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小鼠ELISA試劑盒組織結構2017/08/16
小鼠ELISA試劑盒組織結構:1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心23分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心60分鐘去除顆粒。3、細胞上清液:1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘,取上清液。5、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆
人ELISA試劑盒操作的通用的規(guī)矩2017/08/14
人ELISA試劑盒操作的通用的規(guī)矩1.在運用微量加樣器時,羅致不一樣瓶子中液體后要更換槍頭,即使羅致標準品溶液。2.羅致液體時速度不易太快,避免產生氣泡,羅致的量不可準確。3.要保證微量加樣器的準確性,可以運用蒸餾水和電子天平進行判定(由于蒸餾水不含雜質,溫度環(huán)境為20%支配時,lmL的水可以看作是lg、200L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應當將其zui高量程和zui低量程進行判定。4.將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會天然流下去。吸
小鼠ELISA試劑盒抗體的結構2017/08/11
小鼠ELISA試劑盒抗體的結構抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈(L)和兩個重鏈(H)的單體組成。Ig的輕鏈是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)兩種型別。五類Ig的重鏈結構不同,這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ(gamma)鏈和μ(mu)鏈。重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異,稱為可變區(qū),分別用V
大鼠ELISA試劑盒處理方法2017/08/09
大鼠ELISA試劑盒處理方法1、血清血清是zui常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃1000×g離心20分鐘,仔細收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。采血過程中應避免溶血,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質,在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,而導致檢測的
大鼠ELISA試劑盒測定步驟2017/08/07
大鼠ELISA試劑盒測定步驟使用前將所有IL-6ELISA試劑盒和樣本平衡至室溫。推薦所有的樣本、標準和對照測定雙份。1.準備所有的試劑和工作標準品。2.取下多余的微量培養(yǎng)板條,放回裝有干燥劑的錫箔袋中,重新密封。3.每孔加入100ulAssayDiluentRD1W。4.每孔依次加入100ul標準品、樣本和對照。用橡皮條密封。室溫孵化2小時。記錄測定標準和樣本的分布。5.吸棄孔內液體,每孔400ul洗滌液,充分洗滌后*去除液體。在干凈的紙上拍干。反復洗滌4次。6.每孔加入200ulIL-6Co
人ELISA試劑盒樣本處理的具體方法2017/08/04
人ELISA試劑盒樣本處理的具體方法1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.
小鼠ELISA試劑盒處理方式2017/08/02
小鼠ELISA試劑盒處理方式1、采集血漿時一般不加抗凝劑(主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽),采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?.1、血液包括血漿和血清,它們的主要區(qū)別就是:血清凝血而血漿不凝血,所以它們的處理方式也就不一樣1.2、如要采集血清,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時后,800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?、胃液和唾液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,但是一般飯后半小時內不易采集,因為剛進食
大鼠ELISA試劑盒注意事項簡介2017/08/02
大鼠ELISA試劑盒注意事項簡介收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮荆堅炷H〔暮螅瑢吮炯皶r分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質量,所以避免反復凍融。1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)試
大鼠ELISA試劑盒實驗步驟2017/07/31
大鼠ELISA試劑盒實驗步驟1、收集蛋白樣品(Proteinsamplepreparation)可以使用適當?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細胞、懸浮細胞或組織樣品。對于某些特定的亞細胞組份蛋白,例如細胞核蛋白、細胞漿蛋白、線粒體蛋白等,可以參考相關文獻提取這些亞細胞組份蛋白,也可以使用試劑盒進行抽提。收集完蛋白樣品后,為確保每個蛋白樣品的上樣量一致,需要測定每個蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同,需要采用適當?shù)牡鞍诐舛葴y定方法。因為不同的蛋白濃度測定方法對于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。2、
人ELISA試劑盒標本及采集2017/07/28
人ELISA試劑盒標本及采集、貯運因素:(1)ELISA試劑盒進口大鼠嚴重溶血,以HRP為標記的ELISA測定中,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性;(2)混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內不易洗凈;(3)如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應;(4)標本凝固不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;(5)采
大鼠ELISA試劑盒基本原理2017/07/26
大鼠ELISA試劑盒基本原理①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,zui后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根
人ELISA試劑盒驟進行操作2017/07/24
人ELISA試劑盒驟進行操作:可以使用適當?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細胞、懸浮細胞或組織樣品。對于某些特定的亞細胞組份蛋白,例如細胞核蛋白、細胞漿蛋白、線粒體蛋白等,可以參考相關文獻提取這些亞細胞組份蛋白,也可以使用試劑盒進行抽提。收集完蛋白樣品后,為確保每個蛋白樣品的上樣量一致,需要測定每個蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同,需要采用適當?shù)牡鞍诐舛葴y定方法。因為不同的蛋白濃度測定方法對于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。(1)、SDS-PAGE凝膠配制SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻資
人ELISA試劑盒標本的采集及保存2017/07/21
人ELISA試劑盒標本的采集及保存:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。3.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此
小鼠ELISA試劑盒標本的采集及保存2017/07/21
小鼠ELISA試劑盒標本的采集及保存1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。3.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此
人ELISA試劑盒基本原理2017/07/19
人ELISA試劑盒基本原理①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,zui后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)
大鼠ELISA試劑盒操作要點2017/07/19
大鼠ELISA試劑盒操作要點1.仔細閱讀說明書,確定胰島素ELISA試劑盒在有效期內。按說明書確定所有試劑齊全,以及所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等。2.標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存。3.按胰島素ELISA試劑盒說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。4.選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對。若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體,從同一家公司選擇抗體。5.一般待測抗原標準曲線的線性范圍
人ELISA試劑盒注意事項2017/07/14
人ELISA試劑盒注意事項1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(0.1-200ng/ml范圍內),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。6
人ELISA試劑盒操作方法及步驟2017/07/10
人ELISA試劑盒操作方法及步驟:操作步驟:1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液60ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液30ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液15ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液7.5ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空
小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法2017/07/07
小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加
小鼠ELISA試劑盒檢測中的應用2017/07/03
小鼠ELISA試劑盒檢測中的應用結核菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在:1.區(qū)分TB與其它分枝桿菌;2.檢測TB耐藥基因;3.提高TB的陽性檢出率。PCR技術在HBV檢測中的應用1、了解乙肝病毒在體內存在的數(shù)量。2、是否傳染,傳染性有多強。3、是否復制。4、是否有必要服藥。5、肝功能異常改變是否由病毒引起。6、判斷病人是適合用哪類抗病毒的藥物。7、判斷藥物治療的療效。PCR技術在HCV檢測中的應用HCV是引起輸血后肝炎的主要致病因子,因其在血中的含量極低,僅為HBV的1%,其免疫學標志只有抗-HCV一項
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