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免疫技術用熒光染料2016/08/05
ELISA試劑盒在流式細胞計的應用中,熒光色素是關鍵試劑,免疫熒光的檢測,對試劑的要求尤其具有特殊性。對熒光染料的要求1、染料必須在理想的激光光源的某一波長有強烈吸收;2、由于免疫熒光測定,信號的強度是主要限制因素,故要求染料應有較高的量子效應3、激發光和發射光之間要有較大的波長區別,以便使熒光能與激發光源所造成的背景區別開來4、便于同抗體和其他蛋白偶聯,又不影響其熒光及抗體的特異性。熒光染料常見者見表。其中FITC已為國內免疫界通用,此外不做介紹。當前國內常用的商品化的染料類是藻膽蛋白(Ohy
液相色譜柱的使用要求2016/08/03
ELISA試劑盒液相色譜柱是一種常用的色譜柱產品,產品具有使用靈活、性能穩定、操作簡等優點。使用液相色譜柱時是有一定的要求的。填充劑的要求zui常用的色譜柱填充劑為化學鍵合硅膠。反相色譜系統使用非極性填充劑,以十八烷基硅烷鍵合硅膠zui為常用,辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠(如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等)也有使用。正相色譜系統使用極性填充劑,常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統使用離子交換填充劑;分子排阻色譜系統使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑;對映異構體的分離通常使用手性填充劑。
細胞培養基開創的新時代2016/08/01
ELISA試劑盒細胞培養基是人工模擬細胞在體內生長的營養環境,是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。培養液或培養基的含義幾乎相同,英文都是medium。當它是粉劑時,傾向性地稱為培養基,而將粉劑配成液體后,多稱為培養液。培養液中常常補加血清、抗生素等成分。培養基主要包括天然細胞培養基、合成細胞培養基和無血清細胞培養基等。天然細胞培養基是人們早期采用的細胞培養基,直接取自于動物組織提取液或體液,如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營養價值高,但成分復雜,差異大、不穩定,來源也受到限制。水
人肝癌細胞簡單引見2016/07/29
ELISA試劑盒人肝癌細胞的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、分離珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇分離蛋白;表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體;該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A復原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。ELISA試劑盒1.人肝癌細胞協和細胞資源中心為科學研討提供實驗細胞技術效勞。所
ELISA試劑盒即免疫吸附劑2016/07/27
ELISA試劑盒今日我們就談ELISA試劑盒中陰性本底的構成因素。酶聯固相免疫試驗中,尤其在簡介ELISA試劑盒法中,經常會碰到陰性本底的疑問。主要是本底過高和不一樣標本的本底值區別較大。本底或稱布景,是ELISA試劑盒中的非特異性顯色。底物未通過酶效果而呈現的色彩稱為空白。底物液如不妥會呈現一定的空白值。這個空白值只需不太高(A<0.05),可從個測定值中減除,并不影響試驗成果。這兒研討的是不含待測抗原或抗體的陰性標本在ELISA試劑盒中呈現的本底。從理論上講,只有陽性標本終究才干引出顯色反響
T細胞研討獲新進展2016/07/25
ELISA試劑盒這一過程的生理學相關經過搬運抗原特定野生型或CCR4缺點CD4+T細胞被展現出來,而這些CD4+T細胞則是被來自被流感病毒傳染的小鼠的不一樣安排位點的DC所激活的。與接收了被肺DC激活的CCR4-缺點T細胞的小鼠,或接收了被并非來自肺的DC激活的野生型T細胞的小鼠對比,接收了被肺DC激活的野生型T細胞的小鼠體現出了體重的削減以及更迅速地鏟除它們的傳染。因而,DC調理的T細胞銘記歸巢到肺關于驅動對于氣道中的病原體的更有用的免疫呼應是至關重要的。效應物和回憶T細胞體現出了交換回它們z
ELISA試劑盒檢查辦法2016/07/22
ELISA試劑盒檢查辦法簡述:1)間接法測抗體:將特異性抗原包被在固相載體上,構成固相抗原,參加待檢標本(含相應抗體),其間抗體與固相抗原構成抗原-抗體復合物,再參加酶符號的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體,亦稱二抗),與上述抗原-抗體復合物。此刻參加底物,復合物上的酶則催化底物而顯色。雙抗體夾心法測抗原:將已知的特異性抗體包被在固相載體上,構成固相抗體,參加待檢標本(含相應抗原),抗原與固相抗體成復合物,再參加特異性酶標抗體,使之與已構成的抗原-抗體復合物,當參加與酶相應的底物時,酶催化底而顯色,依
大腸桿菌與操縱子學說2016/07/20
ELISA試劑盒法國科學家莫諾(J·L·Monod,1910-1976)與雅可布(F·Jacob)宣布“蛋白質構成中的遺傳調節機制”一文,提出操縱子學說,開創了基因調控的研討。四年后的1965年,莫諾與雅可布即榮獲諾貝爾生理學與醫學獎。莫諾與雅可布開始發現的是大腸桿菌的乳糖操縱子。這是一個非常奇妙的主動控制系統,這個主動控制系統擔任調控大腸桿菌的乳糖代謝。乳糖可作為培育大腸桿菌的動力。大腸桿菌能發生一種酶(叫做“半乳糖苷酶”),能夠催化乳糖分化為半乳糖和葡萄糖,以便作進一步的代謝使用。編碼半乳糖
細致引見細胞培育基2016/07/18
ELISA試劑盒細胞培育基是人工模仿細胞在體內生長的營養環境,是供應細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。培育液或培育基的意義幾乎相同,英文都是medium。當它是粉劑時,傾向性地稱為培育基,而將粉劑配成液體后,多稱為培育液。培育液中常常補加血清、抗生素等成分。培育基首要包含自然細胞培育基、組成細胞培育基和無血清細胞培育基等。自然細胞培育基是大家早期采用的細胞培育基,直接取自于動物布置提取液或體液,如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營養價值高,但成分雜亂,區別大、不安穩,來歷也遭到限制。水
ELISA試劑原位雜交防止污染2016/07/13
ELISA試劑盒防止污染:由于在手指皮膚及實驗室用玻璃器皿上均可能含有RNA酶,為防止其污染影響實驗結果,在整個雜交前處理過程中都需要戴消毒手套,實驗所用玻璃器皿及鑷子都應于實驗前一日置高溫烘烤(180℃)以達到消除RNA酶的目的。雜交前及雜交時所用的溶液均需經高壓消毒處理。雙鏈DNA探針和靶DNA的變性:雜交反應進行時,探針和靶核酸都必須是單鏈的。如果用雙鏈DNA探針進行雜交(包括檢測RNA時),雙鏈DNA探針在雜交前必須進行變性。探針變性后要立即進行雜交反應,不然解鏈的探針又會重新復性。雜交
ELISA常用方法優勢劣勢對比2016/07/11
一、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。ELISA試劑盒優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。劣勢:試驗中的一抗都得用酶標記,但不是每種抗體都適合做標記,費用相對提高。二、間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標記,改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。優勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應性。劣勢:交互反應發生的機率較高。
elisa試劑盒實驗條件的選擇2016/07/08
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到*科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測。在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質可作為固相載
ELISA原理實驗條件和技術要點2016/07/06
ELISA原理實驗條件和技術要點在應用ELISA時,首先要清楚下面內容:1,是檢測抗體還是抗原?2,檢測的結果是定性還是定量?3,是否需要檢測特異抗體的類型?4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?(1)檢測抗原zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,其次是競爭法。但競爭法在具體實驗中有些困難,特別是檢測微生物的抗原,因為需要標記抗原,這對于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競爭法中,酶標記的抗原與標本直接混合在一起,許多標本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質,可影響ELISA的結
細胞感染方法2016/07/01
(一)細胞準備將狀態良好的目的細胞接種到24孔板,使細胞濃度為1×105/ml細胞,接種細胞數量因細胞的生長速度而略有不同,一般是保證第二天進行病毒感染的時候細胞匯合率介于50%至70%之間。ELISA試劑盒(二)病毒感染1.感染細胞*佳MOI的測定MOI(MultiplicityofInfection,感染復數)是指每個細胞感染的病毒數,通常MOI越高,病毒整合到染色體的數量以及目的蛋白的表達量越高。對于分裂活躍的細胞,比如Hela、293細胞,MOI=1~3時,80%以上的細胞均表達目的基因
流式細胞術的發展2016/06/29
ELISA試劑盒流式細胞術(FlowCytometry,簡稱FCM)是對細胞貨細胞器快讀測量的高技術。依賴測量的參數,還可以用物理的方法將一個群體中的亞群分選出來,這就是流式細胞分選術。上述的“流式”,指的是在測量過程中細胞是流動的,不是靜止的,這是與在此前對細胞測量技術的zui大差異之處。流式細胞書目前在國外的一些有關實驗室、醫院已發展成常規技術,在我國經過十年的推廣也逐漸普及。經過數十年的努力,流式細胞術從一個只能計數,稍后可測粒子大小的一起,發展到今天可快速測定同一個細胞的多種化學和物理的
細胞共性的原理2016/06/27
ELISA試劑盒細胞并沒有統一的定義,比較普遍的提法是:細胞是生物體基本的結構和功能單位。已知除病毒之外的所有生物均由細胞所組成,但病毒生命活動也必須在細胞中才能體現。細胞體形極微,在顯微鏡下始能窺見,形狀多種多樣。主要由細胞核與細胞質構成,表面有細胞膜。高等植物細胞膜外有細胞壁,細胞質中常有質體,體內有葉綠體和液泡,還有線粒體。動物細胞無細胞壁,細胞質中常有中心體,而高等植物細胞中則無。細胞有運動、營養和繁殖等機能。一般來說,細菌等絕大部分微生物以及原生動物由一個細胞組成,即單細胞生物,高等植
抗菌肽對痤瘡具有抗菌活性2016/06/24
ELISA試劑盒抗菌肽是生物體內經誘導產生的一種具有生物活性的小分子多肽,分子量在2000~7000左右,由20~60個氨基酸殘基組成。這類活性多肽多數具有強堿性、熱穩定性以及廣譜抗菌等特點。抗菌肽的來源分類可將其分為6類:昆蟲抗菌肽,哺乳動物抗菌肽,兩棲動物抗菌肽,魚類、軟體動物、甲殼類動物來源的抗菌肽,植物抗菌肽,細菌抗菌肽??咕木哂胁灰讓е挛⑸锬退?、殺菌時間快、不誘發微生物產生內毒素且可以中和內毒素因而不導致膿毒癥的產生(傳統抗生素可誘發膿毒癥)等優點。所以抗菌肽作為新型抗感染候選藥物
解析凋亡細胞的吞噬降解過程2016/06/22
ELISA試劑盒研究組主要的研究方向是運用特異的正向遺傳學及反向遺傳學篩選手段尋找參與凋亡細胞清除過程的新基因,并對所鑒定的相關基因展開凋亡細胞吞噬,降解過程調節機制的研究,包括凋亡細胞信號的展示,識別,凋亡細胞的吞噬和降解。來自生命科學研究所NIBS的研究人員報道了線蟲RAB-2,RAB-7和RAB-14在凋亡細胞降解過程中的順序作用,解析了吞噬小體的形成和成熟以及凋亡細胞的降解過程。在細胞凋亡后,凋亡細胞會被臨近細胞或專門的吞噬細胞識別并吞噬降解。目前,關于已被吞噬的凋亡細胞如何被降解的分子
藥物敏感試驗方法2016/06/20
藥物敏感試驗簡稱藥敏試驗(或耐藥試驗)。旨在了解病原微生物對各種抗生素的敏感(或耐受)程度,以指導臨床合理選用抗生素藥物的微生物學試驗。目前濫用抗生素,致使抗藥菌增加,甚至因長期大量使用廣譜抗生素,殺傷體內正常微生物,失去微生物的相互制約作用,從而使一些少見的或一般情況下的非致病菌大量繁殖,引起所謂“二次感染”的情況屢有發生,給治療造成人為的困難。因此,提倡使用藥敏試驗,堅持合理用藥十分重要。目前常用的藥敏試驗方法有:1.從瓊脂平板挑取形態相似的純培養菌落接種肉湯培養基,并于35度培養至濁度達到
厭氧菌的培養方法2016/06/17
ELISA試劑盒厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養厭氧菌,必須創造一個無氧的環境。通常用培養基中加入還原劑,或用物理、化學方法去除環境中的游離氧,以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基,牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多,可根據實際情況選用。1.厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管,可放入厭氧缸內培養,厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境,從而將厭氧菌培養出來。2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內
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