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豬ELISA試劑盒實驗中當中應注意兩個問題2018/06/01
豬ELISA試劑盒實驗中當中應注意兩個問題1.當抗原材猜中的干擾物質不易除掉,或不易得到滿足的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體.其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競賽與固相抗原結合.2.標本中抗體量越多,結合在固相上的酶標抗體愈少,因而陽性反響呈色淺于陰性反響.如抗原為高純度的,可直接包被固相.如抗原中會有干擾物質,直接包被不易成功,可選用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應的抗體,然后參加抗原,構成固相抗原.3.洗刷除掉抗原中的雜質,elisa試劑盒然后再加標本和酶標抗體進行競賽結合反響.
其它類ELISA試劑盒使用時出現白板異常的原因:2018/05/30
其它類ELISA試劑盒使用時出現白板異常的原因:1、試劑盒已過效期,或不同試劑盒組分混用。處理辦法:檢查試劑盒的組分及批號,確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒,不同試劑盒或不同批號的不能混用。2、錯加、漏加試劑底物、顯色劑A或B。處理辦法:嚴格按說明書的步驟操作,加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,以減少漏加現象。3、洗板及加樣過程中,酶標受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力。處理辦法:確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認配制洗液的容器已洗干凈。4、終止液誤作洗滌液稀釋或當底物緩沖液
ELISA試劑盒檢測試劑盒操作過程2018/05/28
ELISA試劑盒檢測試劑盒操作過程1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取滿足數量的酶標包被板,固定于框架上,別離設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記載各孔方位,在標準品孔中參與標準品50μL;待測樣本孔中先參與待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗
大鼠ELISA試劑盒操作時樣本的制備方法2018/05/25
大鼠ELISA試劑盒操作時樣本的制備方法:A、高值樣本:a)至少選用三個高濃度樣本,稀釋倍數應為方法性能標明的zui大稀釋倍數、并適當增加或減小稀釋比例。b)選取含被測物的高值樣本,必要時可添加被分析物的純品,并計算出理論值。c)使用混合血清或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液,或測定方法要求的稀釋液對高值待測樣本進行稀釋,使其接近于線性范圍的上1/3區域內,并記錄稀釋倍數。B、低值樣本:將待測樣本用混合人血清(含被分析物濃度水平較低),或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進行稀釋,產生接近于方法線性范圍低
小鼠ELISA試劑盒加樣須注意如下問題2018/05/23
小鼠ELISA試劑盒加樣須注意如下問題:1.吸取樣品時,加樣槍吸頭不應黏附多余的液體;加樣時不可90度向孔中滴加液體,這樣會導致液體殘留在吸頭上,加樣不準確!2.不要將吸頭伸入孔中,一方面若接觸孔底可能壓彎吸頭,另一方面可能會將孔中的液體吹起來,加樣不準確!正確的加樣方法應為45度,吸頭貼著孔壁加入,應注意:1.角度太小,會使液體殘留在孔壁上,導致加樣不準確!2.吸頭應當貼著管壁和液面的交界處。實驗結果辦法:1)請配制標準品及工作液A和B,以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差。2)酶標板在溫育時
豬ELISA試劑盒實驗內標法的操作2018/05/21
豬ELISA試劑盒實驗內標法的操作①將已知量的內標樣加入標準樣品,制成混合標樣,并配制一系列的已知濃度的工作標樣?;旌蠘藰又袠藰优c內標樣的摩爾比不變。②注入色譜柱,以(標樣峰面積/內標樣峰面積)為響應值。③根據響應值與工作標樣濃度之間存在的線性關系,即W=f×A,制成標準曲線。④將已知量的內標樣加入未知樣品,注入色譜柱,得到欲測組分的響應值。⑤根據已知的系數f,即可求出欲測組分的濃度。技術中要注意的問題:1、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。2、底物請避光保存。3、嚴格按照技術說明書的操作進
其它類ELISA試劑盒實驗五大技巧2018/05/16
其它類ELISA試劑盒實驗五大技巧一:操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。二:正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導致結果錯誤,實驗重復性差。三:手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數不要超過說明書推薦的洗滌次數,洗液在反應孑L內滯留的時
ELISA試劑盒技術中要注意的問題2018/05/14
ELISA試劑盒技術中要注意的問題:1、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。2、底物請避光保存。3、嚴格按照技術說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。4、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。5、本試劑不同批號組分不得混用。6、如與英文說明書有異,以英文說明書為準。檢驗中可用于測定:1)體液中的各種蛋白質,包括含量極少的蛋白質如甲胎蛋白等。2)激素,包括小分子量的甾體激素等。3)抗生素和藥物。4)病原體抗原,HBsAg、HBeAg等。5)另外,也可利用純化的抗原檢測標本中
大鼠ELISA試劑盒操作流程及注意事項2018/05/11
大鼠ELISA試劑盒操作流程及注意事項1.1該儀器必須有專人保管,使用前需通讀儀器說明書。1.2嚴格遵守操作規程,如儀器出現故障,應馬上停止使用,并立即向保管人、儀器管理人以及科室負責人報告,嚴格按照單位有關制度實施,不得擅自“修理”,查明原因,處理后儀器保管人應及時做好故障情況及維修記錄。2.洗板機的設備運行步驟2.1擰開廢液瓶口的蓋子,倒掉廢液瓶的廢液,加入適量漂白確的方位。確保微孔板未被遮蓋。保證待洗反應板所有的孔處于同一水平位置,以免孔邊緣過高碰到洗板機的吸液針。粉,再把蓋子擰緊。注意不
小鼠ELISA試劑盒實驗的基本操作程序2018/05/09
小鼠ELISA試劑盒實驗的基本操作程序1、其實絕大部分細胞消化的時分是只需用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法核算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min滿足消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,接連這樣傳代,對細胞損傷很大。簡略的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2、什么算是消化好了呢?不是細胞悉數成距離散布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼調查貼壁細胞層,只需能移動了,八成呈沙壯移動,其實現已能夠了,許多人喜愛
豬ELISA試劑盒實驗操作過程中需要注意的這些檢測要點2018/05/07
豬ELISA試劑盒實驗操作過程中需要注意的這些檢測要點;1)仔細閱讀說明書確定試劑盒在有效期內,按說明書確定所有試劑齊全,以及所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等。2)標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份,短期內無法實驗者,注意低溫保存。3)按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑,選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體。4)一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品
其它類ELISA試劑盒常見樣本采集方法2018/05/04
其它類ELISA試劑盒常見樣本采集方法:血清:全血在室溫自然凝固30分鐘后,1000g離心30分鐘,小心收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。血漿:根據試劑盒要求選擇合適的抗凝劑,與全血混合20分鐘后,1000g離心30分鐘,小心收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。細胞培養上清:將細胞培養液300g離心10分鐘去除沉淀物,,仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。所有標本收集完成后,應及時分裝放在-20℃或-70℃條件下保存,避免反復凍融。如果在24小時內檢測,樣本可
ELISA試劑盒常見樣本采集方法2018/05/02
ELISA試劑盒常見樣本采集方法:血清:全血在室溫自然凝固30分鐘后,1000g離心30分鐘,小心收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。血漿:根據試劑盒要求選擇合適的抗凝劑,與全血混合20分鐘后,1000g離心30分鐘,小心收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。細胞培養上清:將細胞培養液300g離心10分鐘去除沉淀物,,仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。所有標本收集完成后,應及時分裝放在-20℃或-70℃條件下保存,避免反復凍融。如果在24小時內檢測,樣本可以存放
ELISA試劑盒操作步驟進行測定2018/04/25
ELISA試劑盒操作步驟進行測定因此有些為了保持較好的本底采用了單片段基因工程抗原及合成肽包被,該類試劑盒的流行病學敏感度不夠,穩定性也成問題。也有堅持試劑盒高的流行病學敏感度,科學地對待反應結果。ELISA試劑盒基因工程抗原是抗原基因在質粒載體中原核或真核表達的蛋白質抗原,多以大腸桿菌或酵母菌為表達系統。該類抗原與合成肽相比具有以下特點:分子量大。合成肽采用化學方法制備,由于工藝的局限,合成數量有限,只能達到數百個氨基酸;而利用基因工程制備的抗原,分子量更大。良好的ELISA試劑盒板應該是吸附
ELISA試劑盒間接法簡單操作步驟2018/04/18
ELISA試劑盒間接法簡單操作步驟:(1)、將特異性抗原與固相載體聯結,形成固相抗原;(2)、加稀釋的受檢血清,保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合,形成固相抗原抗-體復合物;(3)、加酶標抗抗體;(4)、加入酶促反應底物,發生顯色反應,顯色的深淺與待測抗體的量成正比。特點:1、采用全進口原料和抗體----、靈敏、特異,嚴格引進技術標準進行批量2、規范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高3、先進的優化方案----重復性高,可靠性強4、購買本公司的ELISA試劑盒,提供免
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