胰彈性蛋白酶(ELA1)卵白蛋白偶聯物
- 公司名稱 上海研生實業有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地 國產
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2023/3/23 9:01:13
- 訪問次數 554
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| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | OVA Conjugated Pancreatic Elastase 1 (ELA1) |
| 種屬 | Homo sapiens (Human，人) | 規格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
公司產品僅供科研使用，不得用于臨床！
產品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
胰彈性蛋白酶(ELA1)卵白蛋白偶聯物 | OVA Conjugated Pancreatic Elastase 1 (ELA1) | Homo sapiens (Human，人) |
商品介紹：
PE; CELA1; Chymotrypsin-Like Elastase Family,Member 1 酶與激酶 感染免疫 肝膽病學 物種：Homo sapiens (Human，人) 來源：蛋白偶聯 原分子量- 緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點：- 應用：Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化：
1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
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注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續操作。
4、本產品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養細胞蛋白提取
1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；
2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
AL產品名稱: 醛縮mei2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
應用類型: Other英文名稱: Eef1g標記: Unconjugated
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