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特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基2011/04/12: 培養(yǎng)某一類(lèi)型細(xì)胞沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)。總之，MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開(kāi)始，各種目的無(wú)血清培養(yǎng)AIMV（12005）培養(yǎng)基（SFM）。L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎？它在溶液中不穩(wěn)定嗎？L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后，L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì)降解，但是確切的降解率一直沒(méi)有zui終定論。L-谷氨酰胺的降解導(dǎo)

神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)總結(jié)2011/04/12: 培養(yǎng)細(xì)胞的*培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如MEM）和添加劑（如血清或無(wú)血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長(zhǎng)因子）組成，培養(yǎng)基的配方一直在改進(jìn)，其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等。基礎(chǔ)培養(yǎng)基絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液（BSS）基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`sMEM的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無(wú)機(jī)鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。MEM/F12這兩種培養(yǎng)

牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用及產(chǎn)生的常見(jiàn)問(wèn)題（1）2011/04/12: 現(xiàn)代生物技術(shù)包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程，這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切的關(guān)系，特別是在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過(guò)程中很多都是通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)的，基因工程乙肝疫苗大多是以CHO細(xì)胞作為載體；基因工程抗體藥物的制備也離不開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞工程領(lǐng)域更離不開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，雜交瘤單克隆抗體的研究制備*是通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)的，發(fā)酵工程和酶工程有的也與細(xì)胞培養(yǎng)密切相關(guān)。總之，細(xì)胞培養(yǎng)在整個(gè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的核心作用。細(xì)胞培養(yǎng)的

成功植入胰腺干細(xì)胞的步驟2011/04/11: 成功植入胰腺干細(xì)胞的步驟1、細(xì)胞的制備；細(xì)胞的來(lái)源：采用流產(chǎn)人胚胎（5-7月胎齡）胰腺組織，于解剖顯微鏡下去除周?chē)闹竞徒Y(jié)締組織。輕輕地分離并切碎胰腺，膠原酶370C震胰蕩消化30分鐘，然后加冷牛血清和Hanks液保護(hù)細(xì)胞并終止消化。此方法不但可以分離外分泌腺，還可以降低免疫原性從而減少免疫排斥反應(yīng)。1500轉(zhuǎn)離心10分后棄上清，用生長(zhǎng)液保存具有生理功能的細(xì)胞備用，達(dá)到細(xì)胞量再行植入。2、胰腺干細(xì)胞的制備：由于胚胎數(shù)量不足，往往不能滿(mǎn)足胰島細(xì)胞種植的需要，就須在體外進(jìn)行擴(kuò)增，達(dá)到種植的細(xì)胞量。

小鼠胚胎與成體肝臟中干細(xì)胞變化探討的結(jié)果2011/04/11: 小鼠胚胎與成體肝臟中干細(xì)胞變化探討的結(jié)果各組分離的細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)均有集落形成，肝干細(xì)胞的表面標(biāo)記提示形成的集落具有肝干細(xì)胞特性。其中以第15天胚胎肝臟分離所獲的細(xì)胞數(shù)和培養(yǎng)形成的集落數(shù)zui多、生長(zhǎng)狀態(tài)。15d后觀(guān)察的各項(xiàng)指標(biāo)漸減，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)漸差。結(jié)論早期胚胎肝臟中大部分是具有干細(xì)胞特性的細(xì)胞，隨胎齡增加，有干細(xì)胞特性的細(xì)胞逐漸減少，直至出生第5天僅有少數(shù)保持未分化狀態(tài)的細(xì)胞存留在肝臟內(nèi)。

蛋白質(zhì)定義及概述2011/03/23: 蛋白質(zhì)是一種復(fù)雜的有機(jī)化合物，舊稱(chēng)“朊（ruǎn）”。氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位，氨基酸通過(guò)脫水縮合連成肽鏈。蛋白質(zhì)是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子，每一條多肽鏈有二十至數(shù)百個(gè)氨基酸殘基（-R）不等；各種氨基酸殘基按一定的順序排列。蛋白質(zhì)的氨基酸序列是由對(duì)應(yīng)基因所編碼。除了遺傳密碼所編碼的20種基本氨基酸，在蛋白質(zhì)中，某些氨基酸殘基還可以被翻譯后修飾而發(fā)生化學(xué)結(jié)構(gòu)的變化，從而對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行激活或調(diào)控。多個(gè)蛋白質(zhì)可以一起，往往是通過(guò)結(jié)合在一起形成穩(wěn)定的蛋白質(zhì)復(fù)合物，折疊或螺旋構(gòu)成一定的空間結(jié)構(gòu)

抗生素檢測(cè)2011/03/22: β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素快速檢測(cè)試紙條基于膠體金免疫層析技術(shù)，用于快速篩查β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素超標(biāo)的牛奶。將檢測(cè)液加入試紙卡上的樣品孔，檢測(cè)液中的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素與膠體金墊上的金標(biāo)抗體結(jié)合形成復(fù)合物，若β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素在檢測(cè)液中濃度低于4ng/mL，未結(jié)合的金標(biāo)抗體流到T區(qū)時(shí)，被固定在膜上的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素-BAS偶聯(lián)物結(jié)合，逐漸凝集成一條可見(jiàn)的T線(xiàn)；若β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素濃度高于4ng/mL，金標(biāo)抗體全部形成復(fù)合物，不會(huì)再與T線(xiàn)處的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素-BAS偶聯(lián)物結(jié)合，從而也就不顯示T線(xiàn)。未固定的

免疫熒光技術(shù)特點(diǎn)2011/03/22: 該技術(shù)的主要特點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。主要缺點(diǎn)是：非特異性染色問(wèn)題尚未完*，結(jié)果判定的客觀(guān)性不足，技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。熒光免疫法按反應(yīng)體系及定量方法不同，還可進(jìn)一步分做若干種。與放射免疫法相比，熒光免疫法無(wú)放射性污染，并且大多操作簡(jiǎn)便，便于推廣。國(guó)外生產(chǎn)的TDM用試劑盒，有相當(dāng)一部分即屬于此類(lèi)，并且還有TDM熒光偏振免疫分析用的自動(dòng)分析儀生產(chǎn)。由于一般熒光測(cè)定中的本底較高等問(wèn)題，熒光免疫技術(shù)用于定量測(cè)定有一定困難。近年來(lái)發(fā)展了幾種特殊的熒光免疫測(cè)定，與酶免疫測(cè)定和放射免疫分析一樣，在

維生素H2011/03/17: 1936年，兩位德國(guó)科學(xué)家Kogl和Tonnis從煮熟的鴨蛋黃中分離提取出一種結(jié)晶物質(zhì)，是酵母生長(zhǎng)所必需維生素H的，稱(chēng)之為“生物素”。生物素廠(chǎng)泛存在于自然界的各種生物中，是人類(lèi)和動(dòng)物維持健康*的要素，并因而得名。因其在食物中的分布很廣，幾乎每種食物中都含有少量的生物素，加之人體每日的所需量又很少，所以，人們一般都不缺乏這種維生素。分子式：C10H16N2O3S相對(duì)分子量：244.3，熔點(diǎn)：39~48‘C性狀與穩(wěn)定性：為無(wú)色長(zhǎng)針狀結(jié)晶，具有尿素與噻吩相結(jié)合的駢環(huán)，并帶有戊酸側(cè)鏈；極微溶于水和乙醇，

使用無(wú)血清培養(yǎng)基2011/03/14: 在即將出版的3月份的《生物技術(shù)趨勢(shì)》（TrendsinBiotechnology）雜志中，來(lái)自責(zé)任醫(yī)藥醫(yī)師協(xié)會(huì)（PhysiciansCommitteeforResponsibleMedicine）的科學(xué)家和醫(yī)生倡導(dǎo)大家都使用無(wú)血清的培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)細(xì)胞。平時(shí)科研人員所使用的胎牛血清是通過(guò)穿刺胎牛心臟獲得的，在這個(gè)過(guò)程中通常不采用任何麻醉劑。zui近，隨著科技不斷進(jìn)步人類(lèi)細(xì)胞可以在沒(méi)有動(dòng)物血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，這讓科學(xué)家和研究人員在做細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候可以更加安全，同時(shí)也更加人道。文章的作者M(jìn)egh

抗人大腸桿菌免疫雞蛋黃抗體的研究2011/03/09: 高免蛋黃抗體具有生產(chǎn)過(guò)程簡(jiǎn)單、效率高等特點(diǎn)，已越來(lái)越多地應(yīng)用于人類(lèi)許多疾病的預(yù)防和治療以及生物學(xué)的高度特異性檢測(cè)等領(lǐng)域中，并取得顯著成效。本文主要研究了以人致病性大腸桿菌為抗原，免疫母雞，研究獲得含有價(jià)蛋黃抗體的雞蛋的*條件；建立快速、準(zhǔn)確、定量的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定蛋黃抗體（IgY）效價(jià)的技術(shù)；研究抗人大腸桿菌IgY分離純化條件及其理化、生化特性；研究食品加工過(guò)程中的各種因素對(duì)大腸桿菌特異IgY生物活性的影響；探討抗人大腸桿菌免疫雞蛋抗體的功能及其機(jī)理；評(píng)估蛋黃抗體的安全性。主要

作物種質(zhì)資源的利用現(xiàn)狀2011/03/04: 20世紀(jì)50年代初期，我國(guó)農(nóng)作物遺傳育種研究規(guī)模小、數(shù)量少，但到80年代初期，主要農(nóng)作物已基本上實(shí)現(xiàn)良種化。五十多年來(lái)，我國(guó)培育的主要農(nóng)作物品種超過(guò)6000個(gè)，經(jīng)歷了6-7次大規(guī)模品種更換。每一次品種更換都使作物產(chǎn)量提高約10%，很大地促進(jìn)了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。進(jìn)入80年代以后，特別是加入WTO以來(lái)，隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)和種植業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整，作物育種方向從以往單純強(qiáng)調(diào)產(chǎn)量為主，轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)量、品質(zhì)和抗逆性的協(xié)調(diào)發(fā)展，培育了許多高產(chǎn)抗逆的農(nóng)作物新品種，支持了我國(guó)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展和種植業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的技術(shù)需求。（一）地方品

人白介素23（IL-23）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)2011/01/14: 預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中白介素23（IL-23）含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗IL-23抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗IL-23抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的IL-23呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1.酶聯(lián)板：一塊（96孔）2

人抑制素B（INH-B）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)2011/01/14: 人抑制素B（INH-B）ELISA試劑盒僅供體外研究使用!預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中INH-B含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的INH-B抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的INH-B抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的INH-B呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1、酶標(biāo)

拉沙熱實(shí)驗(yàn)室診斷與結(jié)果分析2011/01/14: 拉沙熱（Lassafever）是由Lassa病毒弓起的傳染病，傳染性強(qiáng)，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、嘔吐、腹瀉，嚴(yán)重咽峽炎，淋巴結(jié)腫大，心肌炎和黏膜出血。該病潛伏期7～10d，zui短至1d，zui長(zhǎng)至24d。拉沙病毒為一種多形體的RNA病毒，歸為沙粒病毒屬。拉沙病毒侵人人體后在上咽部繁殖，人血而致多器官受累，尤以肝臟為著。該病主要病理學(xué)損害為充血水腫、毛細(xì)血管出血和灶性壞死。肝臟病損的輕重與病毒數(shù)量相關(guān)。多乳鼠是本病的儲(chǔ)存宿主。帶病毒的鼠尿或患者尿污染食物可經(jīng)消化道傳播；直接接觸可經(jīng)皮膚黏膜傳播；患者有呼

小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-OHdG）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)2011/01/14: 小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-OHdG）ELISA試劑盒僅供體外研究使用預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測(cè)定小鼠組織勻漿、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、尿液或其它相關(guān)生物液體中8羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-OHdG）含量。概述DNA鏈上的堿基鳥(niǎo)嘌呤C-8位易受到羥自由基及單線(xiàn)態(tài)氧的攻擊而發(fā)生羥化，生成加合物8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-hydroxy-2'-deoxyguanosine，8-OHdG）。8-OHdG是DNA氧化損傷的特異產(chǎn)物，是*的內(nèi)源性及外源性因素對(duì)DNA氧化損傷的生物標(biāo)志物。8-OHdG是DNA氧化損傷的主要產(chǎn)

常用生化試劑作用2011/01/14: 1.蛋白酶K：能水解消化蛋白質(zhì)，特別是與DNA結(jié)合的組蛋白。再尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml，推薦反應(yīng)緩沖液：50mMTris-HCl（pH7.5）,10mMCaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸鈉.溶解細(xì)胞膜上的脂類(lèi)與蛋白質(zhì)，因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜，并解離細(xì)胞中的核蛋白，SDS還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀3.IPTG異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等.IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似，所以它和乳糖一樣，可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合，

雞群均勻有效抗體產(chǎn)生的保證2011/01/14: 當(dāng)今養(yǎng)雞業(yè)中，免疫接種已成為有效控制傳染性疾病和保障雞群健康的一種*的措施；免疫后能否產(chǎn)生均勻有效的抗體是衡量免疫效果的標(biāo)準(zhǔn)。雞病專(zhuān)業(yè)網(wǎng)jbzyw.com一、均勻有效抗體的概念：它是指免疫后的雞群個(gè)體間所產(chǎn)生抗體的有效性和均勻度，即抗體值在保護(hù)范圍內(nèi)，抗體均勻度在85﹪以上，離散度在4以?xún)?nèi)。雞病專(zhuān)業(yè)網(wǎng)jbzyw.com二、均勻有效抗體的重要性：雞病專(zhuān)業(yè)網(wǎng)jbzyw.com由養(yǎng)殖本身的群體性決定。集約化、規(guī)模化的養(yǎng)殖本身具有很強(qiáng)的群體性。免疫后的雞群如果沒(méi)有產(chǎn)生均勻有效的抗體，那么抗體值低的雞只對(duì)

燈黃注射液對(duì)腦缺血模型動(dòng)物的保護(hù)作用2011/01/14: 燈黃注射液對(duì)腦缺血模型動(dòng)物的保護(hù)作用評(píng)價(jià)燈黃注射液對(duì)腦缺血模型動(dòng)物的保護(hù)作用。方法：以犬大腦中動(dòng)脈結(jié)扎和大鼠頸內(nèi)動(dòng)脈注射血栓復(fù)制局部腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ停瑴y(cè)定犬血清堿性磷酸酶（AKP），肌酸激酶（CK）值，計(jì)算缺血區(qū)比例，對(duì)局部腦缺血大鼠進(jìn)行神經(jīng)癥狀和行為學(xué)的評(píng)分，計(jì)算腦梗死區(qū)百分比。以沙土鼠頸動(dòng)脈結(jié)扎法復(fù)制動(dòng)物全腦缺血模型，測(cè)定大腦皮層含水量，觀(guān)察海馬損傷程度并測(cè)定腦勻漿丙二醛（MDA），谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）及乳酸脫氫酶（LDH）的含量。結(jié)果：燈黃注射液可明顯降低犬結(jié)扎大腦中動(dòng)脈后的A

PCR-RFLP-SSCP及測(cè)序用于霍亂弧菌ctx-AB基因多態(tài)2011/01/14: 建立PCR-RFLP-SSCP及測(cè)序方法，用于分析霍亂弧菌腸毒素AB（ctx-AB）基因多態(tài)性。針對(duì)ctx-AB基因設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增片段為528bp，包括ctx-B編碼基因375bp，引物序列為5′-GGTGTAAAATTCCTTGACG-3′和5′-GGTTCGATGATGAGAAGC-3′。PCR產(chǎn)物經(jīng)RsaⅠ酶切為317bp和211bp2個(gè)片段。對(duì)酶切產(chǎn)物進(jìn)行單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SSCP）分析，銀染色法顯示結(jié)果。對(duì)不同SSCP類(lèi)型測(cè)序，利用PCR方法直接對(duì)PCR產(chǎn)物測(cè)序。霍亂弧菌O1群古典型（C

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