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植物精氨酸激酶(AK)ELISA試劑盒該如何操作及計算?2019/09/06
植物精氨酸激酶(AK)ELISA試劑盒該如何操作及計算?植物精氨酸激酶(AK)ELISA試劑盒操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌
牛核因子κB(NF-κB)ELISA檢測試劑盒需要注意的細節問題2019/09/06
牛核因子κB(NF-κB)ELISA檢測試劑盒需要注意的細節問題有哪些?首先需要注意樣本處理細節,下面是各種樣本具體處理時的細節。1.血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.組織勻漿:用預冷的PBS
雞甘油三酯(TG)ELISA試劑盒的使用,新手的你這些可能還不甚了解2019/08/26
雞甘油三酯(TG)ELISA試劑盒的使用,新手的你這些可能還不甚了解1.試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。2.加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本/標準品,酶結合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。3.孵育:為防止樣品蒸發
人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒實驗原理及性能2019/06/14
人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒實驗原理及性能人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。人
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒注意事項和操作步驟2019/06/14
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒注意事項和操作步驟人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒注意事項嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。在儲存和溫育時避
為保證小鼠ELISA試劑盒測量的準確性,測量時要注意了2019/05/21
小鼠ELISA試劑盒定性測定的顯色可在室溫進行,時刻通常不需要嚴格控制,有時可根據陽性對照孔和陰性對照孔的顯況恰當縮短或延伸反響時刻,及時判別。在用肉眼判別成果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。此刻酶催化無色的底物生成有色的產品。反響的溫度和時刻仍是影響顯色的要素。在必定時刻內,陰性孔可堅持無色,而陽性孔則隨時刻的延伸而呈色加強。恰當提高溫度有助于加快顯色進行。在定量測定中,參加底物后的反響溫度和時刻應按規則力求。使用過程中需要注意以下事項:1、使用小鼠ELISA試劑盒時不要吃喝、抽
大鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒操作及性能2019/05/15
大鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒操作及性能l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中大鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,3
人20-HETE ELISA試劑盒實驗原理及注意事項2019/05/15
人20-HETEELISA試劑盒實驗原理及注意事項實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人20-HETE()捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人20-HETE()呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。注意事項嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在
人基質金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒操作步驟以及注意事項2019/05/05
人基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒操作步驟及注意事項人基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜
萊克多巴胺檢測試劑盒原理及樣本前處理2019/05/05
萊克多巴胺檢測試劑盒原理及樣本前處理1.原理萊克多巴胺檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測尿樣、組織、飼料等樣本中的萊克多巴胺(Ractopamine,RAC),試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的萊克多巴胺和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗萊克多巴胺抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含萊克多巴胺含量成負相關,與標準曲線比較即可得出樣本中萊克多巴胺的殘留量。2.樣本前處理2.1樣本處理前須知:
植物擴展蛋白(expansins)elisa試劑盒樣本要怎么處理?2019/04/19
植物擴展蛋白(expansins)elisa試劑盒樣本要怎么處理?植物樣本通常是根莖葉三個部分,通常需要勻漿處理。切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。1,對于樣本要求保持鮮重2,稱取樣本中的重量不小于50mg,一般以1g為基準3,勻漿的比例選取10%
組織、細胞到底該如何裂解?2019/03/26
組織、細胞到底該如何裂解?實驗過程中難免會遇到特殊樣本比如組織和細胞,那我們我們又該如何來處理呢?常見的處理方法就是用RIPA來裂解。如發現RIPA有沉淀,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。根據使用量,取每1mlRIPA加入10ulPMSF,使PMSF的終濃度為1mM,混勻備用(PMSF現用現加)。1、樣品前處理:a)對于貼壁細胞:去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。b)對
詳談各種酶活檢測方法2019/03/05
詳談各種酶活檢測方法通常酶制劑活性的檢測是采用實驗室分析手段來進行評價,它可以用來篩選酶制劑、確定復合酶制劑的zui佳組方及確定產品的zui佳添加量等,酶制劑實驗室評價技術是目前飼料廠家應用zui為廣泛的一種方法。其操作相對簡單,檢測所用時間短,便于生產實踐應用。酶活測定結果雖不能*反映酶的使用效果,但通過檢測至少可以避免使用劣質的酶制劑。我國飼料工業標準中已經確立了飼用植酸酶(GB/T18634)、纖維素酶(NY/T912)、β-葡聚糖酶(NY/T911)的測定方法。另外,許多企事業單位為了生
elisa試劑盒的選購參考因素2019/01/25
由于elisa試劑盒有著準確性高、靈敏度高、特異性強的諸多優點,深受廣大師生朋友的喜愛。而現試劑盒種類頗多,產品的選擇成為了實驗前的重點事項。廠家根據經驗,建議從這四大因素來考慮選擇合適的elisa試劑盒。一、檢測方式如今檢測ELISA試劑盒有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶,而反應體系中添加有相應的底物。這種酶促反應生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以
ELISA試劑盒酶標板在什么情況下會失效?2018/09/14
ELISA試劑盒酶標板在什么情況下會失效?ELISA試劑盒的保質期一般都是在6個月,如果保存得當的話,不會出現問題的。但不要反復凍融。當然如果是正常的DAS-ELISA檢測試劑盒等,應該放在4℃左右冰箱保存。建議ELISA試劑盒解凍后一次用完。已開封或者使用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,ELISA檢測試劑盒開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。但要注意的是,如果將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來就立即使用的話,可能會影響,其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出
ELISA測定應如何操作才正確2018/08/24
ELISA測定現在通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式,測定操作非常簡單,一般涉及到標本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結果判斷和結果報告及解釋等方面,其中任一步驟的不當都會影響測定結果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。現分述如下。一、臨床標本的收集和保存用于ELISA測定的臨床標本zui為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、
ELISA實驗十八條通用規則2018/08/24
ELISA實驗十八條通用規則1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但zui好有專業人員進行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。4、實驗時,要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液體加到酶標孔中時
ELISA試劑盒實驗中需要注意哪些細節2018/08/09
ELISA試劑盒實驗中需要注意哪些細節1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計
臻科生物帶你了解ELISA的樣本收集與前期準備2018/06/21
臻科生物帶你了解ELISA的樣本收集與前期準備利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。(一)臨床樣本的收集A、血液樣本有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應在標本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無名指內側采血,該部位應無凍瘡,
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