中華絨螯蟹是我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中重要淡水物種.隨著細(xì)菌和弧菌的廣泛蔓延,水產(chǎn)業(yè)遭受了重大的損失.中華絨螯蟹無(wú)脊椎動(dòng)物缺乏適應(yīng)性免疫系統(tǒng),面對(duì)水體復(fù)雜多變的環(huán)境只能依靠先天免疫系統(tǒng)的有效性.因此,在先天免疫系統(tǒng)中中華絨螯蟹的抗性機(jī)制的研究是非常重要的.脂肪酸結(jié)合蛋白(fatty acid-binding proteins) FABPs在脂質(zhì)結(jié)合蛋白家族中顯得至關(guān)重要,廣泛分布在脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物體內(nèi).FABPs貫穿于生物體生命活動(dòng)的各個(gè)過(guò)程,主要包含脂肪酸的汲取與轉(zhuǎn)運(yùn),能量的貯存與代謝,調(diào)度細(xì)胞增殖,基因轉(zhuǎn)錄和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),增強(qiáng)膜合成與過(guò)氧化物的氧化,維護(hù)機(jī)體內(nèi)環(huán)境的均衡,介入免疫調(diào)節(jié)等過(guò)程.目前,FABPs在營(yíng)養(yǎng)代謝方面的研究已經(jīng)比較成熟,然而其在無(wú)脊椎動(dòng)物的免疫調(diào)節(jié)領(lǐng)域的研究卻少之又少.綜上所述,FABPs是否參與中華絨螯蟹免疫反應(yīng)成為當(dāng)前一個(gè)研究熱點(diǎn).本實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò)克隆成功獲取了中華絨螯蟹心型脂肪酸結(jié)合(Es-FABP3)基因的全序列,通過(guò)組織表達(dá)我們發(fā)現(xiàn)了一個(gè)很有趣的現(xiàn)象:Es-FABP3在中華絨螯蟹免疫相關(guān)性器官(肝胰腺,鰓和血細(xì)胞)中的表達(dá)相對(duì)較高.隨后,我們選擇了三種經(jīng)典的病原相關(guān)分子模式PAMPs (pathogen associated molecular patterns)對(duì)中華絨螯蟹實(shí)行免疫刺激,Es-FABP3基因mRNA的表達(dá)量在細(xì)胞中發(fā)生了顯著性的改變,并且當(dāng)G1u和PG的刺激后,mRNA表達(dá)水平呈現(xiàn)出先上升后下降的變化趨勢(shì),由此推斷Es-FABP3很可能在中華絨螫蟹的免疫反應(yīng)中發(fā)揮了作用.為了更全面的探討其免疫相關(guān)機(jī)制,我們通過(guò)原核表達(dá)技術(shù)獲得了Es-FABP3的重組蛋白.蛋白水平的研究發(fā)現(xiàn),rEs-FABP3蛋白可以廣泛結(jié)合多種微生物,包括革蘭氏陽(yáng)性菌,革蘭氏陰性菌和真菌.同時(shí),我們檢測(cè)到rEs-FABP3蛋白可以抑制微生物的生長(zhǎng),高濃度條件下甚至可以直接殺菌.這些結(jié)果表明,rEs-FABP3在PAMPs刺激后起到了重要的免疫作用.