏈式反應(PCR) 檢測肉毒梭菌技術2011/05/28
聚合酶鏈式反應(PCR)檢測肉毒梭菌技術點擊次數:1發布時間:2011-4-2110:48:54是運用PCR方法檢測肉毒神經毒素基因以鑒定肉毒梭菌,只需2~3天。特別是基層CDC在購買不到試驗動物的情況下,PCR所具有快速、簡便、特異型強的優點無疑可作為肉毒中毒的輔助檢測手段和一項有價值的指標。P.Fach(1993)報道,應用PCR可檢出食品樣品的肉毒梭菌A型菌株。趙晉、郭宗琪、楊小蓉等(2006)報道,應用PCR可檢出肉毒食物中毒的病原菌。用1對人工合成的寡核苷酸引物擴增A型、B型、C型、D
蠟樣芽孢桿菌食物中毒流行病學與臨床特征2011/05/28
*起蠟樣芽孢桿菌食物中毒早在1906年就有報告(Lubenau)。但直至1950年才明確其病因,之后許多國家,特別是j匕歐、東歐國家也報告了類似的中毒癥。1960~1968年間在匈牙利細菌性食物中毒中,蠟樣芽孢桿菌為第三個zui常見的致病菌,該菌所致食物中毒為已報告食物中毒起數的84%,中毒人數占總中毒人數的14.8%。1971年以來,英國報告過多起該菌食物中毒。我國南京市衛生防疫站于1973年報告了南京某托兒所兒童因進食泡飯引起嘔吐型蠟樣芽孢桿菌食物中毒。現今除西藏外,各省、市已相繼報告該菌食
蠟樣芽孢桿菌食物中毒的檢查方法2011/05/28
蠟樣芽孢桿菌食物中毒的檢查方法點擊次數:2發布時間:2011-4-269:08:391.直接鏡檢和活菌計數(1)直接鏡檢采取患者嘔吐物或剩余殘食等為檢樣。將其用無菌生理鹽水浸漬、稀釋后制涂片,干燥,革蘭染色、鏡檢。若有革蘭陽性大桿菌[(4~5)um×1um左右l菌兩端較平整,芽孢不大于菌體寬度,中生或稍偏端,運動,即為可疑菌。(2)活菌計數將殘余食物以無菌生理鹽水稀釋成1:10,1:100,1:1000,…,分別用lml的滅菌吸管各吸取稀釋液0.1ml作傾注培養,或接種于10%卵黃瓊脂平板上,用
免疫酶組織化學技術的酶及其特點2011/05/27
凡對抗體無毒性又具有高催化效率的酶,理論上均可標記抗體。但免疫酶組織化學技術要求酶與底物作用生成的有色產物能在光鏡及電鏡下觀察到,所以這些產物必須具備兩個條件:*,產物必須是不透光或不透電子的,否則不能被光鏡及電鏡觀察到;第二,產物必須是不溶解的,否則產物將發生擴散,影響其準確定位。而理想的酶也應盡可能符合下列標準:①性質穩定,活性高;②該酶較易獲得純制品,而且純度要很高;③酶與免疫球蛋白等物質結合時不喪失其活性;④酶反應產物必須穩定,不應發生擴散,影響組織學定位;⑤酶相應底物易于保存、制備;⑥
熒光顯微鏡所看到的熒光圖像的記錄方法2011/05/27
熒光顯微鏡所看到的熒光圖像,一是具有形態學特征,二是具有熒光的顏色和亮度,在判斷結果時,必須將二者結合起來綜合判斷。結果記錄根據主觀指標,即憑工作者目力觀察,作為一般定性觀察基本上是可靠的。隨著技術科學的發展,采用細胞分光光度計、流式細胞儀、激光共聚焦顯微鏡和圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結果,也必須結合主觀的判斷。熒光顯微鏡攝影技術對于記錄熒光圖像十分必要,由于熒光很易減弱褪色,要及時攝影記錄結果。方法與普通顯微鏡攝影技術基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA400以上或感光度27以上
熒光顯微鏡標本制作的要求2011/05/27
(一)載玻片載玻片厚度應在0.8~L2mm之間,太厚的玻片,一方面光吸收多,另一方面不能使激發光在標本上聚焦。載玻片必須光潔,厚度均勻,無明顯自發熒光。有時需用石英載玻片。(二)蓋玻片蓋玻片厚度在o.17mm左右,光潔。為了加強激發光,也可用干涉蓋玻片,這是一種特制的表面鍍有若干層對不同波長的光起不同干涉作用的物質(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過,而反射激發光,這種反射的激發光又可激發標本。(三)標本組織切片或其他標本不能太厚,如太厚激發光大部消耗在標本下部,而物鏡直接觀察到的上部不能
熒光顯微鏡的使用注意事項和維護與保養2011/05/27
(1)嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作,不要隨意改變程序。(2)應在暗室中進行檢查,進人暗室后接通高壓穩壓器電源,開啟3~5rain后再開啟激發高壓汞燈,當看到高壓汞燈*亮后,停止激發,再開始觀察標本。(3)防止紫外線對眼睛的損害,在調整光源時應戴上防護眼睛。(4)檢查時間每次以1h為宜,超過90min,高壓汞燈發光強度逐漸下降,熒光減弱,標本經激發15min后,熒光亦明顯減弱。(5)熒光顯微鏡的激發裝置及高壓汞燈壽命有限,標本應集中檢查,節省時間。(6)標本染色后立刻觀察,因存放時間太
熒光顯微鏡的原理部件及激發方式2011/05/27
熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡不同,它不是通過普通光源的照明觀察標本,而是利用一定波長的光(通常是紫外光、藍紫光)激發顯微鏡下標本內的熒光物質,使之發射熒光,所以,熒光顯微鏡的光源所起的作用不是直接照明,而是作為一種激發標本的內熒光物質的能源。我們之所以能觀察標本,是由于光源的照明,而是標本內熒光物質吸收激發的光能后所呈現的熒光現象。由此可知,熒光顯微鏡的特點,主要是它的光源能供給大量特定波長范圍的激發光,使受檢標本內的熒光物質能獲得必要強度的激發光。同時,熒光顯微鏡必須具備相應的濾光鏡系統。熒光顯
銀納米粒子對某些有益細菌傷害極大2011/05/25
4月9日加拿大科學家研究認為,某些工業產品中含有的銀納米粒子對一些生活在北極極地土壤中有益的細菌來說毒性非常大。科學家發現,將一定數量的銀納米粒子加入取自北極極地的土壤中后,會造成土壤中的許多種類的細菌數量減少,還會使一種有益的慢生菌全部消失。科學家擔心納米粒子進入自然環境可能破壞土壤生態系統。相關文章發表在一期出版的《有毒材料》雜志上。銀納米粒子作為抗微生物劑被大量用于防臭襪和T恤衫等日用消費品中。據統計,目前市場上有1300多種產品含有納米粒子,這些產品包括不粘鍋、織物柔軟劑、長毛絨玩具以及
大腸桿菌顯色培養基2011/05/25
大腸桿菌顯色培養基大腸桿菌顯色培養基是青島海博生物公司改良的培養基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測。大腸桿菌顯藍綠色,大腸菌群顯無色,其它菌顯黃色或無色,革蘭氏陽性菌被抑制。--------------------------------------------------------------------------------成份(g/L)特殊營養物質37.9顯色劑0.2瓊脂12.0pH6.8±0.225℃此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得*的結果。注意此培養基
大腦研究抽樣過程2011/05/21
隨機選擇一側大腦半球,將其包埋于6%瓊脂中,切取等距離腦組織切片,切片厚度為7mm,共切取20張切片。我們確定從一側大腦半球抽取5塊大腦白質進行研究,首先,將從20張腦組織切片中抽取5片,即每4張等距切片中抽取一張(每隔3張抽取一張)。從前4個數字當中隨機選擇一個,這個數字則作為*張腦片的抽取位置,假設選擇3,則第3張腦片作為*個腦組織塊抽取的位置,然后每隔3張腦片抽取一片,即3,7,11,15,19號腦片。由于腦片較大,還需在所得腦片上再次抽取組織塊。在所得腦片上隨機疊放等距有孔測試點,這些測
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