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泰克生物是一家專業的CRO服務提供商,目前在建5000平米的GMP研究中心,能為我們的客戶提供高質量的哺乳表達定制服務。

全套Gibco無血清哺乳細胞培養,配合來源清晰的293F,CHO懸浮細胞系,整個體系滿足于科學家對天然構象蛋白的體外重組表達需求,如糖基化修飾,磷酸化修飾等。為客戶提供的全套高性價比研究服務滿足GMP-like體系,包括細胞種子庫來源文件記錄體系、細胞種子批檢定,動物源成分的質控,標準化細胞培養與轉化操作流程,全套GE提供的純化填料和設備等準則進行生產的重組蛋白。

為了配合高質量的抗體發現服務,泰克生物建立了一套完整的蛋白體外哺乳重組表達,蛋白發酵與純化,QC控制的體系。我們的科學家均來自生物制藥企業,擁有多年的人用蛋白類藥物開發經驗,在深入學習和了解GMP規則下,嚴格按照QC質量控制體系, ICH和GMP指導原則進行重組蛋白類產品的開發,并為客戶提供個體化且高質量的重組蛋白定制服務。


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圖1 重組抗體(蛋白)發現示意圖


經過大量的實踐可知,要獲得優質的抗體藥候選序列,前期免疫抗原的制備具有傾向性,我們認為哺乳體系表達的全長蛋白免疫效果優于原核體系重組表達的全長蛋白(某些細胞因子除外),因此我們為客戶提供基于高密度Expi 293F和CHO-S體系的蛋白表達定制化服務,以滿足后期動物免疫,重組抗體篩選與性能鑒定的需求。目的蛋白體外重組表達流程與時間如表所示:


步驟

具體服務內容

周期

基因克隆及載體構建

* 擴增/鑒定基因片段或合成目的基因,插入哺乳動物細胞表達質粒

* PCR及測序檢測確定亞克隆基因

* 交付:測序數據和實驗方案

1-2周

瞬時蛋白表達

* 重組質粒轉染細胞(293F,CHO) :瞬時表達

* SDS-PAGE和WB檢測

* 交付:表達結果和實驗報告,0.02-5mg,純度>90%

12-14周

穩定表達(可選)

* 重組蛋白CHO或293F穩定表達細胞系構建和篩選

* 交付:穩定細胞系,構建報告;邊際產物,3個克隆,每個克隆50ml發酵產物

12–14周

小規模蛋白表達

* 少量表達及表達條件優化:1-5L的小規模蛋白表達

* 交付:優化報告,培養條件和全部重組蛋白

3-4周


服務優勢

? 密碼子優化:包含稀有密碼子分析,蛋白親水性分析和跨膜結構域的預測分析

? 多種融合標簽載體和宿主,以保證高可溶蛋白表達和高蛋白活性

? 高活性表達:實現復雜的糖基化修飾和磷酸化修飾,具有完整的空間結構特征

? 多重表達模式:穩定表達和瞬時表達

? 低內毒素水平:LAL檢測法<0.1EU/ug

? 完整的GMP-like文件支撐體系,保證您的產品所有材料、試劑和制備信息可追溯



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