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當(dāng)前位置：蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司>>技術(shù)文章

國(guó)外干細(xì)胞儲(chǔ)存的細(xì)胞庫(kù)有幾個(gè)？細(xì)胞的來源渠道有哪些呢？2022/04/13: 國(guó)內(nèi)的細(xì)胞庫(kù)可能都比較熟悉，比如上海細(xì)胞庫(kù)。那么國(guó)外干細(xì)胞儲(chǔ)存的細(xì)胞庫(kù)有幾個(gè)？細(xì)胞的來源渠道有哪些呢？小編來介紹一下：Cellosaurus是來自瑞士日內(nèi)瓦生物信息學(xué)研究所的細(xì)胞系匯編，其中列出了96820個(gè)人類、21791個(gè)小鼠、2444個(gè)大鼠細(xì)胞系。在開始對(duì)特定細(xì)胞系進(jìn)行任何工作之前，一個(gè)重要的考慮因素是確保該細(xì)胞系是真實(shí)的，盡管大多數(shù)研究人員似乎忽略了這個(gè)問題。美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(ANSI)和美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)為使用短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)的人類細(xì)胞系提供了文件標(biāo)準(zhǔn)(ASN-

為什么要優(yōu)化抗體的表達(dá)滴度？2022/04/12: 標(biāo)簽：細(xì)胞系抗體滴度抗體藥物細(xì)胞系的表達(dá)滴度與產(chǎn)品的產(chǎn)量與生產(chǎn)成本息息相關(guān)，實(shí)踐證明提高瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系和CHO細(xì)胞系的表達(dá)滴度可以提高抗體產(chǎn)量，有效降低生產(chǎn)成本。穩(wěn)定細(xì)胞系中的細(xì)胞表達(dá)滴度穩(wěn)定生產(chǎn)細(xì)胞系生產(chǎn)過程中，在可重復(fù)性和可放大性等多方面都具有許多優(yōu)勢(shì)。細(xì)胞的培養(yǎng)參數(shù)對(duì)細(xì)胞系的培育也具有較大的影響力。比如：溫度、pH、滲透壓、氣體流速、罐內(nèi)壓力、攪拌罐內(nèi)的攪拌槳類型、攪拌速度和細(xì)胞代謝物水平等。另外，在生物工藝技術(shù)中，細(xì)胞的密度、細(xì)胞活性、線粒體活性、LDH、NADH水平等生物因

臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟和方法2022/04/12: 細(xì)胞計(jì)數(shù)是確定培養(yǎng)中鋪板的細(xì)胞濃度、確定細(xì)胞活力和評(píng)估細(xì)胞分離程序結(jié)果的一個(gè)組成部分。建議在細(xì)胞分離之前進(jìn)行初始細(xì)胞計(jì)數(shù)；然后可以將該數(shù)字與細(xì)胞分離后的細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行比較，以計(jì)算細(xì)胞恢復(fù)率。此外，當(dāng)預(yù)期細(xì)胞活力可能會(huì)降低時(shí)，應(yīng)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，例如，在處理冷凍保存的細(xì)胞或離體操作的細(xì)胞時(shí)。可以使用臺(tái)盼藍(lán)或3%乙酸和亞甲藍(lán)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù).進(jìn)行總有核細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，建議使用3%乙酸和亞-CH3藍(lán)。乙酸溶解細(xì)胞膜，亞甲藍(lán)染色暴露的細(xì)胞核。由于成熟的紅細(xì)胞缺乏細(xì)胞核，因此在計(jì)數(shù)時(shí)被排除在外。或者，建議使用臺(tái)盼藍(lán)來

胎牛血清的保存方法2022/04/12: 胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)常用的生物試劑，那么用不完的胎牛血清FBS該如何儲(chǔ)存呢？胎牛血清FBS一般需要冷凍保存，在-5到-20°C之間，并且可以在2到8°C的溫度下解凍。將血清等分并冷凍在較小的部分（通常為50ml試管）中通常很有用，以避免多次冷凍和解凍循環(huán)。有時(shí)，一些FBS等分試樣在冷凍溫度下仍保留在液體中。這是由于缺乏用于開始結(jié)晶（冷凍）的成核中心（顆粒物質(zhì)）。如果您只是用手指輕彈管子，它們通常幾乎會(huì)立即凝固。解凍后有一些沉淀是很常見的。沉淀物，可能是由于某些血清蛋白的變性，可以通過短暫的離心來清

胎牛血清選購(gòu)的冷知識(shí)2022/04/12: 胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分，不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子，但含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)至關(guān)重要的營(yíng)養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長(zhǎng)因子對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的維持和生長(zhǎng)至關(guān)重要。FBS還含有多種小分子，如氨基酸、糖、脂質(zhì)和激素。FBS應(yīng)用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細(xì)胞培養(yǎng)中，其濃度高達(dá)20%甚至更高，它提供許多促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖的必需營(yíng)養(yǎng)素和生長(zhǎng)因子。然而，需要注意的是，人類細(xì)胞培養(yǎng)物中的FBS可能會(huì)引入研究成果。用人類血清培養(yǎng)的人類細(xì)胞與用FBS培養(yǎng)的

關(guān)于SDS-PAGE凝膠電泳的常見問答2022/04/08: 電泳是分離蛋白質(zhì)和其他物質(zhì)如核酸、嘌呤、嘧啶、一些有機(jī)化合物甚至無(wú)機(jī)離子的主要技術(shù)。目前的大部分電泳是將樣品分離到固定介質(zhì)中的流動(dòng)相中。聚丙烯酰胺凝膠是主要介質(zhì)之一。它是一種多孔凝膠，其孔徑接近蛋白質(zhì)分子的大小，提高了蛋白質(zhì)的分辨率。此外，聚丙烯酰胺凝膠化學(xué)穩(wěn)定性好，重復(fù)性強(qiáng)，對(duì)pH和溫度變化穩(wěn)定，顏色觀察容易。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）在蛋白質(zhì)分子量測(cè)定、特異性蛋白質(zhì)檢測(cè)、菌種鑒定等方面具有操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，因此廣為使用。電泳SDS-PAGE的工作原理是什么？聚丙烯酰

Western Blot實(shí)驗(yàn)步驟2022/03/31: 本文摘要蛋白質(zhì)印跡技術(shù)（免疫印跡實(shí)驗(yàn)）又稱為WesternBlot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。WesternBlot主要用于檢測(cè)或分析蛋白，應(yīng)用領(lǐng)域集中在基因表達(dá)研究、抗體活性檢測(cè)和疾病診斷等。01蛋白質(zhì)印跡基本流程圖02westernblot步驟樣品準(zhǔn)備：Tanon連續(xù)梯度預(yù)制膠（4-20%10孔/15孔/17孔）；（4-12%10孔/15孔/17孔）TanonMops/MES電泳緩沖液（粉劑）Tanon預(yù)染蛋白MarkerTanon4×LDSLoadingBu

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中CT值出現(xiàn)異常的原因分析2022/03/30: 熒光定量PCR是生物醫(yī)學(xué)中常用的檢測(cè)核酸病毒的方法之一，由此，這幾年P(guān)CR儀也成了近幾年臨床檢測(cè)和分子生物學(xué)研究的主要實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。我們知道CT值是PCR擴(kuò)增曲線中的重要參數(shù)，那么CT值是什么？它與PCR擴(kuò)增存在什么關(guān)系？為什么有的時(shí)候基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中會(huì)出現(xiàn)CT值異常甚至缺少CT值的情況？什么是CT值？在熒光定量PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)（Fluorescencesignal）達(dá)到設(shè)定的熒光閾值（FLUORESCENCEthreshold）時(shí)的所對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)（CycleThresho

細(xì)胞培養(yǎng)中常見的問題解答2022/03/30: 標(biāo)簽：細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)液氮培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)中的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，在細(xì)胞生長(zhǎng)過程中，很多因素都會(huì)造成細(xì)胞生長(zhǎng)不良。下面簡(jiǎn)單歸納一下細(xì)胞生長(zhǎng)不良的原因及對(duì)應(yīng)的解決方案。常見問題一：為什么細(xì)胞解凍后缺少活力，活細(xì)胞占比較低？這種現(xiàn)象可能主要由以下幾種原因所導(dǎo)致：1.培養(yǎng)物凍存液等質(zhì)量欠缺。解決方案：a.確保用來制備儲(chǔ)存物（凍存液）的起始培養(yǎng)物需要保證其健康、無(wú)微生物污染、處于生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期后期狀態(tài)。b.收獲細(xì)胞時(shí)需要小心翼翼，避免細(xì)胞損傷。2.儲(chǔ)存物凍存方法不當(dāng)解決方案：a.在液氮冷凍細(xì)胞時(shí)，確保細(xì)胞、培

真空離心濃縮儀的原理和應(yīng)用2022/03/29: 溶劑去除是制藥、化學(xué)和生物技術(shù)行業(yè)廣泛應(yīng)用中的過程。盡管使用了多種樣品形式和溶劑，但沒有一種單一的溶劑去除技術(shù)可以提供通用的解決方案。隨著冷凍干燥和離心濃縮技術(shù)的不斷成熟，結(jié)合真空泵、冷阱和加熱蒸發(fā)設(shè)備，所開發(fā)的新一代高功率冷阱、真空離心濃縮儀等儀器，既提高了蒸發(fā)性能又改善了樣品完整度，這類儀器還進(jìn)一步地提升了溶劑回收率，從而減少了蒸發(fā)-濃縮過程對(duì)環(huán)境的影響。只有充分了解離心濃縮儀的基本原理與應(yīng)用才能更好地在實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮它的作用。溶劑去除的原理在溶劑去除過程中，以熱量的形式施加能量，使液體蒸發(fā)成氣

細(xì)胞周期檢查點(diǎn)及其調(diào)節(jié)機(jī)制2022/03/25: 細(xì)胞周期檢查點(diǎn)：§細(xì)胞通常在體積翻倍時(shí)進(jìn)行分裂，但實(shí)際上細(xì)胞分裂過程的控制非常復(fù)雜且精確。細(xì)胞分裂的所有過程或步驟都是按順序發(fā)生的，并且細(xì)胞知道何時(shí)進(jìn)行以及何時(shí)等待和停止細(xì)胞分裂。稱為細(xì)胞周期。§在DNA復(fù)制完成之前或當(dāng)染色體或紡錘體纖維受損時(shí)，連續(xù)的細(xì)胞分裂會(huì)給細(xì)胞甚至有機(jī)體帶來災(zāi)難性的后果。因此，在進(jìn)行細(xì)胞分裂之前，細(xì)胞的各個(gè)方面都要通過其內(nèi)部機(jī)制進(jìn)行檢查。§檢查點(diǎn)是真核細(xì)胞周期中的幾個(gè)點(diǎn)之一，在這些點(diǎn)上，可以停止細(xì)胞向細(xì)胞周期下一階段的進(jìn)程，直到條件有利。§在循環(huán)期間會(huì)發(fā)生許多停止，以評(píng)估

Southern Blot原理和實(shí)驗(yàn)步驟2022/03/25: SouthernBlot印跡定義：涉及將凝膠上分離的特定DNA、RNA或蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到載體膜上以進(jìn)行檢測(cè)或鑒定的分析技術(shù)稱為印跡。變性片段從凝膠中轉(zhuǎn)移到載體膜上的過程使其易于使用探針或抗體進(jìn)行分析。根據(jù)要分離的物質(zhì)，印跡技術(shù)可能是——Southern印跡、Northern印跡或Western印跡，它們分別分離DNA、RNA和蛋白質(zhì)。SouthernBlot是一種用于分子生物學(xué)、免疫遺傳學(xué)和其他分子方法的分析技術(shù)，用于從DNA樣品的混合物或DNA鏈中的特定堿基序列中檢測(cè)或鑒定感興趣的DNA。該技術(shù)由

實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的儀器和實(shí)驗(yàn)室耗材有哪些？2022/03/25: 用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室耗材有很多種，進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的基本設(shè)備如下：設(shè)備有益設(shè)備有用的附加設(shè)備振蕩培養(yǎng)箱生物安全柜低溫冷凍柜顯微鏡細(xì)胞計(jì)數(shù)儀玻璃器皿清洗機(jī)滅菌器真空泵菌落柜臺(tái)清洗儀器二氧化碳培養(yǎng)箱共聚焦顯微鏡殺菌干燥箱制備和質(zhì)量控制熒光激活細(xì)胞分選儀離心機(jī)溫度記錄純水機(jī)細(xì)胞生物反應(yīng)器液氮罐移液器和自動(dòng)移液器水浴鍋動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室所需基本設(shè)備清單：1.無(wú)菌工作區(qū)/細(xì)胞培養(yǎng)罩（即層流罩或生物安全柜）2.培養(yǎng)箱（推薦使用潮濕的二氧化碳培養(yǎng)箱）3.水浴4.離心機(jī)5.冰箱和冰柜(–

關(guān)于蛋白電泳中的SDS聚丙烯酰胺凝膠2022/03/24: 蛋白電泳是研究蛋白質(zhì)性質(zhì)的一種相對(duì)簡(jiǎn)單、快速和高靈敏度的工具。它是分析化學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)的主要工具。通過電泳分離蛋白質(zhì)是基于這樣一個(gè)事實(shí)，即帶電分子將在施加電場(chǎng)時(shí)通過基質(zhì)遷移。蛋白質(zhì)電泳分離的基質(zhì)是聚丙烯酰胺。用于形成聚丙烯酰胺的化學(xué)試劑是單體丙烯酰胺和N，N'-雙丙烯酰胺（雙-丙烯酰胺）。聚合丙烯酰胺和雙丙烯酰的方法是使用TEMED（四*基乙二胺）和過硫酸銨。聚丙烯酰胺凝膠內(nèi)部的聚合形成了一個(gè)交聯(lián)的微孔網(wǎng)絡(luò)。這種孔隙網(wǎng)絡(luò)允許小蛋白質(zhì)分子快速通過，同時(shí)減緩較大蛋白質(zhì)的遷移。這導(dǎo)致基于其分

紫外光譜的原理及其應(yīng)用2022/03/23: 紫外光譜是紫外分光光度計(jì)等分析化學(xué)中的重要工具。UV（紫外線）光譜的另一個(gè)名稱是電子光譜，因?yàn)樗婕皩㈦娮訌幕鶓B(tài)提升到更高的能量或激發(fā)態(tài)。在本文中，我將解釋紫外光譜的基本原理、工作原理和所有應(yīng)用。一、紫外光譜簡(jiǎn)介紫外光譜是一種吸收光譜，其中紫外線區(qū)域（200-400nm）的光被分子吸收。紫外輻射的吸收導(dǎo)致電子從基態(tài)激發(fā)到更高能態(tài)。被吸收的紫外線輻射的能量等于基態(tài)和高能態(tài)之間的能量差（deltaE=hf）。通常，有利的躍遷是從MAX占據(jù)分子軌道(HOMO)到LOW未占據(jù)分子軌道(LUMO)。對(duì)于大

ISS原位測(cè)序原理和方法應(yīng)用2022/03/23: 原位測(cè)序(ISS)是一種新方法，通過該方法直接在固定組織或細(xì)胞樣品的切片中對(duì)mRNA進(jìn)行測(cè)序。原位測(cè)序原理關(guān)鍵是測(cè)序信息與其位置之間的聯(lián)系—在一些情況下，是亞細(xì)胞位置。這與傳統(tǒng)測(cè)序不同，后者在將樣本從內(nèi)源環(huán)境中移除后分析樣本，從而丟失位置信息。ISS由斯德哥爾摩大學(xué)開發(fā)，可同時(shí)量化數(shù)百個(gè)mRNA轉(zhuǎn)錄本，并以單細(xì)胞分辨率在空間上解析它們。該方法使用四種熒光染料來指示核酸堿基、RNA掛鎖探針和催化在掛鎖探針位置形成環(huán)化DNA的酶，這種機(jī)制稱為滾環(huán)擴(kuò)增。使用成像技術(shù)讀取產(chǎn)生的熒光DNA。空間檢測(cè)技術(shù)斯

什么是生物安全柜？2022/03/17: 生物安全柜是一種通風(fēng)的外殼，可保護(hù)用戶、產(chǎn)品和環(huán)境免受因處理潛在危險(xiǎn)微生物而產(chǎn)生的氣溶膠的影響。連續(xù)氣流通過HEPA過濾器排放到大氣中。三種保護(hù)狀態(tài)對(duì)柜內(nèi)有害物質(zhì)的個(gè)人防護(hù)避免樣品污染的產(chǎn)品保護(hù)。環(huán)境保護(hù)，防止機(jī)柜內(nèi)的污染物。生物安全柜在處理生物制劑時(shí)根據(jù)其容納能力分為三類。1級(jí)機(jī)柜提供個(gè)人和環(huán)境保護(hù)。用于處理低到中等風(fēng)險(xiǎn)的生物制劑。生物安全等級(jí)：1、2和3類2機(jī)柜提供人員、環(huán)境和產(chǎn)品保護(hù)。用于處理低到中等風(fēng)險(xiǎn)的生物制劑。生物安全等級(jí)：1、2和3級(jí)3級(jí)機(jī)柜一個(gè)高度專業(yè)化的實(shí)驗(yàn)室“手套箱”。3級(jí)機(jī)

RFID標(biāo)簽在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用2022/03/15: 對(duì)于依賴速度和準(zhǔn)確性來掃描大量庫(kù)存的實(shí)驗(yàn)室來說，RFID標(biāo)簽代表了對(duì)大多數(shù)傳統(tǒng)標(biāo)簽方法的巨大改進(jìn)。RFID技術(shù)最初是在二戰(zhàn)期間構(gòu)思的，已被用于各種行業(yè)，從防盜檢測(cè)和可掃描房間鑰匙到核對(duì)材料的跟蹤。實(shí)驗(yàn)室中的RFID標(biāo)簽在實(shí)驗(yàn)室中，RFID標(biāo)簽具有許多優(yōu)勢(shì)，包括能夠從遠(yuǎn)處同時(shí)跟蹤樣品，而無(wú)需直接視線。這項(xiàng)技術(shù)通過使用無(wú)源RFID嵌體來實(shí)現(xiàn)，該嵌體由嵌入在標(biāo)簽中的集成電路（芯片）和天線組成，標(biāo)簽發(fā)出無(wú)線電信號(hào)以響應(yīng)讀取器，然后讀取器處理所有樣品的相關(guān)信息。從而可以輕松地通過這些標(biāo)簽來節(jié)省時(shí)間并提高跟

實(shí)驗(yàn)室移液器使用10種技巧2022/03/15: 毫無(wú)疑問，移液器是生物學(xué)研究的重要的工具之一。它們有多種設(shè)計(jì)，用于無(wú)數(shù)研究領(lǐng)域。雖然許多液體處理指南都強(qiáng)調(diào)移液器維護(hù)的重要性，但移液器技巧同樣重要。下面，我們分享一些移液器的使用方法，移液操作的10種技巧，以改進(jìn)您的移液技術(shù)。1.選擇合適的移液槍和吸頭：移液槍與移液器吸頭的匹配度是移液準(zhǔn)確度的關(guān)鍵。如果吸頭和移液槍不匹配，或使用質(zhì)量差的吸頭，可能會(huì)影響到吸頭和移液槍之間的密封性能。良好的移液器吸頭可確保適當(dāng)?shù)拿芊猓瑥亩畲笙薅鹊販p少因泄漏引起的樣品損失。2.根據(jù)液體密度適當(dāng)校準(zhǔn)移液器：如果液體的

二代測(cè)序降低實(shí)驗(yàn)成本方案2022/03/15: 隨著成本穩(wěn)步下降，二代測(cè)序NGS變逐漸增多，但如果經(jīng)常使用，它仍然是一種成本昂貴的工具。其實(shí)在實(shí)驗(yàn)室中，掌控好以下幾個(gè)環(huán)節(jié)也是可以節(jié)省NGS的總體成本的。這里提供一些關(guān)于降低二代測(cè)序-NGS成本的方法可供參考。1.樣品質(zhì)量控制樣本的質(zhì)量直接關(guān)乎到二代測(cè)成本，質(zhì)量較差的樣本，會(huì)間接增加測(cè)序步驟和處理時(shí)間。所以，降低成本的簡(jiǎn)單方法之一就是從樣品提取開始，通過部署于樣品類型和目標(biāo)核酸的樣品純化方法，來確保用于下游分析的核酸純度和產(chǎn)量。NGS文庫(kù)制備過程中發(fā)生的酶促反應(yīng)對(duì)所用樣品的數(shù)量和質(zhì)量較敏感。因此

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