抗體是免疫生物學(xué)研究過程中的工具。重組抗體由于高批間一致性,低背景的特性,且具有良好地保護(hù)動(dòng)物福利特性,越來受到廣大科學(xué)家的重視。
泰克生物是一家專業(yè)的CRO服務(wù)提供商,目前在建的5000平米的GMP研究中心,能為我們的客戶提供高質(zhì)量的抗體發(fā)現(xiàn)與生產(chǎn)服務(wù),如scfv抗體片段、fab抗體片段、sdAb單域抗體、兔單克隆抗體等重組抗體構(gòu)建和表達(dá)服務(wù)。
█ 什么是重組抗體/蛋白
重組抗體(蛋白)是指利用獲得的抗體(蛋白)氨基酸或堿基序列進(jìn)行體外表達(dá)載體構(gòu)建,轉(zhuǎn)染到合適的宿主細(xì)胞,如293F,CHO細(xì)胞,進(jìn)行表達(dá)后得到的抗體(蛋白)。重組抗體(或蛋白)從無到有的開發(fā)如圖1所示:
圖1 重組抗體(蛋白)發(fā)現(xiàn)示意圖
泰克生物能夠?yàn)榭蛻籼峁└哔|(zhì)量的抗體發(fā)現(xiàn)以及重組表達(dá)服務(wù)。我們的服務(wù)包括免疫抗原制備,動(dòng)物免疫,優(yōu)質(zhì)抗體序列發(fā)現(xiàn),抗體體外重組表達(dá),抗體規(guī)模制備等,并提供全程可追溯的文件體系配套服務(wù)。
█ 重組表達(dá)技術(shù)平臺
為了配合高質(zhì)量的抗體發(fā)現(xiàn)服務(wù),泰克生物建立了一套完整的蛋白體外哺乳重組表達(dá),蛋白發(fā)酵與純化,QC控制的體系。我們的科學(xué)家均來自生物制藥企業(yè),擁有多年的人用蛋白類藥物開發(fā)經(jīng)驗(yàn),在深入學(xué)習(xí)和了解GMP規(guī)則下,嚴(yán)格按照QC質(zhì)量控制體系,ICH和GMP指導(dǎo)原則進(jìn)行重組蛋白類產(chǎn)品的開發(fā),并為客戶提供個(gè)體化且高質(zhì)量的重組蛋白定制服務(wù)。
經(jīng)過大量的實(shí)踐可知,要獲得優(yōu)質(zhì)的抗體藥候選序列,前期免疫抗原的制備具有傾向性,我們認(rèn)為哺乳體系表達(dá)的全長蛋白免疫效果優(yōu)于原核體系重組表達(dá)的全長蛋白(某些細(xì)胞因子除外),因此我們?yōu)榭蛻籼峁┗诟呙芏菶xpi 293F和CHO-S體系的蛋白表達(dá)定制化服務(wù),以滿足后期動(dòng)物免疫,重組抗體篩選與性能鑒定的需求。免疫抗原體外重組表達(dá)流程與時(shí)間見表1:
表1 免疫抗原哺乳重組表達(dá)流程與周期
步驟 | 具體服務(wù)內(nèi)容 | 周期 |
Step1:基因克隆及載體構(gòu)建 | * 擴(kuò)增/鑒定基因片段或合成目的基因,插入哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒 * PCR及測序檢測確定亞克隆基因 * 交付:測序數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)方案 | 1-2周 |
Step2:瞬時(shí)蛋白表達(dá) | * 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞(293F,CHO) :瞬時(shí)表達(dá) * SDS-PAGE和WB檢測 * 交付:表達(dá)結(jié)果和實(shí)驗(yàn)報(bào)告,0.02-5mg,純度>90% | 12-14周 |
Step3:小規(guī)模蛋白表達(dá) | * 少量表達(dá)及表達(dá)條件優(yōu)化:1-5L的小規(guī)模蛋白表達(dá) * 交付:優(yōu)化報(bào)告,培養(yǎng)條件和全部重組蛋白 | 3-4周 |
█ 我們提供的服務(wù)
利用我們重組表達(dá)技術(shù)平臺,泰克生物可為客戶提供以下配套服務(wù):
重組蛋白293F/CHO細(xì)胞表達(dá)服務(wù)
全套Gibco無血清哺乳細(xì)胞培養(yǎng),適用于科學(xué)家對天然構(gòu)象蛋白的體外重組表達(dá)需求,如糖基化修飾,磷酸化修飾等。為客戶提供的滿足GMP-like體系,包括細(xì)胞種子庫來源文件記錄體系、細(xì)胞種子批檢定,動(dòng)物源成分的質(zhì)控,標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)化操作流程,全套GE提供的純化填料和設(shè)備等準(zhǔn)則進(jìn)行生產(chǎn)的重組蛋白。
嵌合抗體構(gòu)建與生產(chǎn)服務(wù)
定制化的嵌合抗體構(gòu)建,哺乳表達(dá)制備服務(wù)。無論您是從頭開發(fā)親本抗體序列還是已經(jīng)擁有親本抗體序列,您可以在泰克生物進(jìn)行人-鼠嵌合抗體,人-兔嵌合抗體,鼠-兔嵌合抗體制備,人-羊駝嵌合抗體制備等,滿足您個(gè)體化需求。具體信息,請參見 嵌合抗體構(gòu)建與生產(chǎn)服務(wù)。
單鏈抗體構(gòu)建和生產(chǎn)服務(wù)
單鏈抗體包括scFV和VHH抗體(駝源納米抗體)。簽署保密協(xié)議后,客戶可直接提供scFv和VHH序列,讓我們進(jìn)行重組表達(dá)并獲得高純度產(chǎn)品。如客戶僅有靶抗原信息,則可委托泰克生物進(jìn)行動(dòng)物免疫并篩選scFv和VHH抗體。具體信息,請參見 單鏈抗體制備服務(wù)。
抗體表位作圖服務(wù)
表位定位已成為疫苗和藥物開發(fā)的關(guān)鍵要素之一。表位作圖是鑒定蛋白質(zhì)與其相應(yīng)抗原的結(jié)合位點(diǎn)的過程。 FDA 和 EMEA指南建議對藥物與其監(jiān)管備案目標(biāo)之間的相互作用位點(diǎn)進(jìn)行分子分析。此外,更好地了解相互作用位點(diǎn)有助于開發(fā)更有效的藥物和具有保護(hù)的產(chǎn)品。具體信息,請參見抗體表位作圖服務(wù)。
█ 動(dòng)物免疫平臺
泰克生物為廣大客戶提供高質(zhì)量的免疫技術(shù)服務(wù),包括羊駝,駱駝,牛,羊,鼠等動(dòng)物免疫以及PBMC分離服務(wù)。收到客戶免疫抗原且通過泰克生物QC驗(yàn)證后,我們會(huì)交付給客戶設(shè)定好的免疫計(jì)劃表,包括血清效價(jià)ELISA檢測計(jì)劃,動(dòng)物免疫劑量,采血計(jì)劃等內(nèi)容,如表2所示病毒免疫案例,圖3所示免疫流程表:
表2 免疫計(jì)劃表
流程 | 時(shí)間 | 描述 | 日期 |
陰性血清采集 | Day 0 | 免疫前血清采集10mL | *** |
一免 | Day 1 | 5ml純病毒肌肉注射 | *** |
二免 | Day 14 | 5ml純病毒肌肉注射 | *** |
三免 | Day 28 | 5ml純病毒肌肉注射 | *** |
三免血清采集 | Day 35 | 采集血清30ml寄送客戶 | *** |
四免 | Day 42 | 5ml純病毒肌肉注射 | *** |
四免血清采集 | Day 49 | 采集檢測血清10ml | *** |
五免 | Day 56 | 5ml純病毒肌肉注射 | *** |
五免血清采集 | Day 63 | 采集檢測血清10ml | *** |
中和效價(jià)測定 | Day 63 | 同時(shí)檢測四免和五免血清中和效價(jià) | *** |
圖2常規(guī)動(dòng)物免疫免疫流程表