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2020
05-09

實驗過程中遇到的不增殖細胞有哪些？
在生物醫學實驗中，常常會用到大量的細胞進行實驗，而往往通過各種渠道得來的細胞數量都有限，無法滿足實驗過程中所需要的細胞數量，所以為了使實驗更順利的進行，科研人員往往需要前期對所需的細胞進行擴充培養，以便在后期的實驗中，可以不間斷使用。通常的細胞實驗中，很多科研人員都會根據實驗方案選擇常見的細胞，包括無限傳代的細胞系和有限傳代的原代細胞，一般的細胞都具有分裂增殖的能力，可以進行凍存、復蘇及傳代，因為這樣的難度系數低，實驗會少出現波折，也有少量的實驗研究會用到一些特殊的不增殖細胞。細胞系可無限傳代，
2019
12-27

小鼠支氣管平滑肌細胞的分離培養方法
平滑肌即無紋肌的通稱，平滑肌是由長紡錘形的單核細胞構成。它不構成獨立的器官，而只是成為構成體壁和內臟壁的因素（肌層）。平滑肌細胞互相連接，形成管狀結構或中空器官；在功能上可以通過縮短和產生張力使器官發生運動和變形，也可產生連續收縮或緊張性收縮，使器官對抗所加負荷而保持原有的形狀。小鼠支氣管平滑肌細胞的收縮、舒張、增殖和凋亡與臨床許多疾病的病理生理過程有關．如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等。例如在哮喘發病時，可以檢測到氣管平滑肌發生數目的增生和肥大，表型也發生改變，由收縮型轉為合成型與分泌型，并分
2019
09-24

人成纖維細胞的分離培養制備方式
成纖維細胞屬于由中胚層分化而來的間質細胞。細胞來源于人正常的皮膚組織，成纖維細胞是一種貼壁培養方式的細胞，由于這些細胞非常容易培養，它們已經被廣泛用于細胞和分子生物學研究中。一般而言，成纖維細胞能夠分泌I型和III型膠原等細胞外基質，并且研究表明不同器官中的成纖維細胞有顯著的不同。傷口修復時，成纖維細胞由可增殖，可遷移的表型變為有收縮性的，可重塑基質的表型，同時，它們會分泌大量的透明質酸來應對修復時的炎癥反應。以下是鏡像綺點提供的一種人成纖維細胞的制備方式（僅供參考）：1.首先在分離成纖維細胞時
2019
08-14

鏡像綺點 || 原代小鼠心肌成纖維細胞分離和培養方法
小鼠心肌成纖維細胞的組織來源于實驗動物的正常心臟組織，心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心臟中，心肌成纖維細胞約占正常心肌組織細胞總數的60%-70%，是心臟中非心肌細胞的主要組成部分，廣泛存在于心臟組織中，包圍心肌細胞，連接心肌細胞間質，與缺血性心臟病、炎癥、肥大、梗死等病理狀態密切相
2019
07-24

原代角質形成細胞的分離培養方法
原代細胞在相關細胞實驗使用過程中越來越多，人們不再單單趨于使用細胞系進行實驗研究，因為細胞系常常由于體外長期培養，而容易丟失原有的生物學特性，對藥物處理的反應差距越來越大。原代細胞剛從組織中分離開，生物學特性未發生很大變化，仍保留原來的遺傳特性，也接近和反應體內生長特性，原代細胞的活力和生長狀態都比較好，細胞的純度和基因保留可達到90%以上，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等試驗研究，使用原代細胞進行實驗，可以獲得更準確的研究和數據。為了更好的服務于廣大科研工作者，鏡像綺點技術人員特提供了角質形
2019
06-05

小鼠原代海馬神經元細胞的分離培養方法
海馬體主要負責記憶和學習，日常生活中的短期記憶都儲存在海馬體中。神經元是構成神經系統結構和功能的基本單位。神經元具有長突起，由細胞體和細胞突起構成。小鼠海馬神經元細胞的組織來源于實驗小鼠的正常腦組織，因為海馬神經元細胞類似于干細胞屬于高分度分化的細胞特性，具有不能傳代，不能增殖等特點，所有收到細胞后盡快使用。1.試驗所需儀器設備及試劑（1）儀器生物安全柜CO2細胞培養箱熒光倒置顯微鏡高速冷凍離心機電熱恒溫鼓風干燥箱（2）試劑耗材T25細胞培養瓶血球計數板細胞培養孔板紅細胞裂解液神經元*培養基0.
2019
06-05

細胞STR檢測服務
短串聯重復(Shorttandemrepeats,STR)，又稱微衛星DNA(MicrosatelliteDNA)或簡單重復序列(Simplerepeatsequence,SRS或SSR)，是廣泛存在于原核生物和真核生物基因組中的核苷酸重復序列。有絲分裂過程中DNA鏈之間的錯配引起的復制滑動被認為是導致STR產生的常見原因，并且依據不同復制單元大小的不同以及不同物種之間，復制滑動發生的概率也不相同。STR是以核心序列(corerepeatunits)首尾相連多次重復形成。每個STR的核心序列結構
2019
05-30

細胞復蘇方法
細胞操作流程復蘇1.將恒溫水浴鍋中的水預熱到37℃；2.從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉入恒溫水浴鍋中復溫，不斷震蕩凍存管以提高復溫速率；將融化了的凍存管中的用移液管轉入一直裝有5ml*培養基的15ml離心管中，充分混勻后，300g離心5min；3.離心完成后棄去上清，用1ml*培養基重懸細胞后，轉入T-25細胞培養中，再加*培養基4ml，之后轉入CO2培養箱中培養靜置。鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和技術服務：一、原代細胞服務各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源；多種人源性正常及腫瘤
2017
10-09

細胞轉染的類型及方法
轉染（Transfection）是指將DNA或者RNA導入真核細胞中的過程。轉染的目的是產生重組蛋白，或特異性增強或抑制轉染細胞中的基因表達。細胞轉染有哪些類型和方法呢？1）根據導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短，可以分為瞬轉和穩轉。瞬轉穩轉導入的DNA沒有整合到基因組中，而是保留在細胞核上導入的DNA整合到基因組中導入的遺傳物質不傳遞到子代；遺傳改變只是暫時的導入的遺傳物質能夠代代相傳；遺傳改變是*的不需要選擇性篩選需要選擇性篩選出穩定轉染的細胞DNA載體和RNA都可用于瞬時轉染只有DNA載體
2017
10-09

血清質檢方法和重要作用
細胞培養基的構成中動物血清對細胞的生長繁殖起著重要作用。在動物血清中牛血清的應用又是zui廣泛的，所以想要細胞在培養過程中長的好、穩定，牛血清的質量好壞直接影響生物研究的質量和安全性，使用質量好的牛血清也是細胞培養中的重要環節。血清是提供生長激素、營養物，以及低分子營養物；提供結合蛋白；能結合或調變它們所結合的物質活力；是細胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源；起酸堿度緩沖液作用；提供蛋白酶抑制劑；細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受損傷；能與有毒金屬和熱源物質結合，起到解毒作用。血清分類胎牛血
2017
10-09

養細胞需要注意的細節
養細胞可謂是個精細活，從事養細胞的人都知道養細胞的時候一旦不注意，就很容易造成細胞污染，所以想要養好細胞除了小心謹慎以外，還要提前做好準備：細胞培養前的準備1）在帶上手套開始細胞培養之前,先檢查一下移液管和瓶子的數量是否充足,以免在開始實驗后再次出入操作臺，這樣可以降低細胞污染的風險。2）細胞培養基也應先預熱,選擇只預熱部分培養基而非整瓶加熱,不但可以節約實驗時間,而且可以避免因反復加熱培養基而造成的蛋白質降解。3）結束操作后,別忘了培養基對光敏感,應盡可能避光保存。細胞培養的定期檢查1）定期檢
2017
10-09

制成免疫熒光容易出現的問題和注意事項
在制作原代細胞免疫熒光時，容易出現一些問題，造成熒光鑒定失敗，將抗原或抗體標記上熒光素，制成熒光抗體檢測組織或細胞內的相應抗原（或抗體）時，一定要注意抗體的比例高低和濃度。制作免疫熒光常用的方法有：方法一：直接法步驟：將熒光標記的特異性抗體（抗原）直接加在抗原（抗體）上，經一定的溫度和時間染色，水洗—干燥—封片—鏡檢優點：操作簡便、特異性高、非特異性染色少缺點：敏感性低方法二：間接法步驟：先用已知未標記的特異性抗體（一抗）與抗原反應，再用標記的抗體（二抗）與其反應，形成抗原—抗體—抗體復合物，水

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