靶向蛋白質組學工作流程檢測技術服務詳情介紹
在現代dànbáizhì組學研究中,靶向dànbáizhì組學(Targeted Proteomics)因其zhuóyuè的定量性能和高重復性,成為生物標志物驗證、藥物作用機制研究和臨床伴隨診斷等領域的關鍵技術手段。與發現型dànbáizhì組學側重“廣度探索”不同,靶向dànbáizhì組學強調“深度驗證”和“jīngquè定量”,對實驗流程的規范性和技術平臺的性能提出了更高要求。本文將圍繞靶向dànbáizhì組學的六大核心流程步驟,結合實際應用,幫助科研人員更高效地規劃和執行靶向蛋白組項目。
一、靶點蛋白與肽段的篩選設計
? 目的:明確檢測目標,確保特異性與代表性
· 依據前期數據或文獻確定感興趣的蛋白靶點
· 利用數據庫(如UniProt、PeptideAtlas)篩選dútè肽段
· 考慮肽段的酶切效率、修飾位點、物化性質
二、內標肽合成
? 目的:提高定量準確性,進行juéduì定量
· 合成帶穩定同位素標記的肽段(如^13C/^15N)
· 與樣本中的目標肽共洗脫、共離子化
· 用于校正信號波動,提升批間數據一致性
三、樣本前處理與酶解
? 目的:獲得高質量、可重現的肽段混合物
· 樣本裂解(適應不同組織、細胞、血液樣本)
· 蛋白定量 + 標準化加樣
· yídànbáiméi酶解 + 脫鹽凈化
四、質譜方法開發(MRM/PRM)
? 目的:建立穩定可重復的靶點檢測方法
· 選擇三重四極桿或Orbitrap平臺
· 針對每個肽段優化碎裂電壓、保留時間窗口、離子對
· 控制背景干擾,提高信噪比
五、LC-MS/MS檢測與質控
? 目的:高靈敏度檢測目標肽段,確保數據穩定
· jīngzhǔn控制進樣體積與保留時間
· 設置QC樣本和Pool樣本交叉檢測
· 實施質控指標監測(CV值、內標漂移等)
六、數據分析與結果報告
? 目的:從原始數據到可解釋的生物學信息
· 使用 Skyline / SpectroDive 進行峰識別與積分
· 結合內標進行歸一化與juéduì定量
· 提供統計分析、差異顯著性評估、可視化圖表
靶向dànbáizhì組學的工作流程每一步都影響數據質量和后續分析解讀。從靶點選擇到方法建立,再到樣本處理和數據分析,任何一處不規范都可能造成定量誤差甚至結果偏差。百泰派克生物科技采用高通量質譜平臺提供靶向dànbáizhì組學分析服務,包括MRM和PRM定量蛋白組學分析,以及juéduì定量分析。
百泰派克生物科技特色項目
一、蛋白測序
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
二、dànbáizhì組學
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
三、單細胞質譜流式技術分析
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術優良,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
五、生物藥物表征
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
百泰派克生物科技七大檢測平臺
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質譜多組學優質服務商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務;
3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業,10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!