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細菌的純種分離培養和接種技術2021/11/09

培養基的制備原理培養基是人工地將多種物質按各種微生物生長的需要配置而成的一種混和營養基質，用以培養或分離各種微生物。因此，營養基質應當有微生物所能利用的營養成分（包括碳源、氮源、能源、無機鹽、生長因素）和水。根據微生物的種類和實驗目的不同，培養基也有不同的種類和配制方法。操作步驟1、計算稱量根據配方，計算出實驗中各種藥品所需要的量，然后分別稱(量)取。2、溶解一船情況下，幾種藥品可一起倒入燒杯內、先加入少于所需要的總體積水進行加熱溶解。加熱溶解時，要不斷攪拌。如有瓊脂在內，更應注意。待*溶解后，

重組細胞因子分類及應用說明2021/11/08

一、細胞因子的概念細胞因子(cytokine)是由機體多種細胞分泌的小分子蛋白質，通過結合細胞表面的相應受體發揮以調節免疫應答為主的生物學作用。細胞因子具有非常廣泛的生物學活性，包括促進靶細胞的增殖和分化，增強抗感染和細胞殺傷效應，促進或抑制其它細胞因子和膜表面分子的表達，促進炎癥過程，影響細胞代謝等。二、細胞因子的命名細胞因子按其來源可分為：由單個核吞噬細胞產生的細胞因子稱為單核因子(monokine)；由淋巴細胞產生的細胞因子稱為淋巴因子(lymphokine)等。按其作用可分為干擾素、集落

如何促進細胞貼壁你知道嗎2021/11/08

1.適度消化細胞：HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理5-6min，C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落，2min足矣，P19Cl6和293細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養基打散。2.hao用塑料瓶培養，如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾膠原包被一下培養瓶，或者用鹽酸對培養瓶進行蝕刻，或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA，也可以幫助細胞貼附新的培養瓶，細胞不易貼壁，建議加多聚賴氨酸處理。3

支原體污染對細胞培養的危害！2021/11/08

1.支原體污染的普遍性支原體污染是細胞培養領域遇到的性問題，據文獻報道，綜合美國食品藥品監督管理局（FDA）、美國模式菌種收集中心(ATCC)等機構收到的相關數據，世界各國細胞系支原體污染的平均比例為30-60%。該數據未統計中國大陸的數據，但可以確定，大陸地區的支原體污染比例與此相當，或更嚴重。2.支原體污染的危害根據已發表的支原體污染研究文獻，支原體污染細胞后，幾乎能影響每一個細胞參數。1）支原體污染可能導致細胞染色體的異常和損傷，改變細胞的代謝、生長、形狀、附著。2）支原體影響被污染細胞的

為啥你的細胞長得慢？細胞生長緩慢原因2021/11/08

細胞生長緩慢的常見原因:(1)培養基可能缺乏細胞生長所需的某種因子。通常情況下，當小伙伴購買細胞，并沒有按照ATCC或國內細胞庫推薦的方法制備培養基，使用實驗室兄弟姐妹使用的培養基來培養細胞。解決方法一般是按照推薦的方法制備培養基，或直接購買培養細胞的培養基。(B)細菌、支原體、真菌等污染:雖然培養基中通常添加雙抗體(青霉素和鏈霉素)，但如果無菌操作觀念不強，仍有可能造成污染。處理方法:如果有冷凍細胞，可以丟棄污染細胞。當然，丟棄并不是隨意的，扔進垃圾桶。應按照實驗室生物安全規定進行。然后復蘇培

貼壁細胞和懸浮細胞免疫熒光染色方法2021/11/05

貼壁細胞和懸浮細胞免疫熒光染色方法步驟（以間接免疫熒光法為例）1細胞準備與固定（1）單層生長細胞：取對數生長細胞，用0.25％胰蛋白酶消化，制成單細胞懸液。將細胞接種到預先放置幾張6×22mm蓋玻片的培養瓶或培養皿中，置二氧化碳培養箱培養1-3天，待細胞接近長成單層，取出蓋玻片，進入PBS（0.01mol/L,pH7.4）洗2次，然后根據實驗目的，選擇適當固定劑固定細胞。常用固定劑有：95％乙醇（固定時間10-30min），丙酮（5－10min）等。（2)懸浮生長細胞：取對數生長細胞，用PBS離

秦皮中七葉苷、七葉內酯的提取、分離和鑒定2021/11/05

秦皮為本樨科白蠟樹屬植物白蠟樹（FraxinusChinensisPoxb）或苦瀝白蠟樹（F.rhynchophyllaHance）或小葉白蠟樹（F.bungeanaDC）的樹皮,味苦，性微寒。具有清熱、燥濕、收澀作用。主治溫熱痢疾、目赤腫瘤等癥。秦皮中含有多種內酯類成分及皂苷、鞣質等，其中主要有七葉苷、七葉內酯、秦皮苷及秦皮素等。多有抗菌消炎的生理活性，七葉內酯對細菌性痢疾、急性腸炎有較好治療效果，兼有退熱作用，毒付作用小，幾無苦味。適于小兒服用。秦皮中主要成分的結構及性質1．七葉苷（escu

PBS和D-PBS緩沖溶液怎么配制？2021/11/05

磷酸鹽緩沖液(簡稱PBS)的是生物化學中常用的一種阻礙溶液pH變化的緩沖溶液，這種由鹽溶液中含有氯化鈉，磷酸鹽，磷酸鹽，lv化鉀和磷酸鉀組成。組份濃度：137mM氯化鈉，2.7mMlv化鉀，10mM磷酸二氫鈉，2mM磷酸2氫鉀。本文總結了PBS和D-PBS溶液的配制方法。1.常規PBS磷酸鹽緩沖液組成成份：磷酸2氫鉀34g1mol/L氫氧化鈉溶液175ml蒸餾水825mlPH7.2配制：先將磷酸鹽溶解于500mL蒸餾水中，用1mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后，再用蒸餾水稀釋至1000mL。稀釋液

葡聚糖凝膠層析操作步驟，了解下！2021/11/05

1.凝膠的預處理交聯葡聚糖凝膠的市售商品多為干燥顆粒，使用前必須充分溶脹。方法是將欲使用的干凝膠緩慢地傾倒入5～10倍的去離子水中，參照相關資料中凝膠溶脹所需時間，進行充分浸泡，然后用傾倒法除去表面懸浮的小顆粒，并減壓抽氣排除凝膠懸液中的氣泡，準備裝柱。在許多情況下，也可采用加熱煮沸方法進行凝膠溶脹，此法不僅能加快溶脹速率，而且能除去凝膠中污染的細菌，同時排除氣泡。2.裝柱層析柱的選擇一般根據分離樣品的種類和樣品的數量而定。純化蛋白質時，柱床體積應為樣品體積的25～100倍。去除鹽及游離熒光素約

微生物實驗室的培養基類型2021/11/04

在實驗室中配制的適合微生物生長繁殖或累積代謝產物的任何營養基質，都叫做培養基(Media)。由于各類微生物對營養的要求不同，培養目的和檢測需要不同，因而培養基的種類很多。我們可根據某種標準，將種類繁多的培養基劃分為若干類型。1、根據對培養基組成物質的化學成分是否*了解來區分，可以將培養基分為天然培養基、合成培養基和半合成培養基。１）天然培養基天然培養基是指利用各種動、植物或微生物的原料，其成分難以確切知道。用作這種培養基的主要原料有：牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯

細胞培養基的種類與基本成分2021/11/04

細胞培養基是人工模擬細胞在體內生長的營養環境，是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。培養液或培養基的含義幾乎相同，英文都是medium。當它是粉劑時，傾向性地稱為培養基，而將粉劑配成液體后，多稱為培養液。培養液中常常補加血清、抗生素等成分。由于各類微生物對營養的要求不同，培養目的和檢測需要不同，因而培養基的種類很多。我們可根據某種標準，將種類繁多的培養基劃分為若干類型。一、根據對培養基組成物質的化學成分是否*了解來區分，可以將培養基分為：天然培養基、合成培養基和半合成培養基。1、天然培養基

幾種細胞凋亡檢測方法比較2021/11/04

細胞凋亡與壞死是兩種*不同的細胞凋亡形式，根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別，可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多，下面介紹幾種常用的測定方法。第一種細胞凋亡的形態學檢測根據凋亡細胞固有的形態特征，人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。1光學顯微鏡和倒置顯微鏡（1）未染色細胞：凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現發泡現象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。（2）染色細胞：常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化，核膜裂

實時熒光定量PCR技術原理和方法介紹2021/11/04

實時熒光定量PCR（RealtimePCR）是在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號累積實現了實時監測整個PCR進程，并對起始模板進行定量分析的方法。其涉及領域包括：臨床疾病診斷、動物檢驗檢疫、食品安全和科學研究等。在xin型guan狀病毒、肝炎、艾zi病、流感、登革熱、感染性腹瀉等的檢測、診斷和治療上發揮著重要作用。實時熒光定量PCR法可分別為SYBRGreenl熒光染料法和Taqman探針法。日常進行核酸檢測就是運用Taqman探針法，新guan病毒核酸檢測也是利用此項技術。該法高度特

血清的這些小秘密你知道嗎2021/11/03

牛血清是細胞培養中用量大的天然培養基，含有豐富的細胞生長必須的營養成份，常用于動物細胞的體外培養，具有極為重要的功能。一、血清的成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。二、血清的功能1.提供對維持細胞指數生長的激素，基礎培養基中沒有或量很少

動物血清的質量問題解答！2021/11/03

在細胞培養實驗中，血清通常作為基礎生長培養基的添加劑。而在實驗過程中是否選擇添加血清，主要根據基礎培養基化學成分，培養細胞的類型和培養體系而定。血清的質量大大的影響到實驗效果，不少客戶在購買時做出疑問：動物血清以何種條件做到質量保證的？一、血清的采集在生產過程中，全血使用無菌一次性塑料袋收集，待凝結后分離，收集和冷凍儲存血清。控制初始收集是控制*終血清產品質量的關鍵因素。只有初始原料符合我們的規范時才能允許生產。二、產品原料的選擇在全球市場存在兩個胎牛血清標準：美國農業部標準（USDA）和歐洲標

微生物細胞、植物細胞與動物細胞在培養上的區別2021/11/03

微生物細胞培養，簡稱微生物培養，包括原核細胞培養（細菌培養）和真核細胞培養（霉菌培養和酵母培養）。這些細胞小、且具有細胞壁，細胞周期非常短，如細菌每20-30min增殖1次。植物細胞培養指原生質體培養。未考慮分離出原生質體的植物細胞培養，無論是游離的單細胞或組織塊，都稱作植物組織培養。動物組織細胞培養包括接種單細胞懸液進行的培養、接種組織塊進行的培養。傳代細胞如細胞株、細胞系，通常采用接種單細胞懸液進行的培養，是動物細胞培養常見的方式。原代細胞是指來源于動物組織的細胞團塊，往往包含多種細胞類型，

培養基制備的操作要點合集2021/11/03

制作培養基真真是微生物實驗室的家常便飯，培養基配成后一般需測試并調節pH，還須進行滅菌，培養基由于富含營養物質，易被污染或變質，配制過程中有多個注意事項和操作要點需要我們掌握，接下來就一起看看吧。首先，什么是培養基?培養基，是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的，由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質，也是細胞生長和繁殖的生存環境。其次，培養基的種類。培養基種類很

改善RNA提取質量的十個要點！2021/11/02

RNAse的無處不在導致了RNA的脆弱敏感。要改善RNA提取的質量，遠慕為你介紹在RNA純化過程中要特別注意的10個問題。在收獲組織及細胞死亡之后，應立即滅活內源的RNA酶，以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內源RNA酶失活：1）用含離液（如胍鹽）的細胞裂解液收獲樣品，并立即勻漿。2）用液氮瞬間凍結樣品。值得特別注意的是：組織塊必須保證足夠小，在浸入液氮的瞬間就能凍結，以確保瞬間令RNA酶失活3）立即將樣品置于RNAlater?TissueCollection:RNAStabilizati

微生物學檢驗實驗室的規則及注意事項2021/11/02

一、微生物學及微生物學檢驗實驗室的規則在進行微生物學實驗時，須時刻牢記實驗的對象是病原微生物，任何疏忽都可能導致嚴重的后果，不僅自身有可能招致感染，且有可能將病原微生物傳給他人。因此決不能有絲毫僥幸心理，冒任何不必要的危險。進入實驗室時必須遵守下列規則。1.進實驗室時必須穿白大衣﹒離室時脫下反折，白大衣要經常清洗消毒。2.每次實驗后均要用肥皂洗手，必要時用消du藥水泡手。3.書包、衣物等勿帶入實驗室，必要的文具、實驗指導、筆記等帶入后，放在zhi定的地方。4.每次實驗后均用消du藥水擦洗工作臺面

植物DNA提取中的常見問題解答2021/11/02

提取植物DNA時遇到多糖成分的干擾，DNA質量一直不高，如何消除多糖的影響？參考見解：一般來說，SDS法提取的DNA會還有較多的多糖，使DNA成膠凍狀。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比較高，可用以下方法試一試：1、在DNA未溶出之前，先用一些緩沖液洗去多糖。如可用緩沖液：100mmol/LTris-HCl(pH=8.0)、5mmol/LEDTA和0.35mol/LSorbitol洗幾次。2、使DNA提取液中的多糖先沉淀。在提取液中加入0.35倍體積的無水乙醇，迅速混勻