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　　β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯又叫阿樸胡蘿卜素酸乙酯、天然橙 7 號或阿樸酯等，是類胡蘿卜素中一種含氧的阿樸胡蘿卜素類化合物，在食品工業中主要應用于食用油脂、人造奶油、果醬、果凍及飲品類產品的著色。在飼料工業中廣泛應用于肉禽，尤其是肉雞的皮膚、腳脛、脂肪的著色以及禽類蛋黃的著色，在目標組織中沉積率較高，著色效果顯著高于β-阿樸-8′-胡蘿卜素醛及萬壽菊提取物。部分文獻表明，家禽日糧中添加一定量的β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯可提高家禽機體免疫力，促進雛禽發育。
 

　　β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯使用廣泛、添加混亂、檢測標準缺失、養殖者認知匱乏、不利監管等問題。一是禽飼料中使用廣泛。2019年至今，貴州省獸藥飼料檢測所累計檢測11個省禽飼料 409 批，β-阿樸-8’-胡蘿卜酸乙酯檢出率 24.7%，配合飼料、濃縮飼料及添加劑預混合飼料折算為日糧含量主要在2.0～10.0mg/kg。二是添加劑中未檢出。累計檢測添加劑及混合型添加劑24批，均未檢出β-阿樸-8’-胡蘿卜酸乙酯。添加劑中添加會增加成本，在養殖者無需求，不會添加或添加廉價的著色劑。三是沒有法定檢測方法標準，國內尚無飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯含量檢測推薦性國家標準或行業標準，各級管理部門無法開展執法檢驗；四是使用現狀混亂無規律。養殖者對添加階段、添加量、添加配比、添加時間、成色效果的使用沒有標準。因此，建立一種快速、準確測定飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯含量的標準方法，填補技術空白，有利于行業主管部門開展飼料中著色劑規范使用監管工作，指導安全、科學、綠色養殖，確保飼料和禽產品的質量安全，引導社會健康消費，保障人民的身體健康，推動產業高質量發展。
 

　　本文件按照GB/T 1.1-2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。
 

　　本文件描述了飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的高效液相色譜測定方法。本文件適用于配合飼料、濃縮飼料、精料補充料、添加劑預混合飼料和混合型飼料添加劑中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的測定。
 

　　本文件配合飼料、濃縮飼料、精料補充料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的檢出限為0.15mg/kg、定量限為0.50mg/kg，添加劑預混合飼料、混合型飼料添加劑中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的檢出限為1.5mg/kg、定量限為5.0mg/kg。
 

　　原理：
 

　　試樣中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯經水分散、乙醇和二氯甲烷提取、固相萃取柱凈化，用高效液相色譜儀檢測，外標法定量。
 

　　儀器設備：
 

　　1.高效液相色譜儀：配紫外檢測器或二極管陣列檢測器。
 

　　2.分析天平：感量為0.1g和0.00001g。
 

　　3.離心機：轉速不低于8000r/min。
 

　　4.超聲波清洗儀。
 

　　5.固相萃取裝置。
 

　　6.氮吹儀。
 

　　高效液相色譜參考條件：
 

　　高效液相色譜參考條件如下：
 

　　a)色譜柱：Waters Symmetry® C18柱2，柱長250mm，內徑4.6mm，粒徑5μm，或性能相當者；
 

　　b)柱溫：30℃；
 

　　c)檢測波長：445nm；
 

　　d)流動相：乙腈+甲醇= 20+80；
 

　　e)流速：1.0mL/min；
 

　　f)進樣量：20µL。
 

　　精密度：
 

　　在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過該算術平均值的10%。
 

　　更多詳情請見附件。