紫外分析儀的作用原理
閱讀:1044 發布時間:2023-3-27
一、系列分類:有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等系列,不同的紫外分析儀有不同的用途。紫外分析儀采用不同波長引進電泳分析、檢測,PCR產物檢測,DNA指紋圖譜分析,紙層分析或薄層分析等。
二、發展原理:熒光技術是某些物質受一定波長的光激發后,在極短時間內(10-8秒)會發射出波長大于激發波長的光,這種光稱為熒光。這一發光現象在各方面的應用及有關的方法稱為熒光技術(fluorescenttechnique)。
三、第一種是自發熒光,如葉綠素、血紅素等經紫外線照射后,能發出紅色的熒光,稱為自發熒光;第二種是誘發熒光,即物體經熒光染料染色后再通過紫外線照射發出熒光,稱為誘發熒光。
四、作用方法:
(1)定量測定:利用在較低濃度下熒光強度與樣品濃度成正比這一關系可以定量分析樣品中熒光組分的含量,常用于測定氨基酸、蛋白質、核酸的含量。熒光定量測定的一個優點是靈敏度高,例如維生素B2的測定可達1毫微克/毫升,這一優點使測定時所需要樣品量大大減少。
(2)這種定量測定方法還可應用于酶催化的反應,只要反應前后有熒光強度的變化,就可用來測定酶的含量及酶反應的速率等。
(3)利用熒光壽命、量子產率等參數可以研究生物大分子中的能量轉移現象:通過該現象的研究,可以獲得生物大分子內部的許多信息。將一些特殊的熒光染料分子共價地結合或吸附在生物大分子的某一部位,通過測定該染料分子的熒光特性變化來研究生物大分子,這種染料分子被稱為“熒光探針”,它們發出的熒光一般稱為外源熒光。