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技術(shù)專欄:關(guān)于流式細胞術(shù)（FCM）2024/07/15

FCM是利用流式細胞儀對處在快速直線流動狀態(tài)中的單列細胞或生物顆粒進行逐個、多參數(shù)、快速的定性、定量分析或分析技術(shù)。然而，在FCM的實際應(yīng)用過程中，要想得到高質(zhì)量的流式數(shù)據(jù)卻并非易事?，F(xiàn)就FCM實驗中的常見問題進行分析，希望能幫助相關(guān)實驗人員提高實驗成功率。一、怎么選擇合適的對照？1）同型對照：使用同型抗體做平行實驗，主要目的是消除抗體與樣本的非特異性結(jié)合。2）陰性細胞對照：使用已知的不表達目標抗原的細胞做平行實驗，主要目的是消除抗體的非特異性結(jié)合。3）二抗對照：第二抗體多為熒光標記的多抗，非特

科研筆記丨補體知多少？2024/07/10

補體（Complement，C）是存在于正常人和動物血清與組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶活性的蛋白質(zhì)。補體系統(tǒng)主要有三條激活途徑：經(jīng)典途徑(CP)、凝集素途徑(LP)、旁路途徑(AP)。這些途徑依賴不同的起始分子激活，但最后殊途同歸，產(chǎn)生相同的終端效應(yīng)分子：過敏性毒素(C4a/C3a/C5a)、膜攻擊復(fù)合物(MAC)和調(diào)理素(如C3b)。補體系統(tǒng)在防御病原體和維持宿主穩(wěn)態(tài)中起著關(guān)鍵作用。一、補體系統(tǒng)的命名補體(complement)：新鮮血清中存在一種不耐熱的成分，該種成分可輔助抗體對相應(yīng)菌細胞產(chǎn)

ELISA實驗稀釋血清具體步驟2024/07/03

先把蛋白稀釋一定的倍數(shù)，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體確定一個參數(shù)），將抗原進行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進行孵育后洗滌，再加酶結(jié)合物進行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗滌后，加底物溶液顯色，終止反應(yīng)后分別測定o.d值，選擇o.d值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個o.d值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清o.d值要求在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋？有兩個原因：1.競爭抑制比較明顯，應(yīng)稀釋競爭物；2.血清中

恒遠生物|關(guān)于促卵泡生成素(FSH)2024/06/24

促卵泡生成素(FSH)是性激素六項檢查中提到的一個概念，它是人體內(nèi)，由垂體前葉嗜堿性細胞分泌的一種糖蛋白激素，其主要的作用在于促進卵巢的卵泡發(fā)育和成熟。一、簡介促卵泡生成素（FSH）是一種促性腺激素，也是一種糖蛋白多肽激素。FSH由垂體前葉的促性腺激素細胞合成和分泌，它和黃體生成素（LH）在生殖系統(tǒng)中共同發(fā)揮作用。FSH是一個35.5kDa的糖蛋白異構(gòu)體，由兩個多肽單元組成，即α和β。其結(jié)構(gòu)與黃體生成素（LH）、促甲狀腺激素（TSH）和人絨毛膜促性腺激素（hCG）的結(jié)構(gòu)相似。二、FSH分子結(jié)構(gòu)F

ELISA實驗關(guān)鍵注意要點！2024/06/18

上海恒遠生物科技有限公司成立于2010年12月，集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體，以科研試劑生產(chǎn)、診斷試劑原料供應(yīng)生產(chǎn)為核心，致力于為全球來自高等院校、科研機構(gòu)、診斷試劑生產(chǎn)廠家以及生物制藥公司的廣大客戶們提供高質(zhì)量生物產(chǎn)品。恒遠生物現(xiàn)擁有各物種基因產(chǎn)品50余萬種；重組蛋白20余萬種；數(shù)十個種屬的多克隆抗體3萬多種和高質(zhì)量單克隆抗體數(shù)百種。恒遠品牌自主研發(fā)ELISA試劑盒，現(xiàn)已涵蓋20多個種屬，數(shù)千種產(chǎn)品，涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個研究領(lǐng)域。恒遠生物為大家總結(jié)，ELISA試劑盒實驗時

ELISA實驗前準備有哪些?2024/06/11

恒遠生物溫馨提醒廣大科研者：做實驗前都必須做好充足的準備（試劑準備、實驗儀器準備、樣本準備、實驗參與人員指標等等）。本周我司技術(shù)人員就ELISA實驗的準備工作提供詳細的介紹說明。一起來看看！為了使最終的ELISA實驗結(jié)果就要較高的可靠性，應(yīng)在實驗開始前必須做好的前期準備工作包括對實驗所需的儀器進行質(zhì)控。使儀器保持好的工作狀態(tài)，應(yīng)建立維護和校正儀器的標準操作程序，常見的需要控制的儀器包括：移液器（加樣槍）、溫箱、洗板機和酶標儀。具體質(zhì)控操作請參考如下要求：移液器：ELISA加樣量?。?0-200μ

ELISA實驗樣本處理的注意事項2024/06/04

ELISA試劑盒檢測的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等，不同類型的檢測樣本前期的處理辦法是不一樣的。試驗樣本的處理可謂是ELISA試驗的關(guān)鍵過程之一，所以科研朋友一定要多加注意。下面就給大家詳細說說！一、均質(zhì)①安排樣本：肉、肝食品類切細，用絞肉機重復(fù)絞碎，混合均勻。②水產(chǎn)樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細，用均質(zhì)器均漿；質(zhì)料外表較臟時,需適當用蒸餾水清洗。③蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充沛混勻。④水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去外表的水分，取食用部分。

ELISA檢測結(jié)果不理想的原因？2024/05/27

ELISA作為經(jīng)典的免疫檢測方法，看起來很平常，然而真正做好它并不容易。恒遠專注科研試劑盒的研發(fā)及銷售多年，涉及分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個領(lǐng)域，滿足您實驗所需，以實現(xiàn)與客戶的雙贏，完善的庫存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的專業(yè)技術(shù)，保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)。有哪些方法可以借鑒呢？恒遠技術(shù)人員總結(jié)了以下幾點：一、確定您的樣本類型和試劑盒可以兼容常見樣本類型有血清，血漿，細胞培養(yǎng)上清，如果是廠家實驗驗證過的，可根據(jù)產(chǎn)品說明購買使用。注意：血漿制備用到的抗凝劑有EDTA、檸檬酸鹽、肝素等多種，

關(guān)于IL-6三條信號通路你了解多少？2024/05/20

IL-6簡述:1986年，IL-6被鑒定B細胞刺激因子，促進效應(yīng)B細胞分化為產(chǎn)生抗體的細胞。IL-6也稱為IFN-β2，肝細胞刺激因子和雜交瘤/漿細胞瘤生長因子，是一種由184個氨基酸組成的25-kDa分泌糖肽單核細胞和巨噬細胞是IL-6的主要生產(chǎn)者。T細胞、B細胞、肝細胞、內(nèi)皮細胞、成纖維細胞、角質(zhì)形成細胞、系膜細胞和脂肪細胞以及幾種腫瘤細胞也可以組成型或刺激后產(chǎn)生。IL-6是一種多效性細胞因子，可影響多種免疫和生理過程，如急性期蛋白生成、炎癥、抗原特異性免疫應(yīng)答、造血、細胞凋亡、分化和細胞代

凍存后ELISA試劑盒對實驗有影響嗎?2024/05/15

恒遠生物專注科研ELISA試劑盒的研發(fā)及銷售多年，涉及分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個領(lǐng)域，滿足您實驗所需，以實現(xiàn)與客戶的雙贏，完善的庫存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的專業(yè)技術(shù)，保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)。期待您的來電。我們知道，完整的ELISA試劑盒包含：①酶的底物；②已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)；③酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物)；④結(jié)合物及標本的稀釋液；⑤洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；⑥陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品

ELISA實驗之“OD值“？2024/05/10

“OD值”這個概念想必做實驗的各位小伙伴們都不陌生，從判斷提取核酸的質(zhì)量及濃度，到BCA蛋白定量進行蛋白定量，又或者是ELISA實驗檢測目的蛋白含量，這些常用的基礎(chǔ)實驗都需要檢測樣品的“OD值”，但是，“OD值”到底是什么，我們在測量“OD值”的時候又有哪些需要注意的問題，今天就讓小編給小伙伴們好好說道說道。什么是“OD”值？OD全稱opticaldensity，也就是光密度，也可以稱為吸光度。吸光度指的是利用物質(zhì)的吸收光譜，來鑒別物質(zhì)或者測定物質(zhì)的含量，也就是將一束特定波長的光通過被檢測物，被

技術(shù)專欄:磷酸化蛋白WB實驗注意事項2024/04/28

蛋白磷酸化是一種非常重要的翻譯后加工，做信號通路必然是要檢測蛋白磷酸化的，Westernblot是評估蛋白磷酸化狀態(tài)的常用方法，其實和跑正常蛋白沒什么出入，只不過孵育的是識別磷酸化的抗體。下面恒遠生物帶大家總結(jié)一下實驗中的注意要點。一、關(guān)于磷酸化蛋白樣品裂解液問題蛋白的磷酸化是一個非常迅速的反應(yīng)，取樣品的過程要迅速，樣品要新鮮，樣品處理最好在冰上操作，操作時間盡量短。用PBS洗滌細胞時，PBS一定要4℃預(yù)冷。如果是組織的話，提取蛋白時采用液氮研磨的方法，研磨器具最好提前預(yù)冷，保持低溫的狀態(tài)。提取

技術(shù)科普:抗體基礎(chǔ)知識介紹2024/04/17

抗體（antibody，Ab）是機體在體內(nèi)存在的外來分子、微生物等抗原物質(zhì)刺激下，由B淋巴細胞或記憶細胞增殖分化成的漿細胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白（immunoglobulins，Ig），主要分布在血清中，也分布于組織液及外分泌液中。一、抗體分子的基本結(jié)構(gòu)抗體由四條多肽鏈組成，即兩條相同的相對分子質(zhì)量較小的輕鏈（lightchain，L鏈）和兩條相同的相對分子質(zhì)量較大的重鏈（heavychain，H鏈）借二硫鍵連接組成的對稱結(jié)構(gòu)。1.輕鏈由214個氨基酸殘基組成，分子質(zhì)量

科研資訊:原代細胞、細胞系與細胞株的區(qū)別2024/04/08

原代細胞(primarycell)是指從機體的組織中經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得、并在體外進行培養(yǎng)的細胞，稱為原代細胞。一般認為，培養(yǎng)的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。原代細胞、細胞系和細胞株的區(qū)別細胞系(cellstrain)：原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細胞系，由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限，可稱為有限細胞系，如可以連續(xù)培養(yǎng)，則稱為連續(xù)細胞系，培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。細胞株(cellline)：通過選擇法或克隆形成法從

2024技術(shù)要點:ELISA實驗之包被原?2024/03/28

在ELISA檢測系統(tǒng)的關(guān)鍵要素中，包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別，所以保留抗原很重要，elisa試劑盒我做重組蛋白時，一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。操作注意：(1)試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。(2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封(低溫干燥)保存。(3)嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。(4)所有液體組分使用前充分搖勻。試劑

恒遠產(chǎn)品文獻:小鼠HBEGF,CSF1,TNF-a,TGF-β1,and IL-13 ELISA引用文獻2024/03/19

【文獻標題】TheinterplayofCxcl10+/Mmp14+monocytesａndCcl3+neutrophilsproactivelymediatessilica-inducedpulmonaryfibrosis【作者】DeminCheng,WenxiuLian,TingWanget.al【作者單位】南京醫(yī)科大學(xué)（NanjingMedicalUniversity）【文獻中引用產(chǎn)品】小鼠肝素結(jié)合性表皮生長因子(HBEGF)ELISA試劑盒小鼠巨噬細胞集落刺激因子1(CSF1)ELISA

恒遠生物|大鼠胚胎心肌細胞H9c2(2-1)培養(yǎng)攻略2024/03/12

品牌:恒遠生物貨號:HYCC30031中文名稱:大鼠胚胎心肌細胞規(guī)格:T25形態(tài)特性:上皮樣細胞生長生長特性:貼壁生長培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS傳代方法:1:2~1:6傳代；2~3天換液1次。凍存條件:無血清細胞凍存液特征特性：該細胞由KimesB和BrandtB從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細胞株亞克隆得到；表現(xiàn)出許多骨骼肌的特性。這個細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng)。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%，融合很快發(fā)生。一、細胞收到后處理細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)

2024實驗指南:ELISA樣本的處理注意事項2024/03/05

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。對于ELISA樣本的處理有很多小伙伴還不是很清楚，恒遠生物為大家總結(jié)如下，希望對您的實驗有所幫助。ELISA的檢測目的是為了實驗提供準確的實驗依據(jù)，為了保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性，在實驗過程中必須堅持全面的質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制，在收集標本前都必須有一個完整的計劃。注意事項1、每個樣本量收集體積=100ulx檢測種類，如果要做復(fù)孔，標本

干貨分享:無血培養(yǎng)基的利與弊您知道嗎?2024/02/20

每個產(chǎn)品都有著屬于各自的長處，在體外細胞能夠長時間繁殖且不要加入任何血清進去就可以的合成培養(yǎng)基就稱之為無血清培養(yǎng)基，現(xiàn)在其已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動物細胞來制備單克隆抗體，重組蛋白和病毒抗原等。那么，無血清培養(yǎng)基又存在著哪些優(yōu)缺點呢？和恒遠小編一起來看看吧！無血培養(yǎng)基的優(yōu)點存在具體說明：1.由于其不會含有雜志蛋白，從而使得細胞培養(yǎng)時更容易實現(xiàn)組分控制；2.無血清培養(yǎng)基可以進行選擇性地促進特殊類型的細胞生長；3.其還能選擇生長因子的類型、濃度和別的誘導(dǎo)因子，從而促使細胞生長增殖的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換為誘導(dǎo)細

牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒產(chǎn)品說明2024/01/30

檢測范圍：0.8μg/ml-40μg/ml使用目的：本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)含量。實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)水平。用純化的牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)，再與HRP標記的結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HR