固相萃取儀(SPE)作為一種高效的樣品前處理技術，其性能受多種因素影響，包括固定相選擇、樣品特性、操作條件、柱容量及環境因素等。以下從關鍵影響因素出發，結合實驗原理與實際應用進行系統分析：
一、固定相(SPE柱)的選擇與性能
1. 填料類型與極性匹配
SPE柱的固定相需根據目標化合物的極性、電荷及分子大小選擇。例如：
- 反相C18柱：適用于非極性或弱極性物質(如環境污染物)，但需注意硅膠基質表面硅羥基在pH>4時的離子化效應。
- 正相柱：用于極性物質，受pH影響較小。
- 離子交換柱：通過調節pH控制目標物的離子化狀態，實現選擇性吸附(如陰離子交換柱吸附堿性物質)。
2. 柱容量與突破體積
- 柱容量指填料對目標物的最大吸附量，硅膠基質柱容量通常為填料質量的5%，聚合物基質則為其3倍。若上樣量超過柱容量，目標物會過早穿透，導致回收率下降。
- 突破體積與樣品濃度相關，高濃度樣品需降低上樣量或稀釋后進樣。
二、樣品特性的影響
1. pH值與離子化狀態
- 調節樣品pH可控制目標物與干擾物的離子化狀態，從而改變其在固定相上的保留行為。例如：
- 堿性物質在低pH環境下呈離子態，易與硅羥基形成靜電吸引，導致C18柱回收率下降；
- 酸性物質需酸化處理以中性形態吸附于反相柱。
- 離子交換柱需通過pH調控使目標物帶電，與固定將發生離子交換作用。
2. 樣品基質復雜度
- 高有機溶劑含量的樣品可能導致目標物在上樣時不被保留(如反相柱中甲醇占比過高)。
- 顆粒物或黏度較高的樣品可能堵塞柱床，影響流速穩定性。
三、操作條件的優化
1. 流速控制
- 活化流速：需適中(如1 mL/min)以確保填料官能團充分展開。
- 上樣與洗脫流速：過快會導致填料浸潤不充分、溝渠效應或傳質效率低，推薦流速≤1 mL/min(痕量富集時≤5 mL/min)。
2. 洗脫溶劑的強度與體積
- 洗脫溶劑極性需與固定相匹配，反相柱常用甲醇或乙腈，正相柱用非極性溶劑(如己烷)。
- 洗脫體積需平衡回收率與富集倍數，可通過多次小體積洗脫優化。
四、柱處理與環境因素
1. 活化與淋洗步驟
- 活化溶劑需與固定相兼容(如反相柱用甲醇或丙酮潤濕)，避免填料干燥。
- 淋洗后抽干水分可減少乳化風險，提高洗脫效率。
2. 環境與耗材質量
- 實驗室溫度波動可能影響填料性質(如硅膠柱在高溫下溶膠化)。
- 低質量SPE柱或污染的器具會導致交叉污染或結果偏差。
五、其他關鍵因素
1. 交叉污染防控
- 重復使用SPE柱需再生，避免殘留干擾物。
- 農殘檢測中常采用GCB凈化色素，但需注意其解吸困難性。
2. 方法驗證
- 需通過加標回收實驗評估方法的準確性(回收率應達80%-115%)，并考察精密度與檢測限。
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