Dowex離子交換色譜填料

北京吉瑞森科技有限責(zé)任公司&南通海箬化學(xué)有限公司

    DOWEX系列離子交換色譜分離樹(shù)脂有強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂兩大類，每一類又根據(jù)交聯(lián)度（即DVB%）的不同劃分為3個(gè)小類，分別以“×2”、 “×4”與“×8”表示，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步提供3個(gè)粒度范圍可供選擇，即150-300μm（50-100目）、75-150μm（100-200目）以及35-75μm（200-400目），共計(jì)18個(gè)樹(shù)脂牌號(hào)。此外，Dow化學(xué)公司又提供了一個(gè)雙功能基離子交換色譜分離樹(shù)脂——DOWEX Retardion 11A8 50 - 100 mesh（含弱酸基團(tuán)與強(qiáng)堿基團(tuán)），因此，本系列產(chǎn)品共有19個(gè)牌號(hào)的樹(shù)脂可供客戶選擇。顯然，不同交聯(lián)度的樹(shù)脂含水量不一，體積交換量、物質(zhì)擴(kuò)散的阻力各異，如此寬泛的產(chǎn)品范圍豐富了客戶的試用選擇，可以針對(duì)具體的應(yīng)用優(yōu)選出適宜的色譜分離樹(shù)脂。

    DOWEX系列離子交換色譜分離樹(shù)脂的骨架材料均為苯乙烯——二乙烯苯，采用特殊的懸浮聚合工藝大規(guī)模制備而得，具有良好的化學(xué)、物理穩(wěn)定性。易裝柱，目標(biāo)組份擴(kuò)散阻力小，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。因此，DOWEX系列離子交換色譜分離樹(shù)脂不僅可以滿足實(shí)驗(yàn)室食品、藥品等精細(xì)化工產(chǎn)品的小試工藝開(kāi)發(fā)，也使得工藝的放大更為輕松。

樹(shù)脂牌號(hào) 酸堿性 粒度范圍 

μm 出廠離子形態(tài) 含水量 

% 體積交換量 

eq/L

DOWEX 50W×2 強(qiáng)酸性 150-300 H+ 74-82 0.6

DOWEX 50W×2 強(qiáng)酸性 75-150 H+ 74-82 0.6

DOWEX 50W×2 強(qiáng)酸性 35-75 H+ 74-82 0.6

DOWEX 50W×4 強(qiáng)酸性 150-300 H+ 74-82 1.1

DOWEX 50W×4 強(qiáng)酸性 75-150 H+ 74-82 1.1

DOWEX 50W×4 強(qiáng)酸性 35-75 H+ 74-82 1.1

DOWEX 50W×8 強(qiáng)酸性 150-300 H+ 74-82 1.7

DOWEX 50W×8 強(qiáng)酸性 75-150 H+ 74-82 1.7

DOWEX 50W×8 強(qiáng)酸性 35-75 H+ 74-82 1.7

DOWEX 1×2 強(qiáng)堿性 150-300 Cl- 65-75 0.7

DOWEX 1×2 強(qiáng)堿性 75-150 Cl- 70-80 0.6

DOWEX 1×2 強(qiáng)堿性 35-75 Cl- 70-80 0.6

DOWEX 1×4 強(qiáng)堿性 150-300 Cl- >50 1.0

DOWEX 1×4 強(qiáng)堿性 75-150 Cl- 55-63 1.0

DOWEX 1×4 強(qiáng)堿性 35-75 Cl- 55-63 1.0

DOWEX 1×8 強(qiáng)堿性 150-300 Cl- 43-48 1.2

DOWEX 1×8 強(qiáng)堿性 75-150 Cl- 39-45 1.2

DOWEX 1×8 強(qiáng)堿性 35-75 Cl- 39-45 1.2

DOWEX Retardion 11A8 50-100mesh 弱酸、強(qiáng)堿性 150-300 -COOH –N(CH3)3 43-48 1.1

1.2

Dowex離子交換色譜填料

離子交換層析法分離氨基酸

實(shí)驗(yàn)原理

離子交換層析法主要是根據(jù)物質(zhì)的解離性質(zhì)的差異而選用不同的離子交換劑進(jìn)行分離的方法。各種氨基酸分子的結(jié)構(gòu)不同，在同一pH時(shí)與離子交換樹(shù)脂的親和力有差異，因此可依據(jù)親和力從小到大的順序被洗脫液洗脫下來(lái)，達(dá)到分離的效果。

試劑 和器材

一、 試劑 與材料

苯乙烯磺酸鈉型樹(shù)脂（強(qiáng)酸1×8，100—200目）；2mol/L鹽酸溶液；2mol/L氫氧化鈉溶液。

標(biāo)準(zhǔn)氨基酸溶液：天冬氨酸、賴氨酸和組氨酸均配制成2mg/mL的0.1mol/L的鹽酸溶液。

混合氨基酸溶液：將3種標(biāo)準(zhǔn)氨基酸溶液按1∶2.5∶10的比例混合。

檸檬酸-氫氧化鈉-鹽酸緩沖液（pH5.8，鈉離子濃度0.45mol/L）：取檸檬酸（C6O7H8?H2O）14.25g，氫氧化鈉9.30g和濃鹽酸5.25mL溶于少量水后，定容至500mL，冰箱保存。

顯色劑：2g的水合茚三酮溶于75mL乙二醇單甲醚中，加水至100mL。

二、器材

20cm×1cm層析管; 恒壓洗脫瓶; 部分收集器; 分光光度計(jì)。

操作方法

一、樹(shù)脂的處理

將干的強(qiáng)酸型樹(shù)脂用蒸餾水浸泡過(guò)夜，使之充分溶脹。用4倍體積的2mol/L的鹽酸浸泡1小時(shí)，傾去清液，洗至中性。再用2mol/L的氫氧化鈉處理，做法同上。后用欲使用的緩沖液浸泡。

二、裝柱

取直徑1cm,長(zhǎng)度10－12cm的層析柱。將柱垂直至于鐵架上。自頂部注入上述經(jīng)處理的樹(shù)脂懸浮液，關(guān)閉層析柱出口，待樹(shù)脂沉降后，放出過(guò)量溶液，再加入一些樹(shù)脂，至樹(shù)脂沉降至8 ~ 10cm的高度即可。

三、氨基酸的洗脫

用pH5.8的檸檬酸緩沖液沖洗平衡交換柱。調(diào)節(jié)流速為0.5mL/min，流出液達(dá)到床體積的4倍時(shí)即可上樣。由柱上端仔細(xì)加入氨基酸的混合液0.25—0.5mL，同時(shí)開(kāi)始收集流出液。當(dāng)樣品液彎月面靠近樹(shù)脂頂端時(shí)，即刻加入0.5mL檸檬酸緩沖液沖洗加樣品處。待緩沖液彎月面靠近樹(shù)脂頂端時(shí)，再加入0.5mL緩沖液。如此重復(fù)兩次，然后用滴管小心注入檸檬酸緩沖液（切勿攪動(dòng)床面），并將柱與洗脫瓶和部分收集器相連。開(kāi)始用 試管 收集洗脫液，每管收集1mL，共收集60—80管。

四、氨基酸的鑒定

向各管收集液中加1mL水合茚三酮顯色劑并混勻，在沸 水浴 中準(zhǔn)確加熱15min后冷卻至室溫，再加入1.5mL的50%乙醇溶液。放置10分鐘。以收集液第2管為空白，測(cè)定A570波長(zhǎng)的光吸收值，以光吸收值為縱坐標(biāo)，以洗脫液體積為橫坐標(biāo)繪制洗脫曲線。以已知3種 氨基酸 的純?nèi)芤簶悠罚瓷鲜龇椒ê蜅l件分別操作，將得到的洗脫液曲線與混合 氨基酸 的洗脫曲線對(duì)照，可確定3個(gè)峰的大致位置及各峰為何種氨基酸。

Dowex離子交換色譜填料

WATERS、RESTEK、COSMOSIL、YMC、SIMON等色譜柱和色譜填料、固相萃取柱、氘燈等 
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