建模方法
3﹪Pelltobarbitalum Natricum 50 mg/kg腹腔注射麻醉。然后將大鼠固定于腦立體定位儀上,頭部去毛,常規(guī)消毒。無(wú)菌條件下,沿正中線切開(kāi)大鼠顱頂皮膚,剝離骨膜,暴露前囟。以前囟為準(zhǔn),根據(jù)包新民[10]等著大鼠腦立體定位圖譜,確定右側(cè)黑質(zhì)二坐標(biāo):
①前囟后5.2 mm,正中線右側(cè)1.0 mm,硬膜下9.0 mm。
②前囟后5.2 mm,正中線右側(cè)2.5 mm,硬膜下8.5 mm。
手術(shù)要求部位小心鉆開(kāi)顱骨,用5 μL微量進(jìn)樣器將6-OHDA(溶于含0.2﹪維C的生理鹽水中,即秤量藥品抗壞血酸0.001 g,溶于生理鹽水0.5 mL中)注入右側(cè)黑質(zhì)部(以1.0 mm/min速度緩慢進(jìn)針),每孔3 μL,注射速度為1 μL/min,注射完畢后留針5 min,然后以1.0 mm/min速度緩慢退針。手術(shù)完成后,用醫(yī)用明膠海綿填塞顱骨孔,縫合切口皮膚,肌肉注射霉素7天,待動(dòng)物清醒后放回飼養(yǎng)籠中飼養(yǎng)。假手術(shù)組只注射0.2﹪維C的生理鹽水,正常對(duì)照組只捆綁動(dòng)物,不作任何處理。10 d后,以腹腔注射APO 0.5 mg/kg誘發(fā)大鼠向一側(cè)旋轉(zhuǎn),記錄開(kāi)始旋轉(zhuǎn)至30 min內(nèi)的旋轉(zhuǎn)圈數(shù),以旋轉(zhuǎn)圈數(shù)平均>7次/min者為合格的PD模型。
將成功PD模型大鼠給予腹腔注射L-dopa + 芐絲肼(50 mg/kg L-dopa和12.5 mg/kg芐絲肼,即L-dopa和芐絲肼溶于含0.05%的乙醇和0.1﹪的抗壞血酸的注射用水中,配成10 mg/mL),每日兩次,連續(xù)2周。正常對(duì)照組、假手術(shù)組給予腹腔注射等量的含0.05%的乙醇和0.1%的抗壞血酸的注射用水,每日兩次,連續(xù)2周。2周后誘發(fā)動(dòng)物,具有典型AIM(AIM評(píng)分大于20分)表現(xiàn),且APO誘導(dǎo)大鼠對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)增加者,為陰虛動(dòng)風(fēng)證LID模型。