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實驗十五 酵母菌子囊孢子的觀察2010/04/06

一、基本原理酵母菌的子囊孢子生成與否及其形狀，是酵母分類上的重要依據。一部分酵母菌只有當它在zui適條件下，才能觀察到形成的子囊孢子，不同種屬的酵母菌，形成子囊孢子的條件不同。葡萄糖-醋酸鹽培養基特別有利于釀酒酵母子囊孢子的形成。本實驗用生長在此培養基上的釀酒酵母為材料，進行子囊孢子的觀察。二、器材釀酒酵母；呂氏堿性美藍染液，石炭酸復紅染液，3％的酸性酒精，孔雀綠芽孢染液，麥芽汁瓊脂斜面培養基，葡萄糖-醋酸鹽培養基等。三、操作步驟1．將釀酒酵母先移種到新鮮麥芽汁瓊脂斜面上，25℃培養24小時左右

實驗二十八 厭氧微生物的培養2010/03/31

一、基本原理厭氧微生物在自然界分布廣泛，種類繁多，作用也日益引起重視。培養厭氧微生物的技術關鍵是要使該類微生物處于除去了氧或氧化還原勢低的環境中。焦性沒食子酸與堿性溶液作用后，形成堿性沒食子酸鹽，在此反應過程中能吸收氧氣而造成厭氧環境；牛肉渣內既含有不飽和脂肪酸能吸收氧，又含有谷胱甘肽（glutathione）能形成負氧化還原電位差；厭氧罐是采用某種方法除去其中的氧，例如將鎂與氧化鋅制成產氫氣袋，放入罐中加水反應產生氫，鈀或鉑是催化劑，在常溫下催化氫與氧化合成水，則可除去密封的厭氧罐中的氧。二、

微生物數量的測定2010/03/31

單細胞微生物個體生長時間很短，很快進入繁殖階段，生長和繁殖難以分開，個體生長很難測定，而且實際應用意義不大，因此，它們的生長不是依據細胞大小，而是以群體的生長作為單細胞微生物生長的指標。群體生長表現為細胞數目的增加或細胞物質的增加。測定細胞數目的方法有顯微鏡直接計數法、平板菌落計數法、光電比濁法等。測量細胞物質的方法有細胞干重的測定、細胞某種成分如氮的含量、RNA和DNA的含量測定、代謝產物的測定等。總之，測定方法很多，各有優缺點，工作中應根據具體情況加以選擇。

試劑和溶液的配制2010/03/29

一、3%酸性酒精溶液（實驗15）濃鹽酸3ml95%酒精97ml二、中性紅指示劑（實驗40）中性紅0．04g95%乙醇28ml蒸餾水72ml中性紅pH6．8—8，顏色由紅變黃，常用濃度為0．04%。三、淀粉水解試驗用碘液（盧戈氏碘液）（實驗40）碘片1g碘化鉀2g蒸餾水300ml先將碘化鉀溶解在少量水中，再將碘片溶解在碘化鉀溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。四、溴甲酚紫指示劑（實驗41）溴甲酚紫0．04g0．01mol/LNaOH7．4ml蒸餾水92．6ml溴甲酚紫pH5．2—6．8，顏色由黃變紫

染色液的配制 22010/03/29

五、莢膜染色液（實驗9）1．黑色素水溶液黑色素5g蒸餾水100ml福爾馬林（40%甲醛）0．5ml將黑色素在蒸餾水中煮沸5分鐘，然后加入福爾馬林作防腐劑。2．番紅染液與革蘭氏染液中番紅復染液相同。六、鞭毛染色液（實驗10）A液：單寧酸5gFeCl31．5g蒸餾水100ml福爾馬林（15%）2．0mlNaOH（1%）1．0ml配好后，當日使用，次日效果差，第三日則不宜使用。B液：AgNO32g蒸餾水100ml待AgNO3溶解后，取出10ml備用，向其余的90mlAgNO3中滴入濃NH4ON，使之成

各種霉菌的形態特征——42010/03/26

1.3鐮刀菌屬本屬的產毒舞茵主要包括禾谷鐮刀菌、串珠鐮刀菌、雪腐鐮刀菌、三線鐮刀菌、梨孢鐮刀菌、擬枝孢鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、茄病鐮刀菌和木賊鐮刀菌等。這些霉菌的代謝產物為單端孢霉烯族化合物、玉米赤霉烯酮和丁烯酸內醋等。在馬鈴薯——葡萄糖瓊脂或察氏培養基上氣生菌絲發達，高0.5cm—1.0cm或較低為0.3cm—0.5cm，或更低為0.1cm—0.2cm；稀疏的氣生菌絲，甚至*無氣生菌絲而由基質菌絲宜接生出粘孢層，內含大量的分生孢子。大多數種小型分生孢子通常假頭狀著生，較少為鏈狀著生，或者假頭狀和鏈

各種霉菌的形態特征——32010/03/26

1.2.5展開青霉，異名：尊麻青霉屬于不對稱青霉組，束狀青霉亞組。在察氏瓊脂培養基上，菌落生長局限，12d—14d直徑2cm—2.5cm，大多有放射狀溝紋，邊緣陡峭，中央稍凸起，表面呈現粒狀，有些在邊緣有明顯的菌絲束，有的則呈現絮狀，厚密。灰綠色至亮灰色。有的菌系產生近于無色的滲出液，氣味不明顯．反面暗黃色漸變為橙褐色乃至紅褐色，稍擴散于培養基中。帚狀枝疏松散開，可具3層一4層分枝，其大小和復雜程度差別很大，一般40um—50um，極限20um—80um。分生孢子鏈略散開，長達50um—100u

PPM1A蛋白的表達純化及鼠多克隆抗體制備研究——22010/03/24

2結果2.1目的蛋白的表達SDS2PAGE電泳可見,pBEX2PPM1A2His經IPTG誘導2、4h后在大腸桿菌中均有表達,4h時獲得量zui大,空菌誘導4h僅有較弱條帶。且PPM1A的產量隨IPTG的濃度加大變化不大.2.2目的蛋白的純化和復性誘導后的菌體處理后經超速離心,SDS2PAGE電泳發現大部分目的蛋白存在于沉淀中,主要以包涵體形式存在。用Ni2NTA純化試劑盒處理所得的目的蛋白純度達90%,質量濃度為2.45mg/mL,復性后目的蛋白質量濃度為1.15mg/mL。2.3目的蛋白的W

放療化療患者呼吸道感染病原菌檢測及結果分析_22010/03/24

結果2.1病原菌分布：從2333例送檢標本中共分離出致病菌和條件致病菌1402株,總陽性率60.1%（1402/2333）。其中革條件致病菌1402株,總陽性率60.1%（1402/2333）。其中革條件致病菌1402株,總陽性率60.1%（1402/2333）。其中革條件致病菌1402株,總陽性率60.1%（1402/2333）。其中蘭陰性桿菌544株占38.3%,以肺炎克雷伯菌187株、大腸埃希菌162株、銅綠假單胞菌107株為主。革蘭陽性球324菌株占23.1%,以金黃色葡萄球菌145株、

2型糖尿病患者并發院外獲得性敗血癥24例的臨床分析_32010/03/22

3、討論敗血癥和糖尿病都是常見的疾病,好發于老年人,隨著人口的老齡化,其發生率也是逐年上升,給社會和醫療帶來了沉重的負擔。本組患者占我科收治的糖尿病總人數的2.2%（24/1090）,患者年齡大,符合糖尿病和感染性疾病在老年人中常見的特點;女性更多見,與國內多家報道相符。細菌性敗血癥與真菌性敗血癥不同癥狀上,發熱程度多為高熱,部分患者可無發熱。熱型上,典型的馳張熱已不常見,取而代之的熱型是間歇熱和不規則熱。伴隨癥狀上常有寒戰。血白細胞計數常升高,中性粒細胞比率也會上升。臨床癥狀常不典型,因此,在

2型糖尿病患者并發院外獲得性敗血癥24例的臨床分析_22010/03/22

2結果2.1臨床癥狀24例患者中,22例患者有發熱,其中1例超高熱41.0℃,16例高熱41.1℃,5例中熱38.1～39.0℃。熱型以間歇熱zui為常見14例,其次為不規則熱8例。伴隨癥狀以寒戰14例多見,未見伴有關節腫痛。2.2白細胞檢查白細胞總數正常6例,僅1例中性粒細胞的比率正常。白細胞總數4.9～27.310g/L,平均13.6×10g/L,中性粒細胞比率62%～93%,平均84.5%。2.3細菌學檢查革蘭陽性球菌11例,其中人葡萄球菌6例耐甲氧西林金黃色葡萄球菌2例,金黃色葡萄球菌2

BDNF的克隆及pTAT/HA2BDNF重組表達載體的構建—22010/03/19

2結果2.1胎腦總RNA的提取及RT2PCR擴增目的基因28s、18s及5s3條帶明顯完整且無降解,A260nm/A280nm為1.79,RNA質量濃度為950mg/L。第1輪PCR產物在電泳圖中1000bp處有特異性條帶,與預期的957bp接近,為包含目的基因的大片段;第2輪PCR擴增產物行電泳時,在750bp處有特異性條帶,與預期的763bp相近,為BDNF目的基因片段,見圖3A-B。2.2PTAT/HA2BDNF載體的構建及酶切鑒定重組質粒PTAT/HA2BDNF經XhoⅠ和EcoRⅠ雙酶

BDNF的克隆及pTAT/HA2BDNF重組表達載體的構建—12010/03/19

腦源性神經營養因子brain2derivedneurotro2phicfactor,BDNF）作為神經生長因子家族成員,與神經系統發育有著密切關系,不僅對中樞神經元的發育、增殖分化、存活起重要作用,而且對損傷后神經元的修復與功能重塑也起重要作用。BDNF廣泛分布于中樞及周圍神經系統,以海馬和皮質含量zui高。研究表明BDNF可支持中腦多巴胺能神經元存活并向多巴胺能表型分化,并且能保護多巴胺能神經元免受62羥多巴胺62OHDA的神經毒素作用。還可通過支持膽堿能細胞的生存和上調膽堿乙酰轉移酶的表達,

多元納米復合抗菌殺菌材料西南交通大學科研處2010/03/17

化學藥物和有機消毒劑的大量使用極易導致細菌和病毒的變異,并造成嚴重的后果,如O157大腸桿菌、瘋牛病、SARS、禽流感等微生物事件的發生,使人們對生態環境和微生物環境的惡化給地球和人類健康帶來的危險表示擔憂,安全無毒的無機抗菌材料已成為人們的迫切需要。本項目的任務利用具有自主知識產權的氧化鋅晶須（簡寫為:ZnOw）制備技術,并在前期研究工作的基礎上,對ZnOw、納米材料進行抗菌活性處理,將ZnOw與多種納米材料復合,制備一種安全、持久、、廣譜的抗菌殺菌材料。主要技術經濟指標1、抗菌指標:多元納米

肝硬化合并感染及抗菌藥物治療的研究現狀實用——12010/03/17

細菌感染是肝硬化常見的并發癥,也是失代償期肝硬化zui重要的并發癥之一。肝硬化患者住院時并發感染或住院期間并發院內感染的占20%～60%,也是zui主要的死亡原因之一。肝硬化患者大多數細菌感染為院內獲得性,常見的細菌感染不僅包括自發性細菌性腹膜炎,還有尿路感染、菌血癥、肺炎、結核、軟組織感染、細菌性心內膜炎等。在感染的細菌中,多數為腸道菌群,大腸桿菌是主要的病原菌。許多藥物包括抗菌藥物經肝臟代謝而排出體外,肝功能損害時,藥物的體內過程受到不同程度的影響。如何科學合理地應用抗菌藥物,有效控制和預防

宮內給藥對大鼠細菌性宮內感染胎盤IL26與MMP29表達的影響——22010/03/15

2、結果2.1給藥途徑對胎盤組織IL26表達的影響陽性反應主要位于絨毛膜層和其近蛻膜的區域。給藥后第1、2、3天,胎盤組織IL26表達水平,各給藥組低于相應的對照組P2.2給藥途徑對胎盤組織MMP29表達的影響陽性反應主要分布于絨毛膜層和靠近蛻膜的區域。胎盤MMP29表達水平在給藥后第1、2、3天,各給藥組低于各相應對照組P3討論IL26是一種多能炎性細胞因子,與炎癥反應密切相關。IL26產生于滋養細胞,且其受體也存在于滋養細胞表面,宮內感染時,細菌侵犯羊膜腔,刺激蛻膜、羊膜和絨毛膜細胞及胎兒產

肝硬化與小腸細菌過度生長_12010/03/15

肝硬化患者由于胃腸道瘀血、膽汁酸和胃酸的相對缺乏、腸道運動障礙等因素,可導致腸腔需氧菌增多,結腸的細菌移行至空腸和十二指腸,引起小腸細菌過度生長。以空腸或十二指腸液細菌培養,菌落數成人105/ml,小兒104/ml為標準。繼而引起小腸吸收功能障礙,營養不良,增加內源性感染即菌群從腸道粘膜侵入機體局部組織或附近體液,由此進入血液和身體其他部位和內毒素血癥的機會。內源性感染和內毒素血癥又進一步加重肝損害。作者對近年來有關肝硬化合并SIBO的研究作一綜述。1、肝硬化合并SIBO的微生態變化人類腸道的微

頭孢拉定膠囊微生物限度檢查方法的建立2010/03/12

頭孢拉定膠囊為*代頭孢菌素類抗生素,臨床上常用于頭孢拉定敏感細菌所致的急性咽炎、急性扁桃體炎、中耳炎、支氣管炎、肺炎等呼吸道感染、泌尿生殖道感染及皮膚軟組織感染等。此類抗細菌藥品在進行微生物限度檢查時,需采用適宜的方法消除藥物抗菌活性的干擾,才能保證其檢驗方法的科學性及檢驗結果的準確性。本試驗用2005年版中國藥典規定的3株細菌、2株真菌,采用不同的方法對3批頭孢拉定膠囊進行了微生物限度檢查方法的驗證試驗,以建立頭孢拉定膠囊的微生物限度檢查方法。1、材料1.1儀器：電子天平；臺式低速離心機；集菌

頭孢拉定膠囊微生物限度檢查方法——22010/03/12

2.4控制菌檢查方法的驗證2.4.1取規定量供試液及10—100CFU大腸埃希菌加入相應培養基中,按中國藥典2005年版一部附錄大腸埃希菌檢查法檢查,為試驗組;同法操作,以金黃色葡萄球菌作為陰性對照菌,為陰性菌對照組;結果判斷:陰性菌對照組不得檢出陰性對照菌;試驗組應檢出試驗菌,該試驗方法成立。2.4.2預試驗取供試液:①10mL、供試液②每10mL離心后的上清液全量分別加至100、200、300mLBL培養基中,并加入10～100CFU大腸埃希菌,試驗組未檢出試驗菌;取供試液;②每10mL離心

微生物鑒別方法：傳統方法2010/03/10

1、形態學特征（1）細胞形態在顯微鏡下觀察細胞外形大小、形狀、排列等，細胞構造，革蘭氏染色反應，能否運動、鞭毛著生部位和數目，有無芽孢和莢膜、芽孢的大小和位置，放線菌和真菌的繁殖器官的形狀、構造，孢子的數目、形狀、大小、顏色和表面特征等。（2）群體形態群體形態：在一定的固體培養基上生長的菌落特征，包括外形、大小、光澤、黏稠度、透明度、邊緣、隆起情況、正反面顏色、質地、氣味、是否分泌水溶性色素等；在一定的斜面培養基上生長的菌苔特征，包括生長程度、形狀、邊緣、隆起、顏色等；在半固體培養基上經穿刺接種