化工儀器網手機版
移動端訪問更便捷
藥品質量檢測方法：薄層色譜法
2022年08月24日 11:53:39
來源：化工儀器網 作者：小王 點擊量：8681
薄層色譜法是一種以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動相，對混合樣品進行分離、鑒定和定量的層析分離技術，能夠快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質，因此自50年代發展起來之后，一直被應用在生物研究、藥物研究、環境化學等多個領域。
【化工儀器網 行業百態】薄層色譜法是一種以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動相，對混合樣品進行分離、鑒定和定量的層析分離技術，能夠快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質，因此自50年代發展起來之后，一直被應用在生物研究、藥物研究、環境化學等多個領域。
從技術本身優勢來說，薄層色譜法對被分離物質的性質沒有限制，因此使用范圍較廣。并且平面薄層具有多路柱效應，因此理論上可以進行多個樣品的分離。與此同時，得力于現代技術以及相關儀器的進步，在儀器化、自動化的今天，薄層色譜的分辨率及重現性也得到了了顯著提升。
準備工作
薄層色譜法需要要準備薄層板(按支持物的材質分為玻璃板、塑料板或鋁板等；按固定相種類分為硅膠薄層板、鍵合硅膠板、微晶纖維素薄層板、聚酰胺薄層板、氧化鋁薄層板等；按固定相粒徑大小分為10~40µm普通薄層板和5~10µm高效薄層板)、點樣器(一般釆用微升毛細管或手動、半自動、全自動點樣器材)、展開容器(上行展開一般用適合薄層板大小的專用平底或雙槽展開缸，展開時須能密閉；水平展開用專用的水平展開槽)、顯色裝置、檢視裝置。
薄層板制備
需要注意的是，市售薄層板與自制薄層板的準備工作并不相同。市售薄層板臨用前一般應在 110℃ 活化 30 分鐘(聚酰胺薄膜不需活化)。如在存放期間被空氣中雜質污染，使用前可以用三氯甲烷、甲醇或二者的混合溶劑在展開缸中上行展開預洗、晾干后，再進行活化，并置干燥器中備用。其中，鋁基片薄層板、塑料薄層板可根據需要剪裁，但須注意剪裁后的薄層板底邊的固定相層不得有破損。
而自制薄層板操作就較為復雜了。除另有規定外，首先將 1 份固定相和 3 份水(或加有黏合劑的水溶液，如 0.2%~0.5%羥甲基纖維素鈉水溶液，或為規定濃度的改性劑溶液)在研缽中按同一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中。然后，在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布(厚度為 0.2~0.3mm)，完成后取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干后，在 110℃ 烘 30 分鐘，隨即置于有干燥劑的干燥箱中備用。需要注意的是，自制薄層板使用前需檢查其均勻度，方法是在反射光及透視光下檢視，確保表面應均勻、平整、光滑，并且無麻點、無氣泡、無破損及污染。
點樣與展開
點樣無特殊規定需在潔凈干燥的環境中進行，用點樣器點樣于薄層板上。一般為圓點狀或窄細的條帶狀，點樣基線距底邊 10~15mm，高效板一般基線離底邊 8~10mm。圓點狀直徑一般不大于 4mm，高效板一般不大于 2mm。接觸點樣時注意勿損傷薄層表面。條帶狀寬度一般為 5~10mm，高效板條帶寬度一般為 4~8mm，可用專用半自動或自動點樣器械噴霧法點樣。點間距離可視斑點擴散情況以相鄰斑點互不干擾為宜，一般不少于 8mm，高效板供試品間隔不少于 5mm。
之后將點好供試品的薄層板放入展開缸中，浸入展開劑的深度為距原點 5mm 為宜，密閉保存，待溶劑前沿達到規定的展距，取出薄層板并晾干。需要注意的是，展開前如需要溶劑蒸氣預平衡，可在展開缸中加入適量的展開劑后密閉，一般保持 15~30 分鐘即可。當溶劑蒸氣預平衡后，應迅速放入載有供試品的薄層板并立即密閉。如需使展開缸達到溶劑蒸氣飽和的狀態，則須在展開缸的內壁貼與展開缸高、寬同樣大小的濾紙，一端浸入展開劑中，密閉一定時間，使溶劑蒸氣達到飽和再如法展開。
顯色與檢視
一般情況下，有顏色的物質可以再在可見光環境下直接檢視，無色物質則需先進行顯色。顯色依據物質不同采取的方法也不同，一般采用噴霧法或浸漬法佐以顯色劑或者直接通過加熱顯色來實現。另外，如果物質帶有熒光或顯色后可激發產生熒光，可以借助紫外光燈(365nm 或 254nm)來完成熒光斑點觀察的工作，對于在紫外光下有吸收的成分，可用帶有熒光劑的薄層板(如硅膠 GF254 板)，在紫外光燈(254nm)下觀察熒光板面上的熒光物質淬滅形成的斑點。
系統適用性試驗
按各品種項下要求對實驗條件進行系統適用性試驗，即用供試品和標準物質對實驗條件進行試驗和調整，應符合規定的要求。
鑒別
鑒別的過程一般通過對比供試品色譜圖中所顯斑點的位置和顏色(或熒光)與標準物質色譜圖的斑點一致性來實現，必要時化學藥品可采用供試品溶液與標準溶液混合點樣、展開，與標準物質相應斑點應為單一、緊密斑點。除此之外，還可以通過薄層色譜掃描儀進行掃描來實現鑒別、檢查或含量測定的工作。具體來說即用一定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜中可吸收紫外光或可見光的斑點，或經激發后能發射出熒光的斑點進行掃描，然后將掃描得到的圖譜及積分數據用于鑒別、檢查或含量測定。
相關閱讀 Related Reading
查看更多+-
中國食品藥品檢定研究院就“中國食品藥品檢定研究院2025年專項設備購置第三批”發布招標公告，預算1540萬元。2025-07-08 09:08:12
-
四川省科學技術廳發布了《四川省重大科研基礎設施和大型科研儀器開放共享管理辦法》，提升四川省科技資源的使用效率，為科技創新和成果轉化...2025-07-05 10:29:54
-
預算1442.4萬元 康復大學神經康復實驗室建設設備采購項目
近日，康復大學委托盛和招標代理有限公司就“康復大學神經康復實驗室建設設備采購項目(三)”進行公開招標，項目編號SDGP370000...2025-07-03 09:15:20 -
中國熱帶農業科學院研究團隊利用液相色譜質譜技術在植物源食品中水溶性農藥鹽酸嗎啉胍殘留檢測技術研究方面取得突破進展。2025-07-02 16:41:06
-
項目名稱：中石化（天津）石油化工有限公司2025年化驗計量部化驗分析儀器項目,項目編號：0712-254052503007,招標范...2025-07-01 11:33:01
-
北京化工大學就“北京化工大學級聯矩陣小分子分析工作站系統采購項目”發布招標公告，預算190萬元。2025-07-01 10:53:51
版權與免責聲明
- ①凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其他方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- ②本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- ③如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
