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色譜柱的常用填充方法有哪些？2007/01/31

固定相填充的好壞，將直接影響柱效率.通常多用泵抽填充法，即把色譜柱的一端塞上玻璃棉，接真空泵，另一端接一漏斗，在抽吸下加入固定相，邊裝邊敲打色譜柱，至固定相不再進入為止。裝好后，塞上玻璃棉。裝柱要求要填充得均勻，緊密，切忌有空隙。

新裝填的色譜柱為什么要老化一段時間才能使用2007/01/31

裝填好的色譜柱，連接于儀器上后，應先試壓，試漏，而后在恒定的溫度下用載氣吹洗數小時后承受分析，一般稱此為柱子的老化過程。老化的目的是把固定相的殘存溶劑，低沸點雜質，低分子量固定液等趕走，使記錄器基線平直，并在老化溫度下使固定液在擔體表面有一個再分布過程，從而涂得更加均勻牢固。裝填好的色譜柱，經過老化一段時間后，柱效及性能均穩定了，這樣才可使用。

色譜柱失效后有哪些表現？其失敗原因是什么？2007/01/31

色譜柱失效主要表現為色譜分離不好和組分保留時間顯著變短。色譜柱失效的主要原因是：對氣固色譜來說是固定相的活性或吸附性能降低了，對氣液色譜來說，是使用過程中固定液逐漸流失所致。

如何選擇液相色譜儀？2007/01/31

一臺品質優良的液相色譜系統應從以下幾個方面考慮：一．主要技術指標優異：首先是如何看指標。液相色譜儀的指標很多，有泵的、檢測器的、色譜柱等等。我們認為要看主要技術指標，根據國家標準，儀器的主要指標有噪音，漂移，zui小檢測濃度，定性定量重復性等。這些指標都要放在系統，回路里去看，去比較。就是需要把各單元裝置都要聯接好，如接好色譜柱，進樣閥，并且要通上流動相。因為您在分析中也都是聯接好以后才可以進行分析的，而不是單單用個檢測器或是泵的。然后在這個基礎上，我們再去比較這些主要指標。1．噪音是指由儀器的

液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什么2007/01/31

1、篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。2、存在干擾峰，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子

色質聯用中毛細柱的選擇應注意什么問題2007/01/31

1、柱效要高2、熱穩定性好3、化學惰性強具體選擇應注意：1、柱極性。根據分析樣品選擇不同極性的柱子進行分析2、柱子內徑。內徑大小決定柱容量3、液膜厚度。分析樣品溫度一不一樣，對膜厚有不同要求，溫度高液膜要厚，溫度低液膜要薄4、柱長度。柱越長，柱效越高，分離效果越好，但也存在吸附問題，柱子過長，分析時間長，因此要根據樣品考慮柱子長度5、外涂層(柱體)的選擇6、另外還有儀器型號、分析對象等因素

液相色譜儀中反相 HPLC 柱子的清潔和再生2007/01/31

反相色譜是迄今在液相色譜中應用zui廣泛的技術，主要是因為它適用于分析極大多數的非極性物質和很多的可離子化的及離子化合物。大多數用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來分離的，含有疏水的機制也能以同樣的保留方式分離。固定相上還有少數物質，如混合相（例如苯基－己基）、末端封閉和非末端封閉種類和極性嵌入相－也存在于這些鍵合硅膠上。還有很多填料用于反相色譜，包括聚合物，聚合物表面涂上硅膠和氧化鋁，無機－有機混合物，涂層氧化鋯，和石墨化碳。不同種類的固

液相色譜柱的使用注意事項及再生2007/01/31

1、色譜柱的使用說明：（1）、色譜柱使用前注意事項：色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出，堵塞色譜柱。（2）、流動相：流動相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純，配流動相的水是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動相再經過0.45μm的濾膜過濾一次則更好，尤其是含鹽的流動

氣相色譜使用注意事項2007/01/31

一、進樣應注意問題手不要拿注射器的針頭和有樣品部位、不要有氣泡（吸樣時要慢、快速排出再慢吸，反復幾次，10ul注射器金屬針頭部分體積0.6ul，有氣泡也看不到，多吸1-2ul把注射器針尖朝上氣泡上走到頂部再推動針桿排除氣泡，（指10ul注射器，帶芯子注射器平感覺）進樣速度要快（但不易特快），每次進樣保持相同速度，針尖到汽化室中部開始注射樣品。二、安裝色譜柱1.安裝拆卸色譜柱必須在常溫下。2.填充柱有卡套密封和墊片密封，卡套分三種，金屬卡套，塑料卡套，石墨卡套，安裝時不易擰的太緊。墊片式密封每次按

如何正確選擇毛細管柱？2007/01/31

柱長度的選擇分辨率與柱長的平方根成正比。在其他條件不變的情況下,為取得加倍的分辨率需有4倍的柱長。較短的柱子適于較簡單的樣品,尤其是由那些在結構、極性和揮發性上相差較大的組分組成的樣品。一般來說，15m的短柱用于快速分離較簡單的樣品，也適于掃描分析；30m的色譜柱是zui常用的柱長，大多數分析在此長度的柱子上完成；50m、60m或更長的色譜柱用于分離比較復雜的樣品。應該注意，柱長增加分析時間也增加。柱內徑的選擇柱徑直接影響柱子的效率、保留特性和樣品容量。小口徑柱比大口徑柱有更高柱效，但柱容量更小

從那些方面可以簡單判別毛細管柱子的熱穩定性好壞2007/01/31

1、分配容量(或容量因子)K，好的柱子在高溫運行后，分配容量K不應有明顯的下降，否則，說明柱子的熱穩定性不好。2、理論塔板數n，熱穩定性好的柱子經受高溫后，理論塔板數應基本保持恒定3、柱子的極性。熱穩定性好的柱子，高溫前后極性變化不大，具體表現為保留指數I值沒有大的變化。4、噪聲。熱穩定性好的柱子在高溫下使用后，噪聲不能增加.5、柱子的去活層，毛細管柱子涂固定液前內部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質量好的毛細管柱子高溫后，去活層不應該變化，表現在對強極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。

為什么進樣器內的玻璃襯套會對色譜行為造成影響2007/01/31

進樣器內的玻璃襯套主要有下列作用：1、提供一個溫度均勻的汽化室，防止局部過熱。2、玻璃的惰性不如不銹鋼好，減少了在汽化期間樣品分解的可能性。3、易于拆換清洗，以保持清潔的汽化室表面，一些痕量非揮發性組分會逐漸積累殘存于汽化室，高溫下會慢慢分解，使基流增加，噪聲增大，通過清洗玻璃襯套可以消除這種影響。4、可根據需要選擇管壁厚度及內徑適宜的玻璃襯套，以改變汽化室的體積，而不用更換整個進樣加熱塊。從以上幾個方面可以知道玻璃襯套對色譜行為造成影響的原因。

色譜維修維護經驗2007/01/31

要分析和判斷色譜儀的故障所在，就必須要熟悉氣相色譜的流程和氣、電路這兩大系統，特別是構成這兩個系統部件的結構、功能。色譜儀的故障是多種多樣的，而且某一故障產生的原因也是多方面的，必須采用部分檢查的方法，即排除法，才可能縮小故障的范圍。對于氣路系統出的故障，不外乎是各種氣體（特別是載氣）有漏氣的現象、氣體不好、氣體穩壓穩流不好等等，氣路產生的“鬼峰”和峰的丟失較為普遍。另外，色譜柱的“老化”過程沒有充分或柱溫過高，產生的“液相遺失”等“鬼峰”也會頻頻出現。所以，首先應該解決氣路問題，若氣路無問題，

色譜柱中的流動相會排干嗎？2007/01/31

不少做色譜分離試驗的人遇到過這樣的情形：不慎未及時補充流動相，泵將溶劑瓶中的流動相吸干了，HPLC系統由此而停止工作了。如此情況是否會損壞色譜柱？泵是否已將色譜柱中所有流動相都排干了？色譜柱還能使用嗎？事實上，如果泵將溶劑瓶中的流動相吸干，并不會造成色譜柱的損壞。即使泵中充滿了空氣，泵也不會將空氣排入色譜柱。因為泵只能輸送液體，而不能輸送空氣。相比之下，另一個更可能發生的情況是忘記蓋上色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。同樣，整個色譜柱干涸的情況不太容易發生，多半可能只是色譜柱兩端的幾個

做 PGS／MS分析時，如何防止焦油狀污染物進入毛細柱2007/01/31

聚合物，尤其是一些含氮、硫及鹵素的高分子裂解時，常有焦油狀物質產生。為防止這種焦油狀物質進入毛細柱造成污染而使柱性能下降，可采用保護預柱，即在裂解器與毛細柱之間接一填充預柱，通過控制預柱溫度而使焦油狀物質滯留在預柱內，預注可置于GC氣化室內，這樣既容易控制溫度，又減少系統的死體積，當然，預柱填料需經常更換。

做 HPLC分析時，柱壓不穩定，原因何在如何解決2007/01/31

原因可能有：1、泵內有空氣，解決的辦法是清除泵內空氣，對溶劑進行脫氣處理；2、比例閥失效，更換比例閥即可。3、泵密封墊損壞，更換密封墊即可。4、溶劑中的氣泡，解決的辦法是對溶劑脫氣，必要時改變脫氣方法；5、系統檢漏，找出漏點，密封即可。6、梯度洗脫，這時壓力波動是正常的。

HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法2007/01/31

1、樣品量不足：解決辦法為增加樣品量2、樣品未從柱子中流出：可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子3、樣品與檢測器不匹配：根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器4、檢測器衰減太多：調整衰減即可。5、檢測器時間常數太大：解決辦法為降低時間參數6、檢測器池窗污染：解決辦法為清洗池窗。7、檢測池中有氣泡：解決辦法為排氣。8、記錄儀測壓范圍不當：調整電壓范圍即可。9、流動相流量不合適：調整流速即可。10、檢測器與記錄儀超出校正曲線：解決辦法為檢查記錄儀與檢測器，重作校正曲線。

使用PEEK（polyetheretherketone）管路和接頭需要注意什么問題？2007/01/31

如果經常需要改變流路或更換不同品牌的色譜柱，使用PEEK材料制成的管路和接頭會非常方便。PEEK管路容易連接；PEEK接頭不僅無需工具，手擰即可固定，而且容易調節錐箍之外的管路長度，方便與不同品牌或規格的色譜柱相連接。使用此類材料的管路需要注意的是：PEEK對鹵代烷烴和四氫呋喃的兼容性不好。雖然未觀察到上述溶劑溶解PEEK材料的明顯跡象，但PEEK遇到上述溶劑會變脆。另一個西藥考慮的因素是壓力限。不銹鋼管可耐受6000psi的壓力，但PEEK管只能耐受近4000psi（但多數HPLC應用系統壓力

如何平衡色譜柱？2007/01/31

平衡過程中，將流速緩慢地提高用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線（緩沖鹽或離子對試劑度如果較低，則需要較長的時間來平衡）色譜柱的再生進行色譜柱再生時，應使用一個謙價的泵，我們建議不使用您的液相色譜儀上的泵。表1建議用來沖洗的溶劑體積色譜柱尺寸柱體積所用溶劑的體積125-41.6ml30ml250-43.2ml60ml250-10-20ml400ml請根據下表選擇您的再生方法：極性固定相（如Si，NH2＊，DIOL基色譜填料）的再生：正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水＊＊非極性固定相（如反相色

HPLC六通閥進樣器的使用及保養2007/01/31

六通閥進樣器是液相色譜系統中的進樣器，它是由圓形密封墊(轉子)和固定底座(定子)組成。美國Rheodyne公司的六通閥進樣器zui為通用，各大HPLC儀器制造商均以此產品作為儀器的進樣器。工作原理：1、手柄位進樣(Load)位置時，樣品經微量進樣針從進樣孔注射進定量環，定量環充滿后，多余樣品從放空孔排出；2、將手柄轉動至進樣(Inject)位置時，閥與液相流路接通，由泵輸送的流動相沖洗定量環，推動樣品進入液相分析柱進行分析。雖然六通閥進樣器具有結構簡單、使用方便、壽命長、日常無需維修等特點，但正