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證明轉化細胞具有異種嵌合的能力的方法2018/03/06
轉化細胞具有多潛能的分化能力,能夠在體內、體外分化成不同類型的細胞、組織甚至器官。通過干細胞的異種嵌合技術在豬等大動物體內實現異種再造器官。然而,人類胚胎干細胞在異種體內分化潛能尚不*清楚,細胞存活、分化識別、發育時程等關鍵問題仍未解決,依然存在嚴重的技術壁壘。近日,中國科學院動物研究所胡寶洋、李偉、周琪研究組合作,通過在Primed狀態人類胚胎干細胞中過表達抗凋亡基因BCL2及BCL2L1,并在小鼠四細胞發育時期進行胚胎注射,獲得了Primed狀態人胚胎干細胞嵌合的人-鼠異種嵌合小鼠胚胎,并證
轉化細胞特異性抗癌免疫力2018/02/24
轉化細胞早前的研究使用胚胎干細胞作為疫苗,這帶來了倫理問題和可行性限制,這些細胞在遺傳上與患者有差異,因此可能無法提供相匹配的癌癥抗原。然而,這項新研究使用的是誘導多能干細胞,避開了這些問題。研究人員的zui終目標是從患者體內分離血液或皮膚細胞,并創建誘導多能干細胞,通過輻射使生成的誘導多能干細胞自身不能形成腫瘤,再將其回輸至癌癥患者體內。為了探索這些概念的可行性,研究人員從試驗出發,他們確定小鼠及人類誘導多能干細胞與癌細胞具有相似的基因表達譜。該研究團隊將小鼠成纖維細胞發展而來的誘導多能干細胞
轉化細胞分裂的生物化學計時器2018/02/10
轉化細胞這項研究除了對解釋細胞分裂這一基本生命現象有重要意義,在治療癌癥方面也有很大潛力。*,癌細胞能夠快速分裂,使腫瘤迅速成長,并有轉移的風險。而且快速分裂還是癌細胞產生耐藥性的基礎之一,同時也會擠占正常細胞的養分。人類已經有了一些針對微管的抗癌藥物,例如紫杉醇。可惜,紫杉醇等藥物毒性較大,有很多副作用。現在,科學家知道了細胞分裂計時器的工作原理,就能夠以此為靶點,尋找新的抗癌藥物。比如,摳掉這個計時器的“停止鍵”,使計時器保持“開”的狀態,讓癌細胞分裂處于停滯狀態,zui終導致癌細胞死亡。由
轉化細胞分選速度快2018/02/08
1.少量轉化細胞分選時,流式細胞分選度高(99%以上),速度快。目前,*流式細胞儀的分選速度可達25000個細胞/秒以上,比傳統的分選速度提高了很多倍,原來需要一天的工作現在只需要幾小時就能完成。不過流式細胞儀分離細胞的量還是有一定的限制,一次分離的zui大合理量約為108個細胞。如果細胞量超過109個,則需要耗費10小時以上,分選后細胞的活力會受到很大的影響。2.可以同時進行多個Marker分選,正選負選同時進行。以前的流式細胞儀只能給液滴充上正電荷或負電荷,因此在電場中只能向左或向右偏轉,即
干細胞分化的調控重要作用2018/02/06
干細胞維持與分化的調控對于動物抑或是對于植物的生長發育而言具有重要意義,一旦干細胞功能發生異常,植物和動物的生長和發育均會出現嚴重缺陷。然而,目前對于植物和動物干細胞調控的共同機制尚不清楚。先前研究有報道過氧化氫在動物干細胞分化的調控有著重要作用。該項研究表明,超氧根和過氧化氫作為新的信號調控植物干細胞的維持與分化。在植物莖頂端分生組織(SAM)中,超氧根主要在干細胞CZ富集,而過氧化氫主要在分化細胞PZ富集,這種分布模式依賴于一系列活性氧代謝基因在SAM中特異表達模式,研究發現絕大多數的超氧化
轉化細胞來源之謎!2018/02/01
所有的轉化細胞都是由骨髓中的造血干細胞分化而來的,此外,zui近一些研究發現血小板能夠由肺臟產生。隨著干細胞的分化,它們逐漸具備不同的功能,這種定向的分化需要受到不同類型的生長因子的調節。對于某些血液癌癥以及嚴重的疾病來說,骨髓移植能夠用于"新生"造血系統,進而對疾病進行治療。來說,它們會建立特定類型的循環系統來完成這一過程。雖然具體的結構五花八門,但還是存在一些相同的地方,例如循環系統的作用都是攜帶氧氣,介質均為液體形式。對于人類來說,這種液體介質被稱為"血液",泵血的機器被稱為"心臟",而攜
轉化細胞延長生存時間2018/01/30
腫瘤相關轉化細胞(tumor-associatedmacrophages,TAMs)是外周循環血液中的單核細胞在腫瘤來源的細胞因子和趨化因子作用下遷移到腫瘤微環境中增殖、分化形成的。研究發現,TAMs可以通過表達一些生長因子和細胞因子等來增強腫瘤細胞的浸潤轉移能力,并通過促進腫瘤血管淋巴管生成,抑制微環境免疫反應促進腫瘤的進展。由于TAMs在一些惡性腫瘤的發生和進展過程中具有重要作用,因此有望成為腫瘤治療的新靶點。雖然有研究表明TAMs在乳腺癌中具有促腫瘤作用,但在乳腺癌浸潤轉移中的機制尚不*明
轉化細胞培養物污染的源頭2018/01/25
轉化細胞培養物污染——培養物可被細菌、酵母、真菌、病毒、支原體、甚至其他細胞種類所污染。各種污染都會導致產生錯誤的結果。支原體污染——支原體污染在所有培養細胞中的比例為5-35%,它可改變細胞生長特性,酶的作用途徑,細胞膜的組成,染色體結構,以及轉染效率。特別是,支原體對采用脂質、DEAE-右旋糖酐、磷酸鈣或腺病毒介導的轉染技術有所干擾,其結果致使非典型轉染或轉染效率偏低。這些影響會導致實驗結果的不可靠以及時間和珍貴細胞系的損失。和細菌及真菌不同,支原體污染無法通過視覺檢查發現。它們非常小甚至能
人正常組織來源細胞因子的分類說明2018/01/23
1.人正常組織來源細胞白細胞介素就是我們常說的白介素,是由白細胞和其他類型的細胞而產生的,同時在細胞間刺激激活的細胞因子。2.細胞因子干擾素這個是人類發展歷*發現zui早的細胞因子了,他的命名是因為他具有干擾病毒感染和復制的能力。3.細胞腫瘤壞死因子作用機制是:能使腫瘤發生出血、壞死,同時在調節適應性免疫、殺傷靶細胞和誘導細胞凋亡等過程中發揮重要作用。4.細胞集落刺激因子這種因子是指能夠刺激生物體產生更多的造血干細胞,同時能刺激生物體的不同的發育階段的造血祖細胞的增值和分化。5.細胞生長因子它的
影響轉化細胞存活與否及狀態的因素2018/01/18
剛開始學習轉化細胞培養的朋友們,在傳代時總會遇到一些問題,例如:加胰酶1ml,與細胞充分接觸后棄去胰酶,放入37℃孵育2min,顯微鏡下觀察,總是周邊細胞先開始變圓、脫落,中間細胞總是消化較慢,后加培養液終止消化,吹打很多次鏡下看還是有不少細胞團,是消化不夠嗎?可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態好與不好zui至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發現自己的細胞不行了,狀態越來越差勁了。對于這個問題
干細胞具有多向分化潛能和自我復制能力2018/01/16
干細胞是一類具有多向分化潛能和自我復制能力的原始未分化細胞,是形成哺乳類動物的各組織器官的原始細胞。干細胞由于其自我出色的更新和分化潛能,應用廣泛且逐步產業化,應用范圍涉及醫學、美容等領域的各個方面。干細胞屬于新型生物醫藥技術,是一種先進療法,也是再生醫學的核心。隨著范圍內生物細胞技術和產業快速發展,"細胞治療及臨床轉化"成為我國"十三五"健康保障發展的重大課題。隨著干細胞研究和行業的規范,相關企業也將進入快速發展期。從統計數據來看,干細胞市場"錢"景廣闊,催生千億蛋糕。根據2010年干細胞年鑒
轉化細胞形態上發生改變的原因2018/01/11
利用轉化細胞治療心臟病非常普遍。然而,沒有目標心臟組織對于干細胞治療效果會有影響。因此,誘導細胞分化成心肌細胞是這類疾病治療上的*選擇之一。研究人員從人類脂肪組織中分離出成熟的干細胞,讓這些細胞暫時暴露于人類的心房細胞中,隨后再對這些細胞重新進行培養。經過12天的培養,這些細胞向著心肌細胞的表型方向分化,這可以通過以下方面得到證明:這些細胞從形態上發生了改變,表現為帶有纖維紋和分枝的雙核細胞;免疫熒光檢查發現,它們帶有心臟*的標記;RT-PCR檢測證明,這些細胞存在心肌基因;它們有逆轉錄表達。這
增加組織中轉化細胞的數量的方法2018/01/09
發育中的轉化細胞具有各種各樣的形態。研究人員的計算模擬顯示,其他的參數如表面積和組織中的細胞數并不會影響細胞形狀或分裂方式。它們有可能像烙餅那樣扁平,像立方體一樣呈等邊形,或是像軟管一樣細而長。發育胚胎是由不同大小的卵子所生成,并且它們往往是在動態環境中生長發育。由于有性生殖和隨機突變,它們具有各種各樣的遺傳標記。更奇怪的是,細胞內的遺傳回路已知是嘈雜且容易出錯的。然而,盡管一團混亂,大多數的動物出生時都是*正常的。在發育的早期,當組織細胞時,細胞之間不太擁擠,細胞伸展呈扁平的烙餅樣形狀。當組織
轉化細胞的生物學特性2018/01/05
轉化細胞分離的單個細胞在適當的培養條件下可分化為多細胞譜系,如黑色素細胞、脂肪細胞、骨細胞和軟骨細胞等不同類型的細胞。黑色素瘤細胞球能向間質組織分化,因為間質組織與黑色素細胞起源于相同的胚胎組織,即神經嵴。這也說明神經嵴干細胞具有可塑性。多潛能黑色素瘤球細胞在體外可克隆繁殖,并能在體內種植,這也顯示了瘤細胞的自我更新能力。通過小鼠致瘤試驗還發現,懸浮生長的細胞球細胞比貼壁生長的細胞具有更強的致瘤性。這種干細胞樣亞群多潛能分化的細胞在黑色素瘤細胞系中也得到證實,其表面標志為CD20分子,因通過富集
腫瘤細胞儀器清洗方法大全之光學玻璃的清洗2018/01/03
腫瘤細胞光學玻璃的清洗光學玻璃用于儀器的鏡頭、鏡片、棱鏡、玻片等,在和使用中容易沾上油污、水濕性污物、指紋等,影響成像及透光率。清洗光學玻璃,應根據污垢的特點、不同結構,選用不同的清洗劑,使用不同的清洗工具,選用不同的清洗方法。清洗鍍有增透膜的鏡頭,如照相機、幻燈機、顯微鏡的鏡頭,可用20%左右的酒精和80%左右的配制清洗劑進行清洗。清洗時應用軟毛刷或棉球沾有少量清洗劑,從鏡頭中心向外作圓運動。切忌把這類鏡頭浸泡在清洗劑中清洗;清洗鏡頭不得用力拭擦,否則會劃傷增透膜,損壞鏡頭。清洗棱鏡、平面鏡的
轉化細胞迅速解凍方法2017/12/28
轉化細胞復蘇操作步驟:實驗前準備:1.將水浴鍋預熱至37℃2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等迅速解凍:1.迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化,時間控制在1分鐘左右離心去除凍存液:1.融解好的細胞迅速放進離心機中,2000r/min或者600g離心2min2.吸棄上清液。3.用4-5ml*培養基重懸細胞,吹打制成單細胞懸液,細胞濃度以5×105/ml為宜。4.將復蘇好
轉化細胞的同源重組技術2017/12/26
1、轉化細胞優勢:成熟、可靠、精細是目前為止*一個可以滿足所有要求的打靶技術2、局限性:A需要ES細胞,目前只有小鼠有的ES細胞,其它模式動物的ESC還不能實現大規模應用。B周期長、工作量大、費用相對比較高3、可提供服務類型:A全基因敲除模式小鼠B條件性基因敲除模式小鼠C先全敲除再條件性敲除模式小鼠D基因敲入模式小鼠EROSA位點定點轉基因TALEN技術1、優勢:基因敲除效率高,速度快,可實現多物種基因敲除2、局限性:基因敲入效率較低,多基因敲除困難,系統構建相對復雜,存在脫靶風險3、轉化細胞可
干細胞的進化規律和流行趨勢2017/12/21
干細胞的基因起源、進化機制和流行趨勢尚缺乏系統和深入的研究。日前,在中科院院士高福的帶領下,中科院微生物所、中科院武漢病毒所與院外多家單位密切合作,在在H5N6禽流感病毒起源和進化機制研究中取得突破。自2014年起,科研人員對我國16個省份和地區39個市縣的禽流感病毒流行狀況進行持續監測。監測數據顯示,我國北方地區主要以H9N2為主,長三角、華中、華南地區有一定比例H7N9存在,而在長三角地區以南H5N6比重增大,逐漸取代H5N1成為優勢流行毒株。病毒與宿主相關性分析表明,H5N6和H6N6是鴨
轉化細胞轉化如何調控?2017/12/14
轉化細胞培養24h,采用ELISA、qRT-PCR、免疫細胞熒光染色和Westernblot等方法檢測HH信號相關分子(Ptch1、Smo和Gli1)、TGF-β1、EMT相關分子(Rac1蛋白、肌成纖維細胞標志物α-SMA和上皮細胞標志物E-cadherin)、III型膠原mRNA或蛋白的表達。結果發現,外源性Shh上調Smo和Gli1表達,抑制Ptch1表達,繼而激活HH信號;HH信號活化抑制腎小管上皮細胞E-cadherin的表達,上調α-SMA、III型膠原和TGF-β1的表達。環靶明干
轉化細胞來源及兩個特征2017/12/12
目前轉化細胞來源只有三種:骨髓來源、外周血來源、臍帶血來源。造血干細胞有兩個重要特征:其一,高度的自我更新或自我復制能力;其二,可分化成所有類型的血細胞。造血干細胞采用不對稱的分裂方式:由一個細胞分裂為兩個細胞。其中一個細胞仍然保持干細胞的一切生物特性,從而保持身體內干細胞數量相對穩定,這就是干細胞自我更新。而另一個則進一步增殖分化為各類血細胞、前體細胞和成熟血細胞,釋放到外周血中,執行各自任務,直至衰老死亡,這一過程是不停地進行著的。造血干細胞的用途:造血干細胞是血液成分之一,是生成各種血細胞
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