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使用FL 6500熒光光譜儀和NanoOrange染料進行蛋白質定量

檢測樣品：NanoOrange染料

檢測項目：蛋白質定量

方案概述：使用珀金埃爾默FL 6500™熒光光譜儀監測NanoOrange®熒光團與BSA非共價相互作用時觀察到的熒光增強，并構建了標準曲線。

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更新時間2024年12月02日

上傳企業珀金埃爾默企業管理（上海）有限公司

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方案詳細說明相關產品清單

自1982年第一款重組蛋白藥物進入市場(第一款人胰島素¹實現商業化)以來，生物制藥領域見證了蛋白質治療藥物數量的持續擴大。例如，單克隆抗體(mAb)、生長因子、激素是目前用于治療癌癥、HIV、多發性硬化癥等多種疾病的生物治療藥物²。這些生物治療藥物的復雜生產工藝涉及精確的蛋白質定量，以確保最終配方的療效和質量。此外，蛋白質還是研究酶活性、基因表達調控、信號通路和疾病機理的各種生物分子檢測的關鍵成分。所有執行這些檢測的實驗室均會進行蛋白質定量分析，以揭示復雜的生物分子機制。

根據所需的精度、動態定量范圍、與潛在污染物(洗滌劑、還原劑和溶劑)的相容性以及蛋白質間的差異，目前有多種方法可用于蛋白質定量。這些方法包括直接蛋白質紫外吸收測量法(A₂₈₀)、銅基測定法(BCA和Lowry方法)、蛋白質-染料復合物吸收(Bradford)、熒光基測定和更復雜的測定，如ELISA或Western-Blot測定。

在本研究中，選擇熒光法是基于其優異的靈敏度、特異性以及特別適合于復雜生物樣品中低豐度蛋白質的檢測。使用珀金埃爾默FL 6500™熒光光譜儀監測NanoOrange^®熒光團與BSA非共價相互作用時觀察到的熒光增強，并構建了標準曲線。

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