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2019
12-28

原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞培養(yǎng)有哪些區(qū)別?
一、概念不同1、原代細(xì)胞：指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。2、原代細(xì)胞：適應(yīng)在體外培養(yǎng)條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱為傳代細(xì)胞。二、來(lái)源不同1、原代細(xì)胞：指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。2、原代細(xì)胞：幼年動(dòng)物的腎、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉與腫瘤等組織的細(xì)胞。三、培養(yǎng)步驟不同1、原代細(xì)胞：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出離散成單個(gè)細(xì)胞(常用胰蛋白酶)，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖。2、傳代細(xì)胞：原代細(xì)胞基礎(chǔ)上通過(guò)胰酶
2019
11-22

細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)
原代動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：1、實(shí)驗(yàn)材料要新鮮，從活體分離材料后要低溫保存，并盡快進(jìn)行細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)。2、無(wú)菌操作。操作時(shí)用的培養(yǎng)液，可加平時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液5倍含量的青鏈霉素。3、用酶法分離細(xì)胞時(shí)，注意酶液的濃度和控制消化時(shí)間。貼塊法分離細(xì)胞時(shí)，注意動(dòng)作要輕柔，不要傷到細(xì)胞組織，組織塊邊緣盡量平整有利于細(xì)胞游離。4、培養(yǎng)液的選擇。不同的細(xì)胞有對(duì)培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)的要求不同，根據(jù)所分離細(xì)胞的特性選擇。傳代細(xì)胞培養(yǎng)：1、無(wú)菌操作2、控制消化時(shí)間3、及時(shí)關(guān)注細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)
2019
11-17

奶牛子宮內(nèi)膜上皮外培養(yǎng)及鑒定
試驗(yàn)采用酶消化及機(jī)械法相結(jié)合的方法培養(yǎng)奶牛子宮內(nèi)膜上皮原代細(xì)胞及傳代細(xì)胞。酶消化法采用0.1%鏈蛋白酶于4℃消化16~20h,機(jī)械法采用手術(shù)刀刮取子宮角內(nèi)膜。獲得原代分離的細(xì)胞后,采用胰蛋白酶消化法進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)。試驗(yàn)應(yīng)用角蛋白抗體對(duì)細(xì)胞進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定,并對(duì)第3代奶牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞用MTT法繪制增殖曲線。結(jié)果顯示,細(xì)胞在相差顯微鏡下呈明顯的上皮樣細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞傳代到第8代時(shí),仍能保持與原代細(xì)胞相似的細(xì)胞形態(tài)特征及生長(zhǎng)狀態(tài)。同時(shí)細(xì)胞角蛋白染色陽(yáng)性細(xì)胞占80%以上。試驗(yàn)結(jié)果表明,應(yīng)用酶消
2019
10-17

PD動(dòng)物模型解析
帕金森病又稱為震顫麻痹，是—種影響患者活動(dòng)能力的中樞神經(jīng)系統(tǒng)慢性疾病，多發(fā)生于中老年以上的人群，美國(guó)APDA稱年齡小于40歲便開始患病者為年輕的帕金森病患者。圖片來(lái)源網(wǎng)絡(luò)，侵刪主要臨床表現(xiàn)為靜止性震顫、肌強(qiáng)直和運(yùn)動(dòng)徐緩等。隨著*人口老齡化,解決PD這一世紀(jì)頑癥成為了各國(guó)學(xué)者必須面對(duì)的任務(wù)。目前對(duì)PD的研究越來(lái)越受到關(guān)注。無(wú)論研究其發(fā)病機(jī)制還是探索新的治療方法都離不開PD動(dòng)物模型。常采用的PD動(dòng)物模型大體上可以分為三類：機(jī)械損傷PD模型、神經(jīng)毒素?fù)p傷模型、基于PD相關(guān)基因的基因模型。今天小歐就為大
2019
09-20

h1299細(xì)胞和a549細(xì)胞的區(qū)別
h1299細(xì)胞來(lái)源于一個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移?；颊呓邮芰顺跗诜暖煛＜?xì)胞均一性的部分缺失p53蛋白，并缺少p53蛋白表達(dá)。細(xì)胞可以合成0.1pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。a549細(xì)胞，該細(xì)胞系是1972年由GiardDJ通過(guò)肺癌組織移植培養(yǎng)建系的，源自一位58歲的白人男性。A549能通過(guò)胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽(yáng)性。一、H1299細(xì)胞種屬人肺癌細(xì)胞形態(tài)上皮樣細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清，10%傳代方法消化3-5分鐘。

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