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ELISA的試劑盒的固相載體2011/11/04

固相載體在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器，不參與化學反應?？勺鱁LISA中載體的材料很多，zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質的性能，抗體或蛋白質抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性，加之它的價格低廉，所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式。ELISA載體的形狀主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板zui為常用，于EILSA的產品稱為ELISA板，上標準的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標本的檢測，有制成8聯孔條或12聯孔條的，放入座架后，大

幾種常用植物培養基2011/11/04

組織培養是否成功，在很大程度上取決于對培養基的選擇。不同培養基有不同特點，適合于不同的植物種類和接種材料。開展組織培養活動時，應對各種培養基進行了解和分析，以便能從中選擇使用。下面介紹組織培養幾種常用培養基。1、MS培養基。MS培養基是目前普遍使用的培養基。它有較高的無機鹽濃度，對保證組織生長所需的礦質營養和加速愈傷組織的生長十分有利。由于配方中的離子濃度高，在配制、貯存、消毒等過程中，即使有些成分略有出入，也不致影響離子間的平衡。MS固體培養基可用來誘導愈傷組織，或用于胚、莖段、莖尖及花藥培養

培養基的質量判斷2011/11/04

1.外型:顏色、粉末細度都應該均勻。2.溶解性:培養基能夠*溶解，這樣可以避免培養基內營養成分的流失。3.pH值:pH值的測定也可以檢查培養基的批間差異。4.水分:培養基的營養成份很豐富，利于微生物的滋長，因此水分的含量控制可以延長有效期。5.冰點滲透壓:細胞必須生活在合適的滲透壓環境中；同時滲透壓值的測定也可以檢查培養基的批間差異。6.菌落總數:粉末培養基不是無菌制劑，培養基本身的營養成分很豐富，容易滋生微生物，因此菌落的控制可以延長有效期7.細胞生長試驗:可檢查細胞培養基是否有促生長的能力，

動物血清常見問題2011/11/01

血清是細胞培養中zui重要的元素之一。在實驗室操作中要注意及處理方法：1.血清保存:建議血清應保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。2.解凍血清的方法:建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規則地搖晃均勻。3.血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現，該如何處理?血清中沉淀物的出現有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成

血清的主要作用2011/11/01

血清指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。血清主要作用：1.提供基本營養物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。2.提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質激素、類固醇激素等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3.提供結合蛋白：結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。4.提供促接觸和伸展因子使細胞貼

血清素2011/11/01

血清素重吸收抑制劑就是5-羥色胺重吸收抑制劑，簡稱SSRIs，百憂解（鹽酸氟西汀）的實質，是新一類的效果好而副作用較小的抗抑郁藥物。是體內產生的一種神經傳遞素；不存在于食物中。但有著作表明有營養物質可參與合成血清素，這些營養物質包括色氨酸（一種氨基酸），Ω-3脂肪酸，鎂和鋅。血清素是調節神經活動的一種重要物質。有些肌體組織當受到某些藥物作用時，可以釋放出5-羥色胺，例如一個利血平分子可以使受作用的組織釋放出幾百個5-羥色胺分子，因而產生利血平的一系列生理作用。作為自體活性物質，約90%合成和分布

三點鑒定抗血清質量2011/11/01

抗血清的質量直接影響分析方法的特異性和靈敏度。用于鑒定抗血清質量的參數主要有幾項：1．親和性（affinity）是指抗體分子上一個抗原結合部位與相應的抗原決定簇之間的結合強度，常用親和常數Ka表示。Ka是正／逆向反應速度常數的比值，單位為稀釋度單位（L／mol或LM-1），表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原—抗體結合下降50％；而Ka的倒數為解離常數（Kd），其單位為濃度單位（mol／L）。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準確度，需選用Ka值高（109一1012L／mo1）的抗血清

血清保存時需注意的事項2011/11/01

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。我們在保存血清的時候需要注意以下幾點，以便順利完成您的實驗：1、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡）,使溫度與成分均一,減少沉淀的發

培養基的鑒別2011/11/01

一、EMB培養基:常用于鑒別E.coli蛋白胨10g乳糖5g蔗糖5g磷酸氫二鉀2g伊紅Y0.4g美藍0.065g蒸餾水1000gpH7.2二、2216E培養基配方:分離海洋微生物的培養基配方,蛋白胨5g酵母膏1g磷酸高鐵0.01g瓊脂15~20g陳海水1000ml煮沸氫氧化鈉（5%）的溶液調PH值7.6~7.8.三、伊紅美藍培養基:可用于檢測水中大腸桿菌的含量,首先按以下組成配制基礎培養基,蛋白胨10gNaCl5g,瓊脂15~20g.將上述物質溶解后，用蒸餾水定容至1000mL，調節pH為7.6

使用無血清培養基2011/10/27

在即將出版的3月份的《生物技術趨勢》（TrendsinBiotechnology）雜志中，來自責任醫藥醫師協會（PhysiciansCommitteeforResponsibleMedicine）的科學家和醫生倡導大家都使用無血清的培養基在實驗室中培養細胞。平時科研人員所使用的胎牛血清是通過穿刺胎牛心臟獲得的，在這個過程中通常不采用任何麻醉劑。zui近，隨著科技不斷進步人類細胞可以在沒有動物血清的培養基中生長，這讓科學家和研究人員在做細胞培養的時候可以更加安全，同時也更加人道。文章的作者Megh

生物培養基2011/10/27

絕大多數培養基是建立在平衡鹽溶液（BSS）基礎上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。zui廣泛應用的培養基是Eearle`sMEM的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規含有無機鹽和代謝添加劑。MEM/F12這兩種培養基各取1/2，形成神經生物學zui通用的培養基。Dulbecco`s改良培養基——DMEM，現應用于快速生長的細胞，同MEM含有相同的營養成分，但濃度高出2~4倍。選擇某種培養基，應仔細了

培養基種類與特點2011/10/27

培養基有許多種類，根據不同的植物和培養部位及不同的培養目的需選用不同的培養基。培養基的產生zui早是Sacks（1680）和Knop（1681），他們對綠色植物的成分進行了分析研究，根據植物從土中主要是吸收無機鹽營養，設計出了由無機鹽組成的Sacks和Knop溶液，至今仍在作為基本的無機鹽培養基得到廣泛應用。以后根據不同目的進行改良產生了多種培養基，White培養基在40年代用得較多，現在還常用。而到60和70年代則大多采用MS等高濃度培養基，可以保證培養材料對營養的需要，并能生長快、分化快，且

天然細胞培養基——血清 天然細胞培養基——血清 2011/10/27

天然培養基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基，如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。組織培養技術建立早期，體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由于天然培養基制作過程復雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養基所替代。目前廣泛使用的天然培養基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是*。血清種類,目前用于組織培養的血清主要是牛血清，培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因：來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理

細胞培養基的幾點基本要求2011/10/27

現代生物技術均通過細胞作為載體來進行，無論是基因治療、干細胞、克隆技術都在細胞內進行的。細胞的生長需要一定的營養環境，用于維持細胞生長的營養基質稱為培養基，即指所有用于各種目的的體外培養、保存細胞用的物質，就其本意上講為人工模擬體內生長的營養環境，使細胞在此環境中有生長和繁殖的能力。它是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。細胞培養基其組成成分主要有：水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機離子及其他一些入核酸降解物、激素等。細胞培養基的基本要求---體外培養的細胞直接生活在培養基中，因此培養基

ELISA質量控制--質量控制血清2011/10/26

ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩定、易保存、操作簡便、結果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測，既可以做定性試驗也可以做定量分析等優點，已廣泛應用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領域。ELISA的影響因素較多，加強質量管理才能充分發揮其方法學的優點。質控血清是已有靶值的血清，在每次的常規檢驗中加入一份或數份，通過所得結果來了解本次檢驗的情況。質控血清檢驗的結果如能控制其誤差在一定范圍內，就說明該檢驗沒有發生不允許的誤

培養基的簡介2011/10/26

培養基（Medium）是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料，一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養基還含有抗菌素、色素、激素和血清。培養基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后，易被細菌污染或分解變質，因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基（如組織培養基），較長時間的貯存，必須放在2~6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管，現在均改制成粉末。

近年來新建立的與補體有關的血清學試驗2011/10/26

（一）單擴散溶血試驗（singleradialhemolysis）又稱固相溶血試驗。根據抗原（如綿羊紅細胞）與相應抗體相遇形成的免疫復合物，可通過傳統途徑激活補體，使綿羊紅細胞發生溶血，其溶血程度與特異抗體滴度成正比的原理設計而成。現以鼻疽為例說明其操作原則。取鼻疽抗原致敏的綿羊紅細胞加入融化的瓊脂糖凝膠中，混合均勻，澆注反應盤，制成致敏的反應盤，打孔，隨后將被檢血清和補體的等量混合物加入到上述致敏反應盤孔中，于室溫下感作3～4小時，陽性者，在孔的周圍發生明顯的溶血環，其直徑在8.1mm以上。（

配制培養基的原則2011/10/26

1、選擇適宜的營養物質:總體而言，所有微生物生長繁殖均需要培養基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源，但由于微生物營養類型復雜，不同微生物對營養物質的需求是不一樣的，因此首先要根據不同微生物的營養需求配制針對性強的培養基。自養型微生物能從簡單的元機物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質、核酸、維生素等復雜的有機物，因此培養自養型微生物的培養基*可以（或應該）由簡單的無機物組成。例如，培養化能自養型的氧化硫硫桿菌（Thiobacillusthiooxdans）的培養基組成見表3.9。在該培養基配

培養基的滅菌原理及方法2011/10/26

所謂滅菌就是殺死一切微生物，包括微生物的營養體和芽孢，這一概念不同于消毒。后者是指消滅一切致病微生物（病原體）。在發酵生產中為什么要滅菌呢？主要有以下幾點原因：如不滅菌，會使生物反應的基質或產物，因雜菌的消耗而損失，造成生產能力的下降；雜菌也會產生代謝產物，這就使產物的提取更加困難，造成得率降低，產品質量下降；有些雜菌會分解產物，使生產失?。浑s菌大量繁殖后，會改變反應液的pH值，使反應異常；如果發生噬菌體污染，生產菌細胞將被裂解，使生產失敗。一、培養基滅菌的原理和方法:滅菌的方法很多，在實驗室可

抗血清鑒定2011/10/26

抗血清的質量直接影響分析方法的特異性和靈敏度。用于鑒定抗血清質量的參數主要有幾項：1．親和性（affinity）是指抗體分子上一個抗原結合部位與相應的抗原決定簇之間的結合強度，常用親和常數Ka表示。Ka是正／逆向反應速度常數的比值，單位為稀釋度單位（L／mol或LM-1），表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原—抗體結合下降50％；而Ka的倒數為解離常數（Kd），其單位為濃度單位（mol／L）。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準確度，需選用Ka值高（109一1012L／mo1）的抗血清