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2023
12-28

直播答疑 | 細胞培養答疑專場
12月14日的直播中，普諾賽直播間為大家介紹了細胞黑點、細胞狀態變形、細胞空泡、聚團、脫落等常見問題，直播回放請至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細解答。如有其他問題，也歡迎大家在公眾號留言，我們將在線解答。消化時間過長會損傷細胞嗎？消化時間過長會導致細胞膜蛋白的改變，最直觀的表現就是消化后第二天漂浮細胞很多或者貼壁慢。胰酶消化不掉的，二次消化對細胞損傷小還是機械吹打對細胞損傷小？建議二次消化。細胞與細胞間的連接沒有通過酶切開的話，用移
2023
12-26

細胞學堂 | A-498細胞知識盤點
A-498（人腎癌細胞）細胞由Aaronson·S建立，是從一名52歲女性腎癌患者的腎組織中分離出的具有上皮形態的細胞系。該細胞系是一種合適的轉染宿主，在腫瘤研究中具有一定的應用價值，常作為腎細胞癌研究的模型。本期細胞學堂為大家整理了A-498細胞的培養條件與傳代、凍存步驟及常見應用，幫助您快速上手開展實驗。細胞形態A498細胞貼壁生長，呈上皮樣形態，細胞鋪開面積大，單位面積細胞總數量少，少量細胞有觸角；低密度時可觀察到單個細胞清晰的邊緣，密度大于100%時邊緣不清晰，細胞與細胞之間沒有間隙；A
2023
12-19

細胞學堂 | 實驗室細胞計數指南
細胞計數是實驗室中常見的一項操作，用于確定樣品中細胞的數量，判斷細胞數量是否滿足實驗需求。本期細胞學堂為大家整理了幾種常見的計數方法：人工手動計數法、自動細胞計數儀法，以及懸浮細胞和貼壁細胞在不同密度下的鏡下視野的參考范圍，幫助您快速上手開展實驗。1人工手動計數法即通過肉眼觀察顯微鏡視野中的細胞數量，從而進行統計。操作步驟1將計數板及蓋玻片擦拭干凈，并將蓋玻片蓋在計數板上；2輕輕吹打細胞懸液，使細胞均勻分布；吸出10μL-20μL左右的細胞懸液滴在蓋片邊緣，使細胞懸液充滿蓋玻片和計數板之間；3靜
2023
11-28

直播答疑 | 懸浮細胞培養要點解析
11月16日，普諾賽直播間為大家介紹了懸浮細胞的生長特點、培養注意事項，并通過THP-1、NK-92、NCI-H209三個細胞案例，深入講解了懸浮細胞的培養要點。直播回放可移步至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細解答。如有其他問題，也歡迎大家在推文底部留言，我們將在線解答。Q1傳代時，細胞密度比較低，但是培養基又變黃了，怎么辦？細胞培養過程中，如發現細胞量較少，但培養基變黃較快，可以從以下3個方面進行排查：?檢查培養基成分是否正常，如N
2023
11-28

細胞學堂 | 培養B16系列細胞必看知識點
B16系列細胞屬于小鼠黑色素瘤細胞系，是源自C57小鼠的一種皮膚癌細胞，常用于腫瘤生物學研究。本期細胞學堂為大家整理了B16系列細胞的培養方法與注意事項，B16細胞黑色素的形成原因及解決方法，幫助您快速上手開展實驗。01B16系列細胞培養方法培養條件RPMI-1640(PM150110)＋10%FBS(164210-50)＋1%P/S(PB180120)；生長特性貼壁生長，生長迅速，能產生黑色素；傳代方式0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化2-3min，推薦傳代比例1:3-1:4；凍存推薦凍存密度
2023
11-20

培養基成分的稱取、分裝及保存！
培養基成分的稱取：培養基的各種成分必須**稱取并要注意防止錯亂，*好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側，每種稱取完畢后，即移放于右側。稱取完畢后，還應進行一次檢查。培養基的分裝：培養基的分裝，應按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時*好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時，
2023
11-14

細胞學堂 | 手把手教你培養SV-HUC-1
SV-HUC-1(人輸尿管上皮永生化細胞)，是由猿猴空泡病毒40轉染至1名11歲男孩的泌尿道上皮細胞，而建立起來的永生化細胞系。其分化特性與正常細胞相似，培養簡單，可無限傳代，卻不屬于腫瘤細胞[1]。基礎信息?生長培養基：Ham'sF-12K＋10%FBS＋1%P/S?生長特性：貼壁，上皮細胞樣?推薦傳代比例：1:2-1:4?推薦換液頻率：2~3次/周?培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃?凍存條件：55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSOSV-HUC-1細胞正常生長細胞傳
2023
11-14

直播答疑 | 原代細胞培養常見問題及解決方案
原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首-次培養，也叫初代培養，是細胞系建立的第一步。在9月22日開播的“原代細胞常見問題解決方案”課程中，有很多老師就原代細胞培養問題提出了疑問。我們篩選出部分代表性問題，并作了詳細解答。臍靜脈內皮細胞需要包被嗎？選用什么包被比較好？臍靜脈內皮細胞建議包被，建議選用0.1%明膠包被，包被的細胞形態會比不包被的好看。角質細胞需要包被嗎？角質細胞生長類似上皮細胞，營養環境要求高，建議使用膠原蛋白包被。細胞原皿狀態很好，傳代后細胞邊界不清楚是什么原因？感覺虛化的很快。
2023
11-03

人單核細胞白血病細胞的研究與治療
人單核細胞白血病細胞是一種特殊的白血病細胞，它起源于單核細胞。這種疾病在人體血液中形成腫瘤，對患者的生命構成嚴重威脅。盡管科學家們已經進行了大量的研究，但人單核細胞白血病的發病機制仍未全明確，因此也缺乏有效的針對性治療方法。下面將探討細胞的特性、研究進展以及現有的治療方法。白血病細胞具有其生物學特性。首先，它具有粘附性，可以粘附到骨髓和其他組織的表面。其次，它具有遷移性，可以在骨髓和其他組織中自由移動。此外，細胞還可以逃避機體的免疫監控，使得疾病難以控制。近年來，科學家們對人單核細胞白血病細胞的
2023
10-23

細胞學堂 | 微血管內皮細胞知識盤點
微血管內皮細胞（microvascularendothelialcells,MVECs）構成了血液與組織液之間的物理屏障，而且在機體的凝血與抗凝血、致炎與抗炎及免疫應答等方面起著十分重要的作用，其體外培養模型廣泛應用于相關研究。但由于不同組織器官的微血管內皮細胞之間存在較大的異質性，同時微血管內皮細胞因解剖部位不同，在形態學、表型和功能上等方面也存在明顯異質性，不同來源的血管內皮細胞之間是不可相互替代的，主要包括腸、肺、心臟、腦、脈絡膜、視網膜、真皮微血管內皮細胞等。本期細胞學堂為大家整理了微血
2023
10-08

293T細胞：人胚腎細胞的理想模型
293T（人胚腎細胞）已成為生物醫學研究中的重要工具。由于其易于培養，具有高增殖能力，以及能穩定表達外源基因的特點，293T細胞系已成為基因克隆和基因功能研究的理想模型之一。人胚腎細胞（或稱293細胞）是由格倫·R·克拉克在1970年代初從一名4個月大的胎兒的腎臟中提取并建立的一種細胞系。這種細胞能很好的適應于各種實驗條件，在科學研究上有著廣泛的應用。293T細胞的特點之一是它們能在無特定動物血清的培養基中生長。這種細胞培養要求低，容易在生物反應器中大規模培養。它們也容易轉染，能夠高效地表達外源
2023
09-28

細胞學堂 | 如何判斷細胞狀態
培養細胞時，由于培養的環境各不相同，同時細胞各階段的形態也存在一定差異，沒有一個確定的參照物去比對，很多老師同學也無法確定自己所養細胞的狀態是否正常。那么如何判斷細胞狀態是正常還是異常呢？本期細胞學堂將詳介紹幾種常用的判斷方法，學會這幾招，輕松辨別細胞狀態！01如何判斷細胞活率臺盼藍染色法臺盼藍是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性，可以檢測出細胞是否存活。正常的活細胞，胞膜結構完整，能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍染成藍色。通常
2023
09-20

大鼠心肌細胞培養需要注意哪些問題
H9c2(2-1)大鼠心肌細胞是一株由Kimes·B和Brandt·B從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細胞株亞克隆得到的細胞株；H9c2(2-1)細胞表現出許多骨骼肌的特性。H9c2(2-1)細胞中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發生反應。如果培養基中的血清濃度下降到1%，H9c2(2-1)細胞融合發生得很快。培養大鼠心肌細胞時，需要注意以下幾點：1、鼠齡選擇：新生1～3d齡大鼠的心肌細胞在出生后3d內具有部分的增殖能力，而成年大鼠的心肌細胞則為終末分化細胞，不再具有分裂增殖能
2023
09-01

293T（人胚腎細胞）的特性與應用
293T細胞，也被稱為293T（人胚腎細胞），是一種廣泛應用于生物醫學研究的細胞系。這種細胞系源于人類胎兒的腎臟細胞，并通過遺傳工程改造獲得了一種能夠表達逆轉錄酶的突變，因此得名293T。項目將探討293T細胞的特性、應用以及在生物醫學研究中的重要地位。293T細胞具有許多理想的細胞系特征，使其在生物醫學研究中備受青睞。首先，293T細胞生長迅速，能夠在適宜的培養條件下迅速增殖。其次，293T細胞具有易于轉染的特性，這使得研究人員能夠方便地將外源性基因導入細胞，進行基因功能研究和基因治療研究。此
2023
08-24

4T1 （小鼠乳腺癌細胞）的研究及其在癌癥治療中的應用
乳腺癌是全球女性最常見的癌癥之一，對公眾健康構成了嚴重威脅。在多種乳腺癌亞型中，4T1（小鼠乳腺癌細胞）的生物學特性及腫瘤轉移潛能引起了科研人員的特別關注。4T1細胞來源于410-6乳腺癌細胞，其能在BALB/c小鼠中產生自發性的肺轉移，這一特性使其在研究乳腺癌轉移機制及探索新型治療策略方面成為一個有價值的模型。4T1（小鼠乳腺癌細胞）具有高度的侵襲性和轉移潛能，其通過激活Src通路、誘導上皮間質轉化（EMT）以及引發免疫逃避等機制促進腫瘤轉移。此外，4T1細胞還能產生大量的炎性細胞因子，如IL
2023
08-23

細胞學堂|肺泡上皮細胞知識盤點
肺中的支氣管經多次反復分枝成無數細支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。肺泡或肺的氣體交換表面由I型肺泡上皮(ATⅠ,AT1)、II型肺泡上皮(ATⅡ,AT2)和微血管內皮細胞組成。其中，ATⅠ細胞又稱小肺泡細胞，其主要作用是參與構成氣血屏障、進行氣體交換；ATⅡ細胞又稱大肺泡細胞，是肺泡上皮中的祖細胞，具有很強的增殖和分化潛能，可分化成ATⅠ，在維持肺臟穩態以及肺損傷修復過程中起著至關重要的作用。圖1肺泡模式圖圖2肺泡細胞的外觀：上皮I型細胞(I)、上皮II型細胞(
2023
08-18

小鼠腎小管上皮細胞使用時需要注意哪些
BV2(小鼠小膠質細胞)小鼠腎小管上皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等，以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素-D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。小鼠腎小管上皮細胞的注意事項：1、收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等
2023
08-16

文獻解讀|開發共價核酸適體用于新-冠病毒的檢測和抑制
核酸適體是一段能特異性識別靶標分子的單鏈DNA或RNA，已被廣泛用于各種生物醫學應用。然而，由于適體的構象動態易變，抗環境干擾能力弱，從而影響與靶標的結合親和力以及核酸適體-靶標復合物的穩定性，因此與商業抗體相比，核酸適體在檢測和治療方面的性能通常一般。湖南大學化學生物傳感與計量學國家重點實驗室的王丹博士為我們闡述了如何合理地設計親電標簽功能化的核酸適體通過點擊化學的共價偶聯技術實現新-冠病毒的靈敏檢測和侵染阻斷，進一步推動了適體在診斷、分子成像、疾病治療和其他生物醫學領域的應用。該研究于202
2023
08-15

人骨髓間充質干細胞提取方法
作為常見的干細胞類型，人骨髓間充質干細胞廣泛應用于科學研究和臨床治療。細胞具有分化潛能，可以分化為各種類型的細胞，如成骨細胞、成軟骨細胞和脂肪細胞等。它們在細胞替代治療、組織工程和再生醫學領域具有巨大的應用前景。下面將為您詳細介紹干細胞的提取方法。首先，我們需要對提取的細胞進行嚴格的質量控制。這包括細胞活性檢測、純度檢測和細胞計數。細胞活性檢測通常使用MTT實驗，將細胞與MTT試劑混合，觀察細胞的生長情況。純度檢測可以通過細胞計數和血球計數板計數來實現。細胞計數時，將細胞懸液加入血球計數板，使用
2023
08-11

直播答疑 | 三大難養細胞培養解析
6月29日，普諾賽就RAW264.7、SF9、NK-92這三個細胞進行了一場直播分享，分別詳細講解了三株細胞的培養方法及需要注意的問題。直播回放可以點擊普諾賽公眾號菜單欄【資料中心】-【往期直播回放】查看學習。本期直播答疑，從直播間的提問中，篩選出其中有代表性的問題，逐一進行解答。01問RAW264.7細胞如何傳代？用細胞刮刀對細胞有影響嗎？一定要吹下來嗎？吹不下來的是狀態不好的細胞嗎？RAW264.7細胞傳代方法：①培養基中的漂浮的細胞離心收集②輕拍培養瓶，將貼壁松散的細胞拍起來③用1ml的槍

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