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生化試劑類使用方法2021/04/21
生化試劑類作用:1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質,特別是與DNA結合的組蛋白,在尿素和SDS中穩定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應緩沖液:50mMTris-HCl(pH7.5),10mMCaCl2。2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,SDS還能與蛋白質結合而沉淀。3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,常用于藍白斑篩選及IPTG誘導的細菌內的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結構相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操
其他生化試劑特點與自備的器材方法2021/04/16
其他生化試劑自備的器材:1.儀器:分析天平、離心機、熒光PCR擴增儀、組織研磨器、-20℃冰箱、可調移液器(2µL、20µL、200µL、1000µL)。2.耗材:熒光PCR反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5mL經焦碳酸二乙酯(DEPC)水處理的滅菌離心管、吸頭(10µL、200µL、1000µL)、滅菌雙蒸水。其他生化試劑特點:1.即開即用,用戶只需要提供樣品DNA模板,操作簡單,定量準確快速。2.引物經過優化,特異性強。預期的PCR產物長度為560bp。3.PCRmix中含上樣染料,P
大鼠ELISA檢測試劑盒標本要求與操作步驟2021/04/13
大鼠ELISA檢測試劑盒操作步驟:產品僅用于科研實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。1.加樣:分別設空白孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔加待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標記抗小鼠IgG工作液100μl(取1μl
其他ELISA試劑盒的注意事項2021/04/02
其他ELISA試劑盒注意事項:(1)IgG:血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和ADCC效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。(2)IgA:分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。(3)IgM:是分子量大,體內受感染后早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。(4)IgD:主要存在于成熟B細胞表面,是B
小鼠ELISA檢測試劑盒操作步驟使用2021/03/30
小鼠ELISA檢測試劑盒標本要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細
ELISA檢測試劑盒樣本要求幾點2021/03/26
ELISA檢測試劑盒優點如下:一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩定的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;五、性價比非常好,節省實驗經費。ELISA檢測試劑盒標本要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右
人胚腎細胞使用注意方法2021/03/23
人胚腎細胞使用方法:收到細胞后,請按照以下方法進行操作。1.取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。2.待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。3.細胞傳代1、吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;2、添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;3、用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進
植物激素及核酸類作用方法2021/03/18
植物激素及核酸類作用:1.低濃度的生長素有促進器官伸長的作用。從而可減少蒸騰失水。超過適濃度時由于會導致乙烯產生,生長的促進作用下降,甚至反會轉為抑制。不同器官對生長素的反應不同,根敏感,芽次之,莖的敏感性差。生長素能促進細胞伸長的主要原因,在于它能使細胞壁環境酸化、水解酶的活性增加,從而使細胞壁的結構松弛、可塑性增加,有利于細胞體積增大。2.生長素還能促進RNA和蛋白質的合成,促進細胞的分裂與分化。生長素具有兩重性,不僅能促進植物生長,也能抑制植物生長。低濃度的生長素促進植物生長,過高濃度的生
抗生素類五大分類2021/03/12
鏈霉素鏈霉素是個氨基糖苷類抗生素,也是個用于治療結核病的藥物,口服吸收極少,肌內注射吸收快,鏈霉素對銅綠假單孢菌和其他G-桿菌的抗菌活性,對土拉菌病和鼠疫有*,常為,特別是與四環素聯合用藥已成為目前治療鼠疫的效手段。也用于治療多重耐藥的結核病。與青霉素合用可治療溶血性鏈球菌、草綠色鏈球菌及腸球菌等引起的心內膜炎。慶大霉素慶大霉素口服吸收很少,肌內注射吸收迅速而*。在腎皮質中積聚的藥物可比血漿濃度高出數倍,停藥20d后仍能在尿中檢測到本品。是治療各種G-桿菌感染的主要抗菌藥,尤其對沙雷菌屬作用更強
人ELISA試劑盒注意事項說明2021/03/10
人ELISA試劑盒標本收集:1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。2、血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。3、尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。4
豬ELISA檢測試劑盒注意事項與原理2021/03/05
豬ELISA檢測試劑盒注意事項:1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間較好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,較好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定
菌株原理及保存方法2021/03/02
菌株原理:耐藥菌株是指在長期的抗生素選擇之后出現的對相應抗生素產生耐受能力的菌株。細菌的耐藥性,是指細菌多次與藥物接觸后,對藥物的敏感性減小甚至消失,致使藥物對耐藥菌的療效降低甚至無效。耐藥菌株的出現增加了感染性疾病治愈的難度,并迫使人類尋找新的對抗微生物感染的方法。菌株保存使用:1、新引進的菌種經形態、染色、培養性狀、生化特性等的鑒別確定后作記錄,并進行保存。2、長期保存的儲存菌株以冷凍干燥保藏為主,特殊要求的菌種可用其它方法進行保存,保存期可長達幾年至幾十年。3、半儲存菌株以含20%甘油的肉
熒光-PCR法原理與技術原理2021/02/25
熒光-PCR法原理:所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光-PCR法技術原理:將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信
PCR檢測試劑盒技術原理步驟2021/02/24
PCR檢測試劑盒原理:本試劑盒系由預包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬瘟病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為黃色
其他生化試劑存在的問題及解決辦法2021/02/08
1優質的儀器用水優質的儀器用水是使用好檢驗試劑的一個十分重要的環節之一。因為測定離子類項目:比如銅、鐵、鋅、鈣、鎂、磷。這些項目在使用過程中,儀器用水的質量相當重要,雖然現在一般醫院的生化儀都有制水系統,但制水系統基本都是制備去離子水,離子交換樹脂在使用一段時間后交換能力明顯下降,需要定期進行更換,否則制備的水離子含量多,電導率偏高。使用含離子超標的水沖洗儀器,直接影響檢驗結果。再如血氨、二氧化碳項目,如果水質不好,儀器用水中本身含氨和二氧化碳就很高,則檢驗該項目的結果也會受到嚴重的影響。還有如
熒光核酸試劑使用方法產品2021/02/04
熒光核酸試劑使用方法:注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。1.樣本處理(樣本處理區)待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。2.擴增試劑準備(PCR前準備區)取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMDRT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根據每頭份用量計算N+1份FMDRT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,
小鼠elisa試劑盒樣本處理及提供的材料2021/02/03
小鼠elisa試劑盒樣本處理及要求1.血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將
小鼠ELISA檢測試劑盒操作步驟及性能2021/01/28
小鼠ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30
大鼠ELISA檢測試劑盒樣本收集步驟方法2021/01/27
大鼠ELISA檢測試劑盒注意事項:1、操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2、正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導致結果錯誤,實驗重復性差。3、手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數不要超過說明書推薦的洗滌次數,洗液在反應孔內滯留的時間不宜太長。不要使
人ELISA試劑盒優點及樣品收集、處理及保存方法2021/01/20
人ELISA試劑盒具有如下優點:一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩定的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;五、性價比非常好,節省實驗經費。人ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30
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