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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
您一定要知道的ELISA試劑盒保存條件?2020/03/03
elisa試劑盒屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有*貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA檢測(cè)試劑盒反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA
看看ELISA實(shí)驗(yàn)中抗體到底有多重要2020/02/25
很多朋友都知道,在ELISA法的試劑盒中,抗體具有一定的重要性,我們來(lái)看看ELISA實(shí)驗(yàn),抗體到底有多重要?包被固相載體的抗體應(yīng)具有高親和力和高特異性,可取材于抗血清或含單克隆抗體的腹水或培養(yǎng)液。如免疫用抗原中含有雜質(zhì),在抗血清中將出現(xiàn)雜抗體,必須除去后才能用于elisa,以保證試驗(yàn)的特異性。一般經(jīng)硫酸銨鹽析粗提的IgG已可用于包被,高度純化的IgG性質(zhì)不穩(wěn)定。如需用高親和力的抗體包被以提高試驗(yàn)的敏感性,則可采用親和層析法以除去抗血清中含量較多的非特異性IgG。腹水中單抗的濃度較高,特異性亦較強(qiáng)
關(guān)于血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的鑒別方法及作用2020/02/20
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的鑒別方法及作用您知道嗎?鑒別方法:血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。其周?chē)龀鲋S色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過(guò)程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無(wú)纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿
制備瓊脂糖凝膠的操作步驟2020/01/16
1、取5×TBE緩沖液20ml加水至200ml,配制成0.5×TBE稀釋緩沖液,待用。2、膠液的制備:稱(chēng)取0.4g瓊脂糖,置于200ml錐形瓶中,加入50ml0.5×TBE稀釋緩沖液,放入微波爐里(或電爐上)加熱至瓊脂糖全部熔化,取出搖勻,此為0.8%瓊脂糖凝膠液。加熱過(guò)程中要不時(shí)搖動(dòng),使附于瓶壁上的瓊脂糖顆粒進(jìn)入溶液。加熱時(shí)應(yīng)蓋上封口膜,以減少水份蒸發(fā)。3、膠板的制備:將有機(jī)玻璃膠槽兩端分別用橡皮膏(寬約1cm)緊密封住。將封好的膠槽置于水平支持物上,插上樣品梳子,注意觀察梳子齒下緣應(yīng)與膠槽底
黃qu霉du素B對(duì)人危害以及檢測(cè)方法2020/01/14
黃qu霉du素B1是二氫呋喃氧雜萘ling酮的衍生物,含有一個(gè)雙呋喃環(huán)和一個(gè)氧雜萘ling酮。黃qu霉du素B1是已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性zui強(qiáng)的一種。黃qu霉du素B1對(duì)包括人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性,其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。黃qu霉du素B1存在于土壤,動(dòng)植物各種堅(jiān)果,特別是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、調(diào)味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也經(jīng)常發(fā)現(xiàn)黃qu霉du素。一般以熱帶和亞熱帶等南方高溫、高濕地區(qū)受污染zui為嚴(yán)重,食品中黃qu霉du素的檢出率比較高。黃qu霉du素耐
試劑盒實(shí)驗(yàn)酶標(biāo)板的三大分類(lèi)2020/01/10
依據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合才能的不同,在ELISA試劑盒試驗(yàn)中,酶標(biāo)板是所需設(shè)備之一,有著重要作用。今天我司為您解析ELISA酶標(biāo)板的三大分類(lèi),中結(jié)合力:此種酶標(biāo)板,外表經(jīng)處理后,其蛋白結(jié)合才能大大增強(qiáng),可達(dá)300~400ngIgG/cm2,主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。使用該類(lèi)酶標(biāo)板可提高敏感性,并可相對(duì)削減包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反響。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無(wú)法有效地關(guān)閉未結(jié)合蛋白的部位,需使用蛋白作為關(guān)閉劑。高結(jié)合力:此類(lèi)酶標(biāo)板經(jīng)外表疏水鍵被動(dòng)與蛋白
血清學(xué)試驗(yàn)2020/01/09
血清學(xué)反應(yīng)是指:相應(yīng)的抗原與抗體在體外一定條件下作用,可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的沉淀、凝集現(xiàn)象。在食品微生物檢驗(yàn)中,常用血清學(xué)反應(yīng)來(lái)鑒定分離到的細(xì)菌,以zui終確認(rèn)檢測(cè)結(jié)果。血清學(xué)反應(yīng)的一般特點(diǎn):1)抗原體的結(jié)合具有特異性,當(dāng)有共同抗原體存在時(shí),會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。2)抗原體的結(jié)合是分子表面的結(jié)合,這種結(jié)合雖相當(dāng)穩(wěn)定,但是可逆的。3)抗原體的結(jié)合是按一定比例進(jìn)行的,只有比例適當(dāng)時(shí),才能出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。4)血清學(xué)反應(yīng)大體分為兩個(gè)階段進(jìn)行,但其間無(wú)嚴(yán)格界限。*階段為抗原體特異性結(jié)合階段,反應(yīng)速度很快,只需幾秒至幾分
詳細(xì)了解干擾素的真面目2020/01/03
干擾素(IFN)是一種廣譜抗病毒劑,并不直接殺傷或抑制病毒,而主要是通過(guò)細(xì)胞表面受體作用使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白,從而抑制乙肝病毒的復(fù)制,其類(lèi)型分為三類(lèi),α-(白細(xì)胞)型、β-(成纖維細(xì)胞)型,γ-(淋巴細(xì)胞)型;同時(shí)還可增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)、巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的活力,從而起到免疫調(diào)節(jié)作用,并增強(qiáng)抗病毒能力。干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質(zhì)(主要是糖蛋白),是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。它們?cè)谕N細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長(zhǎng),以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。干
化學(xué)試劑保存九大準(zhǔn)則2019/12/27
1.密封大都試劑都要密封寄存,這是實(shí)驗(yàn)室保存試劑的一個(gè)重要準(zhǔn)則。2.突出的有以下3類(lèi):①易蒸發(fā)的試劑,如濃鹽酸、濃硝酸、濃溴水等。②易與水蒸氣、二氧化碳效果的試劑,如無(wú)水氯化鈣、苛性鈉、水玻璃等。③易被氧化的試劑(或還原性試劑),如亞硫酸鈉、氫硫酸、硫酸亞鐵等。3.避光見(jiàn)光或受熱易分化的試劑,要防止光照,置陰涼處。如硝酸、硝酸銀等,一般應(yīng)盛放在棕色試劑瓶中。4.防蝕對(duì)有腐蝕效果的試劑,要注意防蝕。強(qiáng)氧化劑、有機(jī)溶劑不可用帶橡膠塞的試劑瓶寄存;堿液、水玻璃等不能用帶玻璃塞的試劑瓶寄存。5.按捺關(guān)于
關(guān)于細(xì)胞培育中包被液您了解多少?2019/12/26
在培育原代細(xì)胞時(shí)為了促進(jìn)原代細(xì)胞貼壁需要對(duì)使用的T-25/T-75等耗材進(jìn)行包被處理,常用的包液有多聚賴(lài)氨酸和纖維黏連蛋白、明膠,其中ScienCell研討實(shí)驗(yàn)室研發(fā)的包被液就包含上述3種產(chǎn)品。其中包被液多聚賴(lài)氨酸是一種合成化合物,是帶正電荷的氨基酸,通過(guò)改變培育基質(zhì)外表的電極來(lái)促進(jìn)細(xì)胞貼壁。在細(xì)胞培育中廣泛用于包被物促進(jìn)細(xì)胞貼壁。除了促進(jìn)細(xì)胞貼壁成長(zhǎng),包被液多聚賴(lài)氨酸包被后能提高原代細(xì)胞的存活率和促進(jìn)神經(jīng)突長(zhǎng)出。Sciencell出售的包被液多聚賴(lài)氨酸是原液,分子量是70000~150000。
抗生素標(biāo)準(zhǔn)品特殊保存條件您所不知道的2019/12/20
恒遠(yuǎn)生物說(shuō)明書(shū)中提到不同的標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品應(yīng)根據(jù)其理化性質(zhì)、貯存要求的不同選擇適宜的貯存環(huán)境和條件,分別置于規(guī)定的位置。貯存環(huán)境要求較高,貯存室應(yīng)盡量設(shè)置空調(diào)設(shè)施,保證室內(nèi)陰涼、干燥、避光、通風(fēng),溫度在20±5℃,相對(duì)濕度在50~75%為宜。特殊品種要求嚴(yán)格按照規(guī)定的貯存條件妥善保存。但是關(guān)于抗生素標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品的使用保存,我司認(rèn)為還需注意以下幾點(diǎn):(1)正確開(kāi)啟抗生素標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品大多置玻璃安瓿中保存,啟開(kāi)時(shí)必須嚴(yán)格防止玻璃屑掉入瓶中。具體可按如下操作:輕微震敲安瓿,盡量使內(nèi)容物聚集于底部,砂輪
CIK細(xì)胞的培養(yǎng)原理2019/12/18
【培養(yǎng)原理】CIK細(xì)胞,即細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(Cytokine-InducedKiller,CIK)是一種新型的免疫活性細(xì)胞,CIK增殖能力強(qiáng),細(xì)胞毒作用強(qiáng),具有一定的免疫特性。由于該細(xì)胞同時(shí)表達(dá)CD3和CD56兩種膜蛋白分子,故又稱(chēng)為NK細(xì)胞(自然殺傷細(xì)胞)樣T淋巴細(xì)胞,兼具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性,和NK細(xì)胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點(diǎn)。該細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別能力很強(qiáng),如同“細(xì)胞dao彈”,能“點(diǎn)射”腫瘤細(xì)胞,但不會(huì)傷及“無(wú)辜”的正常細(xì)胞。尤其對(duì)手術(shù)后或放化療后患者*,能消除殘留微小的轉(zhuǎn)移
原代細(xì)胞的培育辦法2019/12/06
1、安排塊培育法(1)依照前述辦法取材,將安排剪成或切成1mm3巨細(xì)的小塊,并參加少許培育基使安排濕潤(rùn)。(2)將小塊均勻涂布于瓶壁,每小塊距離0.2cm~0.5cm,一般在25mL培育瓶(底面積為17.5cm2)可接種20~30小塊為宜,小塊放置后,輕輕翻轉(zhuǎn)培育瓶,使瓶底朝上,然后于瓶?jī)?nèi)參加適量培育基蓋好瓶塞,將瓶歪斜放置在37℃溫箱內(nèi)。(3)培育2~4小時(shí),待小塊貼附后,將培育瓶緩慢翻轉(zhuǎn)平放,靜置培育,動(dòng)作要輕,嚴(yán)禁搖擺和來(lái)回振動(dòng),以防因?yàn)榧?dòng)而使小塊漂起而造成培育失敗,若安排塊不易貼壁可預(yù)先
ELISA試劑盒常壓滅菌操作要點(diǎn)2019/12/03
ELISA試劑盒常壓滅菌操作要點(diǎn):(1)進(jìn)鍋不擠壓:擺放待滅菌的菌種袋必須分層,每層菌種袋不可擺太擠,要留一定空隙,不能相互擠壓。不適宜將菌種袋臥疊,要分層立放,以保證蒸汽暢流和接種穴完好。為了避免棉塞易潮濕,可在棉塞上蓋一層薄膜或油紙,但覆蓋物不可太大,否則會(huì)影響上下層蒸汽暢流;也可將4個(gè)菌種袋的棉塞并攏,棉塞向下一同塞到4個(gè)菌種袋的空隙中,這樣塑料袋規(guī)格要加長(zhǎng),但防潮效果良好。(2)及時(shí)滅菌:隨裝隨滅。配料到滅菌間隔時(shí)間越短越好,以免雜菌自繁。大規(guī)模生產(chǎn)時(shí),要分鍋滅菌。(3)攻頭:指開(kāi)始滅菌
少量標(biāo)準(zhǔn)品的稱(chēng)量與溶解方法2019/11/29
近日,我公司技術(shù)員看到一個(gè)問(wèn)題說(shuō):“當(dāng)樣品量非常少時(shí),如何從瓶子中獲取所有的純物質(zhì)?感覺(jué)有點(diǎn)難度,麻煩您幫我分析一下?!庇行?biāo)準(zhǔn)品由于非常昂貴,廠商只能以非常小的包裝提供給客戶(hù),如1mg,5mg,10mg等。此時(shí),客戶(hù)拿到產(chǎn)品時(shí)可能會(huì)覺(jué)得瓶子是空的,這種情況是由于粉末狀的物質(zhì)會(huì)分散在瓶壁和蓋子上,而液體狀物質(zhì)會(huì)在瓶壁形成一層可能看不見(jiàn)的液層。其實(shí)少量標(biāo)準(zhǔn)品的稱(chēng)量與溶解方法其實(shí)并不難:1.擦拭瓶外壁和蓋子,等其晾干。2.稱(chēng)量整個(gè)瓶子(等到天平讀數(shù)穩(wěn)定),記錄數(shù)據(jù),至0.1mg。3.用合適的溶劑(能
關(guān)于重組蛋白的特性2019/11/27
重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,在-80℃條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因?yàn)槿芙獠缓脮?huì)降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過(guò)程中也需要仔細(xì)注意,這些都是用戶(hù)在實(shí)際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問(wèn)題。(1)原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。大腸桿菌表達(dá)的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護(hù)劑,使用過(guò)濾后的無(wú)菌水作為復(fù)溶劑即可,復(fù)溶凍干蛋白100μg,用8
免疫酶技術(shù)中濃度的選擇條件2019/11/22
在免疫酶技術(shù)中,首先要確定的變異因素就是酶標(biāo)記物的工作濃度。因?yàn)槊笜?biāo)記物濃度的很小變化,便可導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生很大的波動(dòng)。另外,由于濃度過(guò)高,可使非特異性反應(yīng)增加,而濃度過(guò)低又可影響測(cè)定的敏感性。因此,正式試驗(yàn)前必須準(zhǔn)確滴定其工作濃度。1.酶標(biāo)記抗體的滴定方法是:將抗原(或抗體)物理吸附于固相載體上,然后將經(jīng)過(guò)一系列稀釋的酶標(biāo)抗體(或抗Ig抗體)與吸附在載體上的抗原(或抗體)起反應(yīng),以酶與底物的顯色反應(yīng)程度來(lái)確定酶標(biāo)記抗體的效價(jià),或稱(chēng)工作濃度。2.其步驟為:先將抗原(或抗體)用0.05MPH9.6
細(xì)胞組織塊培養(yǎng)法2019/11/18
一、目的學(xué)習(xí)原代培養(yǎng)方法,從供體取得組織細(xì)胞后在體外進(jìn)行的培養(yǎng)。二、概述組織塊培養(yǎng)法是常用的、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法??梢圆捎眉羟蟹?,即將組織塊剪切成小塊后,接種于培養(yǎng)瓶,組織小塊貼壁24h或更長(zhǎng)時(shí)間后,細(xì)胞就從組織四周游出。但由于在反復(fù)剪切和接種過(guò)程中對(duì)組織塊的損傷,并不是每個(gè)小塊都能長(zhǎng)出細(xì)胞。用于組織塊培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶可根據(jù)不同細(xì)胞生長(zhǎng)的需要作適當(dāng)處理,如預(yù)先涂以膠原薄層,以利于上皮樣細(xì)胞等的生長(zhǎng)。(本節(jié)以新生牛主動(dòng)脈平滑肌培養(yǎng)為例)三、材料(一)儀器1.凈化工作臺(tái)2.恒溫水浴箱3.
不同的培養(yǎng)基,不同的滅菌方法2019/11/15
培養(yǎng)基的類(lèi)型可以按照成分、物理狀態(tài)分、用途、微生物種類(lèi)這四個(gè)方面來(lái)規(guī)劃分類(lèi)。培養(yǎng)基的滅菌是一個(gè)常見(jiàn)步驟,并且,不同的培養(yǎng)基需根據(jù)其性能采用不同的滅菌方法,在這里,上海恒遠(yuǎn)為您一一指出:1.常見(jiàn)方法:通常采用高壓濕熱滅菌法121℃滅菌15分鐘,特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要求進(jìn)行滅菌(如含糖培養(yǎng)基115℃滅菌20分鐘)。2.部分培養(yǎng)基,只能煮沸滅菌。3.對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基或添加物質(zhì),應(yīng)采用膜過(guò)濾方法進(jìn)行過(guò)濾除菌。4.即用型試劑不需滅菌,應(yīng)參見(jiàn)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或供應(yīng)商使用說(shuō)明,直接使用?!九囵B(yǎng)基圖片】●器具和設(shè)備
胞嘧啶的性質(zhì)及與胸腺嘧啶的區(qū)別2019/11/12
胞嘧啶是核酸(DNA和RNA)中的主要堿基組成成分之一。胞嘧啶可由二巰基脲嘧啶、濃氨水和氯yi酸為原料合成制得。用作藥物中間體。胞嘧啶的性質(zhì):CAS號(hào):71-30-7分子式:C4H5N3O分子量:111.10純度:≥98.0%MDL號(hào):MFCD00006034Beilstein號(hào):2637EC號(hào):200-749-5化學(xué)性質(zhì):白色結(jié)晶性粉末,可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑,來(lái)源于合成。用途:用作藥物中間體白色片狀結(jié)晶。100℃失水,300℃時(shí)成棕色,320~325℃分解。1g產(chǎn)品能溶于130
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