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2020年06月16日 15:50:12
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電泳儀是實現電泳分析的儀器。一般由電源、電泳槽、檢測單元等組成。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,據此可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組分分析或單個組分提取制備。
【化工儀器網 技術指導】電泳儀是實現電泳分析的儀器。一般由電源、電泳槽、檢測單元等組成。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,據此可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組分分析或單個組分提取制備。
常用電泳設備的基本結構包括:電源、電泳槽及附加裝置,結構配置分為垂直和水平兩類電泳儀。
電泳儀的工作原理:
在溶液中能吸附帶電質點或本身帶有可解離基團的物質顆粒,如蛋白質、氨基酸等,在一定的pH值條件下,于直流電場中必然會受到電性相反的電極吸引而發生移動。不同物質的顆粒在電場中的移動速度除與其帶電狀態和電場強度有關外,還與顆粒的大小、形狀和介質黏度有關。根據這一特征,應用電泳法便可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組分分析或單個組分提取制備,電泳儀正是基于上述原理設計制造的。
電泳的影響因素很多,主要有被分離物質的帶電荷量多少、電場強度、緩沖液的pH值和離子強度及支持介質的化學惰性。
電泳儀的分類:
根據電泳中是否使用支持介質分為自由電泳和區帶電泳。
自由電泳不使用支持介質,電泳在溶液中進行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳指懸浮在溶液中的帶電粒子(如各種細胞)通電后全部移動,不出現界面,如顯微電泳等。自由界面電泳中被分離物質集中在某一層,形成各自的界面而進行定性或定量分析。自由界面電泳需要昂貴精密的電流儀器,僅在少數特殊電泳如等電聚焦電泳和等速電泳中使用。
區帶電泳都使用支持介質,根據支持介質不同分為濾紙電泳、醋纖膜電泳、薄層電泳和凝膠電泳等。此外,根據支持介質的裝置形式不同又可分為水平板式電泳、垂直板式電泳、垂直盤狀電泳、毛細管電脈、橋形電泳和連續流動電泳等。
常見的幾種電泳儀有:
1. 全自動熒光/可見光雙系統電泳儀
具有熒光/可見光雙系統,使用熒光試劑項目如CK、LD同工酶。優點靈敏度、準確度高且采用高壓、低溫系統,速度非常快。
2. 全自動醋纖膜電泳儀
為可見光單系統,使用醋纖膜電泳片,優點為自動化程度更高。多用于臨床常規血清蛋白電泳分析。
3. 全自動瓊脂糖電泳儀
為可見光單系統,使用瓊脂糖凝膠電泳膠片,優點為靈敏度高,可用于低濃度蛋白檢驗,如尿蛋白及腦脊液蛋白,同工酶的分離效果也相當不錯,所能做項目較多且靈敏度較高。
4. 全自動電泳分析系統
該電泳儀集中了上述儀器的優點,自動點樣、電泳、呈色(或染色、脫色)、烘干。可用各種電泳片,包括瓊脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可見光及熒光呈色雙系統,是一種較理想的電泳儀。
電泳儀的使用注意事項:
1. 電泳儀通電進入工作狀態后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2. 儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,以防短路現象發生,雖然儀器內部附設有保險絲,但短路現象仍有可能導致儀器損壞。
3. 由于不同介質支持物的電阻值不同,電泳時所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故不同介質支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。
4. 在總電流不超過儀器額定電流時(大電流范圍),可以多槽關聯使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5. 某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩壓狀態下空載開機,但在穩流狀態下必須先接好負載再開機,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機器損壞。
6. 使用過程中發現異常現象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進行檢修,以免發生意外事故。
電泳儀可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組分分析或單個組分提取制備,是實驗室檢驗和科研研究不可或缺的儀器。
資料來源:上海惠誠生物科技有限公司
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