氧化型/脫氫抗壞血酸（DHA）含量測試盒

分光光度法 50 管/48 樣 

注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。 

測定意義： 

AsA 作為植物細胞一個重要生理指標，其 AsA 的含量、氧化還原狀態(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關酶類活性的變化涉及植物對一系列環境脅迫的響應。DHA 是 AsA 的可逆的氧化型，在生物體內，與抗壞血酸共同組成氧化還原系統，具有電子受體的作用。 

測定原理： 

DTT 還原 DHA 生成 AsA，通過測定體系中 AsA 的生成速率，即可計算出 DHA 含量。 

自備儀器和用品： 

低溫離心機、紫外分光光度計、1mL 石英比色皿、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。 

試劑組成和配制： 

試劑一：液體 50 mL×1 瓶，室溫保存。 

試劑二：液體 40 mL×1 瓶，室溫保存。 

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 10mL 蒸餾水充分溶解。 

標準品：粉劑×1 瓶， 4℃保存。臨用前加入 5.743 mL 蒸餾水充分溶解；吸取 0.1 mL 上述溶液，加入 0.9 mL 蒸餾水，混勻，即為 100μmol/L DHA。 

樣品中 DHA 提取： 

1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿。12000g，4℃離心 20min，取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議500 萬細胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；12000g，4℃離心 10min，取上清液置于冰上待測。

3. 血清等液體：直接測定。氧化型/脫氫抗壞血酸（DHA）含量測試盒