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試劑盒常用方法優勢劣勢2015/07/06
一、直接法:ELISA試劑盒將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。劣勢:試驗中的一抗都得用酶標記,但不是每種抗體都適合做標記,費用相對提高。二、ELISA試劑盒間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標記,改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。優勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應性。ELISA試劑
培養基配制按物理狀態分2015/07/03
1.固體培養基ELISA試劑盒在液體培養基中加入凝固劑即為固體培養基。實驗用的凝固劑有瓊脂、明膠和硅膠,后者用于配制自養微生物的固體培養基。對其他多數微生物來講,以瓊脂zui為合適,一般加入1.5―2.5%即可凝固成固體。此培養基可供分離、鑒定、活菌計數、菌種保藏等用。2.半固體培養基ELISA試劑盒在液體培養基中加入少量凝固劑即為半固體培養基,例如瓊脂只需加入0.2―0.7%。常用作細菌動力檢查和菌種保存、噬菌體制劑的制備等。3.液體培養基ELISA試劑盒沒有加瓊脂,配好后成液體狀態的培養基。
干式化學穩定基質技術2015/07/01
ELISA試劑盒采用干式化學穩定基質(包括高分子基質)也可以保存核酸。FTA(FlindersTechnologyAssociates)濾紙保存是其中的一種方式。FTA濾紙是一種多孔的纖維素基質,經由尿酸、非離子表面活性劑或強力變性劑以及螯合劑浸泡處理。當樣品加到濾紙上時,細胞被裂解,核酸被釋放出來,吸附在濾紙上。濾紙上的化學物質可使蛋白變性,酶活性喪失。載有核酸的FTA濾紙經干燥,可以常溫保存核酸長達數年。目前FTA濾紙只可用于常溫保存DNA。還有其它形式的干式保存基質。它們由配方的、不同的化
放射治療黑色素細胞瘤2015/06/29
ELISA試劑盒放射治療:放射治療:除了某些極早期的雀斑型惡性黑色素瘤對放射治療有效外,對其他的原發灶一般療效不佳。因此對原發灶一般不采用放射治療,而對轉移性病灶用放射治療。目前常用放射劑量為:對淺表淋巴結、軟組織及胸腔、腹腔、盆腔內的轉移灶,每次照射量≥500cCy,每周2次,總量2000~4000cCy,對骨轉移灶每次200~400cCy,總量3000cCy以上。ELISA試劑盒DCE雞胚成纖維細胞DogL1狗肺成纖維樣細胞DQSHS1迪慶綿羊皮膚成纖維樣細胞EC-304人血管內皮細胞F81
高低溫試驗箱自整定功能2015/06/24
ELISA試劑盒如果溫度控制過程中,出現較大的溫度過沖,或較大的溫度波動時,請按下列操作啟動自整定功能a.關閉電源開關,打開箱門,使設備自然冷卻至環境溫度;b.關閉箱門,打開電源開關,將溫度設至為常用溫度值;c.ELISA試劑盒按照控制參數調整方法,將自整定參數調整為1;d.在正常工作狀態下,按住減鍵5秒鐘,即進入自整定狀態,此時PV顯示屏顯示ATU,并閃爍;e.自整定結束后,儀表自動恢復到正常工作狀態。f.ELISA試劑盒在自整定狀態下,按任何鍵均無效。游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒,英
實驗室安全細則2015/06/19
電1.連線:ELISA試劑盒儀器連線必須使用帶有接地的三根線的護套線,不可使用普通的塑料絞線。嚴禁私拉亂扯。2.接地:儀器應有良好的接地,提高儀器的穩定性及安全系數。3.維修:維修儀器時必須切斷電源,方可拆機修理。4.ELISA試劑盒墻電:需要對墻電進行維修、改造時,必須由持有市供電局和勞動局核發的電工證的人員進行操作。5.檢查:如遇線路老化或損壞應及時地更換。6.觸電:斷電或絕緣脫離-急救。水上水:水或水管漏水時,應及時地修理。下水:下水道排水不暢時,應及時地疏通。冷卻水:輸水管必須使用橡膠管
試劑盒染色過程2015/06/17
ELISA試劑盒染色過程是:①將已入蒸餾水后的切片放入蘇木精水溶液中染色數分鐘。②酸水及氨水中分色,各數秒鐘。ELISA試劑盒③流水沖洗1小時后入蒸餾水片刻。④入70%和90%酒精中脫水各10分鐘。⑤入酒精伊紅染色液染色2—3分鐘。6、脫水透明:染色后的切片經純酒精脫水,再經二甲苯使切片透明。7.ELISA試劑盒封固:將已透明的切片滴上加拿大樹膠,蓋上蓋玻片封固。待樹膠略干后,貼上標箋,切片標本就可使用。四硫磺酸鈉亮綠增菌液基礎(TTB)23040250g用于沙門氏菌選擇性增菌培養
ELISA重復性較差的有哪些原因2015/06/16
ELISA試劑盒重復性較差,可能的問題有:1、保溫時間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致;重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。2、樣品數量多少不一,加樣時間有長有短;ELISA試劑盒所以重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。3、ELISA試劑盒加樣量不一致;樣品稀釋前應充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。AMIGO2粘附分子IgG樣結構域蛋白2抗體Advillin肌動蛋白結合蛋白DOC6抗體AFG3L2AFG3樣蛋白2/脊髓小腦
ELISA檢測試劑盒的復雜過程2015/06/15
研究經驗指出ELISA檢測試劑盒可以用來檢測血清樣本,看有還是沒有某個抗原或抗體,也可以看該抗原或抗體是多還是少,可以比較不同血清樣本之間該抗原/抗體的含量高低。如果該抗原是一個病原,或該抗體是一個對某病原具有特異性的抗體,則ELISA檢測試劑盒該抗原或該抗體的結果,可以用來幫助判斷,提供血清的個體,是否感染或曾經感染過這個病原。ELISA檢測試劑盒測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所
ELISA試劑盒檢測樣本的方法2015/06/12
由于各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標記的ELISA試劑盒測定中,會導致非特異性顯色,干擾測定結果。標本受細菌污染:因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。標本保存不當:在冰箱中保存過久的標本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、甚至造成檢測OD值偏高;標本凝集不全;在ELISA試劑盒檢測中影響血
人ELISA試劑盒的操作技巧2015/06/11
掌握了實驗技巧之后,人ELISA試劑盒實驗入門新手學起來都會快的多。本篇文章中的小竅門包含了要求、方法等技術,為大家整理出了這些個人ELISA試劑盒小竅門:1.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。3.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。4.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。6.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板
elisa試劑盒實驗之比色2015/06/10
ELISA試劑盒比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗,需先將板置于標準96孔的座架中,才可進行比色。在加底物液顯色前,先將軟板邊緣剪凈,這樣,此板就可*平妥坐入座架中。ELISA試劑盒比色時應先以蒸餾水校零點,測讀底物孔(未經任何反應僅加底物液的孔)和空白孔(以生理鹽水或稀釋液代替標本作全過程的孔),以記錄本次試驗的試劑狀況。其后可用空白孔以蒸餾水校零點,以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度,然后進行計算。ELISA試劑盒比色結果的
競爭抑制ELISA方法的檢測建立2015/06/09
一、抗體的酶標記及質量鑒定ELISA試劑盒本試驗采用改良過碘酸鈉法將辣根過氧化物酶標記在抗體上[1],標記完后取上清用SephedexG200凝膠層析進行純化,洗脫液為0.2mol/LpH7.4的PBS,流速為15ml/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度計測A280吸光度值,以洗脫體積為橫坐標,吸光值為縱坐標做圖,收集*峰即為酶標抗體峰。標記完后用紫外分光光度計在分別在280nm、及403nm處測定酶標記物的A值,計算免疫球蛋白量、摩爾比值、酶結合率以及標記率。二、包被用緩沖液及zui適包
試劑盒的應用領域2015/06/08
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到*科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。ELISA試劑盒不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學
ELISA(雙抗體夾心法)檢測HBsAg2015/06/05
方法1、ELISA試劑盒加入待測標本每孔0.05ml,并設HBsAg陽性對照2孔,HBsAg陰性對照2孔,空白對照1孔,然后加入酶結合物每孔1滴(0.05ml、空白對照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。2、洗板:棄去反應條孔內液體、拍干、用洗滌液注滿每孔,棄去拍干,反復五次后拍干。3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。結果ELISA試劑盒比色法:波長450nm,先用
解析Elisa間接法提高陽性值的辦法2015/06/04
ELISA試劑盒先要確定兩種酶標二抗使用的是不是同一批包被的板,因為雖然是相同的抗原,可能兩次包被不一樣。如果是同一批板,出現這種情況只能說明你的酶標二抗失活了,買新的二抗,按說明書上的稀釋倍數稀釋;陰性對照有顏色很可能是沒封閉好。陽性值是由你的抗原抗體間親和力決定的,增加抗原抗體用量,或提高二抗濃度,但靈敏度可能會降低,你可以重新摸下工作濃度;ELISA試劑盒陰性值降低,你可以采用BSA封閉2小時看看,好像沒聽說有人用FCS封閉的,你可以嘗試采用其他的封閉液,據我了解,用BSA封閉不是很好,可
ELISA的檢測結果2015/06/03
ELISA試劑盒測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規方法采集,
生物試劑的分類2015/06/02
ELISA試劑盒生物試劑涉及到化學試劑分類。我國的試劑規格基本上按純度(雜質含量的多少)劃分,共有高純、光譜純、基準、分光純、優級純、分析和化學純等7種。國家和主管部門頒布質量指標的主要優級純、分級純和化學純3種。(1)優級純(GR:Guaranteedreagent),又稱一級品或保證試劑,99.8%,這種試劑純度zui高,雜質含量zui低,適合于重要精密的分析工作和科學研究工作,使用綠色瓶簽。(2)分析純(AR),又稱二級試劑,純度很高,99.7%,略次于優級純,適合于重要分析及一般研究工作
分析Elisa洗滌2015/06/01
ELISA試劑盒洗滌步驟可降低未結合抗體所引起的背景信號,從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結合事件被保留,在zui后一步產生信號。而不充分的洗滌會導致差異和高背景,從而帶來不理想的結果。本文將為你介紹一些利用自動洗板機來洗滌Elisa平板的技巧。第二個影響洗滌效果的主要參數是洗滌循環的量。當然,洗滌次數越多,背景越低。然而,太多次的洗滌會降低信號強度,使其難以測定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復洗滌三次。不過,Elisa板的商會對洗滌次數提出建議。ELISA試劑盒一般
Elisa代測樣本運輸指導2015/05/08
血液樣本的收集:全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。ELISA試劑盒同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。①不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。②抗凝收集血漿:收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。ELISA試劑盒根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。生化實驗一般
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