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凝膠成像系統中的光源因素
閱讀：3135 發布時間：2017-4-14
凝膠成像系統概念：
它是以一套可對凝膠進行成像的光學系統，而光源便是其光路系統的重要組成部分，可以說沒了光源，成像系統幾乎無法運行使用，但與CCD、鏡頭以及分析軟件相比，往往卻沒有得到應有的重視。我們經常遇到這樣的用戶，他們知道系統光源出現故障或整個系統報廢的時候都不知道凝膠成像透射紫外中有305nm與365nm兩種紫外燈管，或者搞不清他們之間有何區別。這其中固然有銷售商售后的不到位，但也反映出我們對凝膠成像系統光源的不重視和缺乏足夠的了解，希望這篇文章能夠幫您理清他們的區別和各自的作用。
凝膠成像系統類別：
根據應用的不同，往往不同型號凝膠成像產品配有差異性的光源，大致類型可分為白光光源、紫外光源和高強度三色LED燈，其中白光和紫外光源又分別有透射和反射之分。
1、 不銹鋼材質DE-500暗箱機身；
2、 CCD所在位置；
3、 鏡頭所在位置；
4、 機身光源控制面板，可控制濾光輪位置和激發光源開關；
5、 雙側反射白光光源；
6、 雙側雙波長（254nm、365nm）反射紫外光源；
7、 高度可調的抽拉式托盤，供化學發光使用；
8、 透射白光板，可折疊；
9、 雙波長（302nm、365nm）紫外透射光源。
在Fluorchem Q多色熒光成行系統中，雙側還安裝了三色LED燈光源。
首先是雙側反射白光光源，也是我們使用zui多的光源，通常作為系統照明光源使用，即放置或調整DNA膠或蛋白膠位置，或在對鏡頭調整聚焦時使用，當然在對非透明材質的蛋白膠或其他成像物質進行成像時也需開啟反射白光。
其次透射白光，即通常所說白光板，主要用于蛋白質膠拍攝時使用，因為白光板位于透射紫外燈箱上方，所以為不影響透射紫外光源的使用，同時也更節約室內空間，白光板一般可以折疊豎立在箱體后部。
透射紫外光源，即紫外透射燈箱，主要用于DNA膠拍攝，由于DNA常用的熒光染料是EB（即Ethidium bromide，溴化乙錠），而用標準302nm 紫外光透射儀激發并放射出橙紅色信號，可用帶CCD成像頭的凝膠成像系統拍攝到，所以透射紫外的波長通常是305nm段。
紫外反射燈源，一般為選配件，主要原因是其使用并不廣泛，只是在非透明材質的DNA跑膠載體如紙層析等的成像才需要使用。往往比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠與聚丙烯酰胺凝膠，透射光源*可以滿足，所以大部分廠家都只將紫外反射光源作為選配，只是在儀器上預留了位置與接口。還要指出的是抽拉式托盤的使用，由于化學發光成像無需任何光源，屬自發光成像，但由于化學發光的信號比較微弱，不穩定，同時化學發光凝膠成像系統的鏡頭往往是手動聚焦，所以需要一個高度可調的托盤專門供化學發光成像使用。此外，上文提到的三色LED燈光源是3個高光強反射激發器（475納米,、534納米、632納米），為多色熒光成像系統的比不可少的組成部分。Fluorchem HD2 的DE-500暗箱還預留連續波長光源光纖接口，以便于將來擴展至連續波長光源（激發光的波長范圍400-750nm），涵蓋了一些需要特殊激發光的熒光，多應用于多色熒光（Cy3/Cy5）和活體成像。