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使用 Bio-Monolith Protein G 色譜柱 檢測保健食品中的 IgG
檢測樣品:保健食品
檢測項目:IgG
方案概述:基于色譜柱的特異性和樣品特性,本研究采用 Agilent Bio-Monolith Protein G 色譜柱分析保健食品中的 IgG 含量,并對不同來源的 IgG 進行了測定,驗證了 Bio-Monolith Protein G 色譜柱的適用性。
免疫球蛋白也稱為抗體,是免疫反應(yīng)的重要組成部分。已發(fā)現(xiàn)人和哺乳動物體內(nèi)含有五種不同的抗體,分別是 IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。根據(jù)氨基酸序列的細微差異,這些抗體可以分為不同的亞型,例如 IgG 可分為 IgG1、IgG2、IgG3 和 IgG4 亞型。免疫球蛋白結(jié)合蛋白是一類用于生物親和色譜的配體,Protein A 和 Protein G 是其中主要的兩種。這兩種蛋白均與免疫球蛋白的 Fc 段特異性結(jié)合,使得它們可以應(yīng)用于免疫球蛋白的純化。Protein A 和 Protein G 在結(jié)合的抗體種類和結(jié)合力強弱方面存在差異。以人免疫球蛋白為例,Protein A 色譜柱對 IgG1、IgG2 和 IgG4 具有高親和力,對 IgG3 沒有親和力,同時對其他四種免疫球蛋白具有一定的親和力;而 Protein G 對四種 IgG 亞型均具有高親和力,但是對 IgA、IgD、IgE 和 IgM 則缺乏親和力[1]。
Bio-Monolith 色譜柱填料為聚合物基質(zhì),能夠在 pH 2–11 的寬范圍內(nèi)保持穩(wěn)定;且由于色譜柱屬于整體柱,柱床較小,因此有利于在不同流動相之間快速轉(zhuǎn)換,從而提供較高的分析速度和通量?;谏V柱的特異性和樣品特性,本研究采用 Agilent Bio-Monolith Protein G 色譜柱分析保健食品中的 IgG 含量,并對不同來源的 IgG 進行了測定,驗證了 Bio-Monolith Protein G 色譜柱的適用性。
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